| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-18页 |
| ·大蒜病毒病及其研究进展 | 第7-11页 |
| ·马铃薯Y病毒属 | 第8-9页 |
| ·香石竹潜隐病毒属 | 第9-10页 |
| ·青葱X病毒属 | 第10-11页 |
| ·大蒜病毒的病原鉴定及检测方法 | 第11-16页 |
| ·目测法 | 第11页 |
| ·生物学测定 | 第11-12页 |
| ·电子显微镜法 | 第12-13页 |
| ·血清学方法 | 第13页 |
| ·分子生物学技术 | 第13-16页 |
| ·核酸杂交技术（Nucleic acid hybridization） | 第13页 |
| ·聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR） | 第13-16页 |
| ·实时荧光定量 PCR(Real-time Fluorescent Quantitative PCR) | 第16页 |
| ·多重PCR体系优化及正交设计在其中的应用 | 第16-17页 |
| ·研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-25页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·试验材料与试剂 | 第18页 |
| ·主要试验仪器 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-25页 |
| ·特异性引物的设计 | 第18-19页 |
| ·基本的分子生物学方法 | 第19-22页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第19页 |
| ·PCR产物回收、纯化 | 第19-20页 |
| ·DNA片段与pMD18 -TVector连接 | 第20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·重组质粒的转化 | 第21页 |
| ·质粒的提取 | 第21页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第21-22页 |
| ·三种大蒜病毒多重 RT-PCR 检测体系的建立 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR | 第22-23页 |
| ·病毒样品单一PCR扩增 | 第23页 |
| ·GLV、LYSV 多重 RT-PCR 检测体系建立 | 第23-24页 |
| ·正交设计直观分析法优化多重RT-PCR反应体系 | 第23页 |
| ·退火温度的筛选 | 第23页 |
| ·RT-PCR 检测灵敏度测定 | 第23-24页 |
| ·GLV、OYDV、LYSV 两两多重 RT-PCR 检测体系的建立 | 第24页 |
| ·多重RT-PCR检测不同品种大蒜植株 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与分析 | 第25-35页 |
| ·大蒜总RNA提取 | 第25页 |
| ·GLV、OYDV、LYSV 单一RT-PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·GLV、LYSV两重RT-PCR反应体系确立 | 第26-29页 |
| ·正交设计直观分析法优化多重RT-PCR反应体系 | 第26-28页 |
| ·多重RT-PCR反应体系确立 | 第28页 |
| ·灵敏度测定 | 第28-29页 |
| ·三种大蒜病毒两重RT-PCR检测体系建立 | 第29页 |
| ·多重RT-PCR产物测序与分析 | 第29-33页 |
| ·GLV序列比对结果与分析 | 第29-31页 |
| ·LYSV序列比对结果与分析 | 第31-32页 |
| ·OYDV序列比对结果与分析 | 第32-33页 |
| ·应用多重RT-PCR检测不同大蒜品种 | 第33-35页 |
| 第四章 讨论 | 第35-40页 |
| ·RNA的提取 | 第35-37页 |
| ·GLV、LYSV、OYDV的RT-PCR检测 | 第37-38页 |
| ·多重PCR体系的优化 | 第38-39页 |
| ·多种病毒的复合侵染 | 第39-40页 |
| 第五章 结论与展望 | 第40-42页 |
| ·主要结论 | 第40页 |
| ·展望 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录：主要试剂及溶液配制 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 导师简介 | 第54-55页 |
