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马铃薯腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因克隆

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-6页
第一章: 文献综述第6-14页
 1 马铃薯淀粉生物合成机制第7-12页
  1.1 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶第7-11页
   1.1.1 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶定位第9页
   1.1.2 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶调控第9-11页
    1.1.2.1 转录水平的调控第9页
    1.1.2.2 环境条件对腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶的调控第9-10页
    1.1.2.3 化学物质和生物小分子、大分子物质对腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶的调控第10-11页
    1.1.2.4 利用分子生物学方法调控腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶活性第11页
  1.2 淀粉合成酶第11-12页
  1.3 淀粉分支酶第12页
  1.4 淀粉去分支酶第12页
 2 反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)第12-13页
 3 马铃薯淀粉合成有关酶的基因克隆第13-14页
第二章 AGPasre基因克隆第14-31页
 1 材料与试剂第14页
  1.1 材料第14页
  1.2 菌种及质粒第14页
  1.3 试剂第14页
 2 方法第14-23页
  2.1 马铃薯叶片总RNA的提取第14-15页
  2.2 PCR 引物设计与合成第15页
  2.3 AGPase基因的扩增第15-16页
   2.3.1 cDNA第一链的合成第15-16页
   2.3.2 AGPase基因PCR扩增第16页
   2.3.3 PCR产物的凝胶电泳第16页
  2.4 目的片段的回收和克隆第16-23页
   2.4.1 目的片段的回收第16-17页
   2.4.2 重组体的构建及向宿主细胞的导入第17-18页
   2.4.3 重组体的筛选与鉴定第18-20页
   2.4.4 重组体DNA测序第20-23页
 3 结果与分析第23-28页
  3.1 马铃薯叶片中AGPase的诱导和总RNA的提取第23页
  3.2 cDNA中目的基因片段的PCR扩增第23-24页
  3.3 克隆、阳性重组体的筛选第24-25页
  3.4 核苷酸序列分析第25-28页
 4 讨论第28-31页
  4.1 马铃薯RNA提取方法和取材第28-29页
  4.2 PCR扩增及引物设计中加入酶切位点第29-31页
第三章 AGPase基因植物表达载体构建和专化农杆菌第31-39页
 1 材料与试剂第31页
  1.1 载体第31页
  1.2 菌株第31页
  1.3 试剂第31页
 2 方法第31-35页
  2.1 植物表达载体构建第31-32页
   2.1.1 质粒的提取方法第31页
   2.1.2 pBI121质粒和pGEMA质粒的酶切和目的片段的回收第31-32页
   2.1.3 线状载体分子与目的基因DNA分子的连接第32页
   2.1.4 植物表达载体的酶切鉴定第32页
  2.2 表达载体专化农杆菌第32-35页
   2.2.1 农杆菌感受态的制备第32-33页
   2.2.2 植物表达载体专化农杆菌第33页
   2.2.3 农杆菌整合外源基因的PCR鉴定第33-35页
 3 结果与分析第35-36页
  3.1 AGPase基因表达载体的构建第35-36页
  3.2 重组子导入农杆菌LB4404第36页
  3.3 农杆菌工程菌的鉴定第36页
 4 讨论第36-39页
  4.1 基因表达载体的构建第36-37页
  4.2 专化农杆菌及其鉴定第37-39页
第四章 结论第39-40页
参考文献第40-45页
致谢第45页

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