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Bacillus aerius S-7菌株纤溶酶的分离纯化及纤溶活性分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 引言第10-19页
   ·血栓性疾病概述第11-13页
     ·血栓性疾病第11页
     ·血栓性疾病的分类第11页
     ·血栓的形成因素第11-12页
     ·血栓的形成机制第12-13页
     ·血栓的溶解机制第13页
   ·血栓性疾病的预防与治疗第13-14页
     ·血栓性疾病的预防第13页
     ·血栓性疾病的治疗第13-14页
   ·抗血栓药物研究进展第14-16页
     ·抗血小板药物第14页
     ·抗凝药物第14页
     ·溶栓药物第14-16页
   ·微生物源溶栓药物的现状第16-18页
     ·纳豆激酶(Nattokinase,NK)第16-17页
     ·豆豉纤溶酶(Douchi Fibrinolytic Enzyme,DFE)第17-18页
     ·其他微生物来源的溶栓药物第18页
     ·本实验室研究微生物源纤溶药物的进展第18页
   ·溶栓药物的发展前景第18页
   ·立题意义第18-19页
第二章 纤溶酶高产菌株的筛选与鉴定第19-25页
   ·材料第19页
     ·样品第19页
     ·缓冲液及培养基第19页
     ·主要试剂及仪器设备第19页
   ·试验方法第19-21页
     ·纤溶酶活力的测定方法第19-20页
     ·纤溶酶高产菌株的分离筛选第20页
     ·S-7 菌株形态及生理生化特征鉴定第20页
     ·S-7 菌株总DNA 的提取和16S rDNA 序列测定第20页
     ·16S rDNA 序列分析及系统发育树绘制第20-21页
   ·结果与分析第21-24页
     ·纤溶酶高产菌株的分离筛选第21页
     ·S-7 菌株的菌落形态第21-22页
     ·S-7 菌株的菌体形态第22页
     ·S-7 菌株的生理生化特性第22-23页
     ·S-7 菌株的16SrDNA 测序结果及系统发育树第23-24页
   ·讨论第24-25页
第三章 Bacillus aerius S-7 菌株发酵条件优化第25-35页
   ·材料第25页
     ·试验菌株第25页
     ·试验试剂及仪器第25页
     ·培养基第25页
   ·方法第25-26页
     ·Bacillus aerius S-7 菌株液体种子培养第25-26页
     ·液体发酵培养及培养基和培养条件优化第26页
     ·纤溶酶活力的测定方法第26页
   ·结果与讨论第26-34页
     ·尿激酶活力标准曲线第26-27页
     ·发酵培养基主要成分对菌株Bacillus aerius S-7 菌株产酶的影响第27-30页
     ·发酵工艺条件对菌株Bacillus aerius S-7 产纤溶酶的影响第30-34页
   ·讨论第34-35页
第四章 菌株Bacillus aerius S-7 纤溶酶的分离纯化第35-44页
   ·材料第35-37页
     ·菌株第35页
     ·培养基第35页
     ·试验试剂及仪器第35页
     ·缓冲液及电泳储存液第35-37页
   ·试验方法第37-39页
     ·纤溶酶活力测定第37页
     ·蛋白质浓度的测定第37页
     ·菌株Bacillus aerius S-7 纤溶酶粗品的制备第37页
     ·纤溶酶粗品S-7FE 等电点的测定第37-38页
     ·DEAE-Sepharose fast flow 阴离子交换层析第38页
     ·蛋白纯度鉴定及表观相对分子质量测定第38页
     ·转膜测序第38-39页
   ·结果与分析第39-43页
     ·蛋白质浓度标准曲线第39页
     ·菌株Bacillus aerius S-7 纤溶酶粗品的制备第39页
     ·纤溶酶粗品S-7FE 活性成分等电点的测定第39-40页
     ·DEAE-Sepharose fast flow 阴离子交换层析第40-41页
     ·SDS-PAGE 电泳检测分离组分纯度及分子量的测定第41页
     ·转膜及N-端氨基酸序列分析第41-43页
     ·蛋白纯化方案评价第43页
   ·讨论第43-44页
第五章 纤溶酶S-7FE-1 组分的酶学性质及体外溶栓特性第44-54页
   ·材料第44页
     ·供试酶第44页
     ·试剂第44页
   ·试验方法第44-46页
     ·纤溶酶活力测定第44页
     ·豆豉纤溶酶组分S-7FE-1 的酶学性质第44-46页
     ·豆豉纤溶酶组分S-7FE-1 体外溶栓、抗凝及溶血的研究第46页
   ·结果与讨论第46-53页
     ·豆豉纤溶酶组分S-7FE-1 酶学性质第46-51页
     ·豆豉纤溶酶组分S-7FE-1 体外溶栓、抗凝及溶血的研究第51-53页
   ·讨论第53-54页
第六章 纤溶酶S-7FE-1 组分的安全性研究第54-60页
   ·材料第54页
     ·供试酶第54页
     ·试验动物及试剂第54页
   ·方法第54-56页
     ·急性毒性试验第54-55页
     ·皮下出血试验第55页
     ·过敏性试验第55-56页
   ·结果与分析第56-58页
     ·急性毒性试验第56-57页
     ·皮下出血试验第57-58页
     ·过敏性试验第58页
   ·讨论第58-60页
结论第60-61页
创新性第61-62页
参考文献第62-66页
附录第66-69页
 附录1第66-67页
 附录2第67-69页
作者简介第69-71页
致谢第71-72页

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