中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-31页 |
一 小麦遗传转化研究进展 | 第13-19页 |
·小麦基因转化方法 | 第13-16页 |
·PEG介导法 | 第13页 |
·激光微束法 | 第13-14页 |
·电击法 | 第14页 |
·基因枪法 | 第14页 |
·花粉管通道法 | 第14-15页 |
·农杆菌介导法 | 第15-16页 |
·转基因阳性小麦的筛选和检测方法 | 第16-17页 |
·外源基因的表达分析方法 | 第17-19页 |
·RT-PCR分析 | 第18页 |
·Northern blotting分析 | 第18页 |
·表达蛋白分析 | 第18-19页 |
二 植物盐害和耐盐机理研究进展 | 第19-23页 |
·植物盐害机理 | 第19-21页 |
·渗透胁迫 | 第19-20页 |
·离子胁迫 | 第20页 |
·盐分积累 | 第20页 |
·氧化胁迫 | 第20-21页 |
·植物耐盐机理 | 第21-23页 |
·离子平衡的重建 | 第21-22页 |
·渗透平衡调节 | 第22-23页 |
·活性氧(ROS)在细胞内的清除机制 | 第23页 |
三 植物盐胁迫应答的分子机制研究进展 | 第23-31页 |
·植物盐胁迫相关的信号转导途径 | 第23-28页 |
·SOS信号途径 | 第23-26页 |
·MAPK渗透/氧化胁迫信号转导途径 | 第26-27页 |
·ABA相关的信号转导途径 | 第27-28页 |
·植物Na~+/H~+逆向转运蛋白研究 | 第28-31页 |
·质膜Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第28-29页 |
·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第29-31页 |
第二部分 材料和方法 | 第31-42页 |
一 实验材料及转化所用的菌株,目的基因和质粒载体结构 | 第31-32页 |
·实验材料 | 第31页 |
·转化所用的菌株,目的基因和质粒载体结构 | 第31-32页 |
二 农杆菌转化 | 第32页 |
·菌液的制各 | 第32页 |
·小麦生长点转化 | 第32页 |
三 转基因植株的筛选及鉴定 | 第32-41页 |
·转基因植株的筛选 | 第32页 |
·PCR鉴定 | 第32-34页 |
·DNA的提取 | 第32-33页 |
·PCR引物 | 第33页 |
·扩增体系 | 第33-34页 |
·扩增程序 | 第34页 |
·电泳 | 第34页 |
·Southern杂交鉴定 | 第34-39页 |
·质粒酶切及探针片段的回收 | 第34-35页 |
·DNA提取 | 第35页 |
·基因组DNA的酶切和电泳 | 第35页 |
·转膜 | 第35-36页 |
·探针标记 | 第36-37页 |
·杂交及检测 | 第37-39页 |
·RT-PCR分析 | 第39-41页 |
·Trizol法提取叶片总RNA | 第39页 |
·总RNA的纯化 | 第39-40页 |
·RT-PCR的体系和程序 | 第40-41页 |
四 转基因小麦后代遗传与生化分析 | 第41-42页 |
·T2代遗传分析 | 第41页 |
·后代种子盐胁迫下萌发率分析 | 第41页 |
·后代盐胁迫下生长量分析 | 第41页 |
·后代盐胁迫下Na~+,K~+分析 | 第41页 |
·后代盐胁迫下MDA分析 | 第41页 |
·后代盐胁迫下过氧化氢酶分析 | 第41-42页 |
第三部分 结果与分析 | 第42-56页 |
一 转基因植株PCR鉴定和转化频率 | 第42-46页 |
·转化植株相应抗生素或除草剂的筛选 | 第42-43页 |
·PCR分析结果 | 第43-44页 |
·转化频率分析结果 | 第44-46页 |
二 转基因植株的Southern杂交结果分析 | 第46-47页 |
三 转基因植株的T2代遗传分析 | 第47页 |
四 转基因植株的RT-PCR分析 | 第47-50页 |
·总RNA提取结果 | 第47-48页 |
·SOS基因在转基因植株中的表达 | 第48页 |
·SOS1基因在转基因植株叶、根中的表达分析 | 第48-49页 |
·小麦中的SOS1同源基因在不同的SOS转化植株中的表达分析 | 第49-50页 |
五 转基因植株后代耐盐性分析结果 | 第50-54页 |
·转基因后代的萌发率分析 | 第50页 |
·转基因后代的生长量分析结果 | 第50-52页 |
·转基因后代的Na~+,K~+含量分析结果 | 第52-53页 |
·转基因后代的MDA分析结果 | 第53页 |
·转基因后代的过氧化氢酶分析结果 | 第53-54页 |
六 转基因后代的田间释放 | 第54-56页 |
第四部分 讨论 | 第56-60页 |
一 小麦基因转方法 | 第56页 |
二 转基因小麦的筛选和检测 | 第56-57页 |
三 SOS信号途径在小麦中的作用 | 第57-58页 |
四 小麦质膜Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第67页 |