缩略词表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第10-17页 |
1. FHL2 的结构、功能与调控 | 第10-13页 |
2. c-Abl酪氨酸激酶的结构与功能 | 第13-15页 |
3. 细胞周期阻滞 | 第15-16页 |
4. 本课题研究的科学问题 | 第16-17页 |
材料和方法 | 第17-27页 |
1. 细胞株、菌株及质粒 | 第17页 |
2. 分子生物学工具酶 | 第17页 |
3. FHL2 全长基因的获得 | 第17页 |
4. 质粒构建 | 第17-21页 |
5. 转染质粒的制备 | 第21页 |
6. 细胞培养、冻存与转染 | 第21-22页 |
7. 谷胱甘肽S转移酶(GST)融合蛋白的制备 | 第22页 |
8. 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)与免疫印迹(Immunoblot,IB) | 第22-24页 |
9. 体外结合实验 | 第24页 |
10. 蛋白质浓度测定 | 第24页 |
11. 体外磷酸酶活性分析 | 第24-25页 |
12. 荧光素酶活性检测 | 第25页 |
13. 细胞同步化实验 | 第25页 |
14. 流式细胞技术检测细胞周期 | 第25页 |
15. 细胞核、细胞质蛋白分离 | 第25-26页 |
16. 细胞中总RNA提取及RT-PCR | 第26页 |
17. 其它 | 第26-27页 |
结果与分析 | 第27-50页 |
1. c-Abl与FHL2 相互作用 | 第27-29页 |
2. c-Abl酸磷化FHL2 | 第29-30页 |
3. FHL2 促进c-Abl稳定性 | 第30-33页 |
·FHL2 促进c-Abl蛋白表达水平 | 第30-31页 |
·FHL2 降低c-Abl蛋白泛素化水平 | 第31-33页 |
4. c-Abl调控FHL2 的转录活性 | 第33-39页 |
·c-Abl促进细胞内FHL2 的稳定性 | 第33页 |
·c-Abl促进FHL2 形成同源二聚体 | 第33-34页 |
·c-Abl促进FHL2 进入细胞核 | 第34-35页 |
·c-Abl调控FHL2 辅助转录活性 | 第35-38页 |
·c-Abl与FHL2 促进Wnt/β-catenin通路活性 | 第38-39页 |
5. c-Abl与FHL2 调控细胞增殖相关因子 | 第39-41页 |
6. c-Abl与FHL2 调控细胞周期G2/M期阻滞 | 第41-50页 |
·c-Abl与FHL2 调控细胞周期G2/M期阻滞 | 第41-45页 |
·c-Abl和FHL2 与Cdc25C相互作用 | 第45-48页 |
·c-Abl和FHL2 调控细胞周期G2/M Checkpoint通路 | 第48-50页 |
讨论 | 第50-55页 |
1. c-Abl酪氨酸激酶与FHL2 之间的相互作用 | 第50页 |
2. c-Abl酪氨酸激酶磷酸化FHL2 并调控FHL2 的转录活性 | 第50-52页 |
3. c-Abl酪氨酸激酶与FHL2 调控细胞周期阻滞 | 第52-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
发表论文 | 第62-73页 |
致谢 | 第73页 |