摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-16页 |
第一章 绪论 | 第16-34页 |
1 植物基因工程 | 第16-25页 |
·植物基因工程研究进展及其应用 | 第16-17页 |
·抗虫基因工程 | 第16页 |
·抗病基因工程 | 第16页 |
·抗除草剂基因工程 | 第16页 |
·品质改良基因工程 | 第16-17页 |
·其他方面 | 第17页 |
·植物抗虫基因工程研究进展 | 第17-21页 |
·Bt 基因及其转 Bt 基因植物的研究 | 第17-19页 |
·蛋白酶抑制剂基因 | 第19页 |
·其他抗虫基因 | 第19-21页 |
·存在的问题 | 第21页 |
·遗传转化方法 | 第21-24页 |
·农杆菌介导的基因转移 | 第22页 |
·外源 DNA 直接导入 | 第22-23页 |
·种质系统的基因转移 | 第23-24页 |
·苎麻功能基因研究进展 | 第24-25页 |
2 苎麻组织培养 | 第25-30页 |
·苎麻组织培养研究进展 | 第25-28页 |
·茎尖培养 | 第26页 |
·(腋芽)快速繁殖 | 第26-27页 |
·子叶、下胚轴、茎段和叶等器官的培养 | 第27页 |
·苎麻体细胞胚胎发生 | 第27页 |
·苎麻原生质体培养 | 第27-28页 |
·苎麻花药培养 | 第28页 |
·苎麻体细胞无性系变异 | 第28页 |
·影响苎麻器官发生和植株再生的因素 | 第28-30页 |
·基因型 | 第28页 |
·外植体 | 第28-29页 |
·培养基 | 第29页 |
·激素 | 第29页 |
·其他因素 | 第29-30页 |
3 苎麻遗传转化研究进展和存在问题 | 第30-32页 |
·遗传转化研究进展 | 第30页 |
·苎麻遗传转化存在的主要问题及解决办法 | 第30-31页 |
·展望 | 第31-32页 |
4 本研究的目的与意义 | 第32-34页 |
第二章 高频再生体系的建立 | 第34-48页 |
1 材料与方法 | 第34-37页 |
·材料与试剂 | 第34页 |
·方法 | 第34-37页 |
·种子表面消毒 | 第34页 |
·外植体的准备 | 第34-35页 |
·培养基配制与培养条件 | 第35页 |
·下胚轴直接再生体系的建立 | 第35-36页 |
·下胚轴愈伤组织诱导不定芽 | 第36页 |
·不同品种子叶和下胚轴诱导不定芽频率的比较 | 第36页 |
·丛生芽的植株再生 | 第36页 |
·不定芽的生根培养和再生苗的驯化 | 第36页 |
·统计分析 | 第36-37页 |
2 结果与分析 | 第37-46页 |
·升汞处理时间的对种子表面消毒效果的影响 | 第37-38页 |
·不同浓度 BA 和 TDZ 组合对下胚轴直接再生体系的影响 | 第38-40页 |
·不同浓度 TDZ 与 IAA 和GA3 和配合使用对诱导不定芽的影响. | 第40-41页 |
·不同品种子叶和下胚轴诱导不定芽频率的比较 | 第41-42页 |
·子叶和下胚轴愈伤组织及不定芽诱导的细胞学观察 | 第42-43页 |
·丛生芽的植株再生 | 第43-44页 |
·不同浓度NAA 对再生苗生根的影响 | 第44-45页 |
·不定芽的生根培养和再生苗的驯化 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
·激素及配比对苎麻下胚轴再生体系建立的影响 | 第46页 |
·高频再生体系的建立 | 第46-48页 |
第三章 农杆菌介导遗传转化条件的优化及双价转基因抗虫麻的获得 | 第48-72页 |
1 材料与方法 | 第48-58页 |
·材料 | 第48-50页 |
·方法 | 第50-58页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第50页 |
·质粒 DNA 转化大肠杆菌 | 第50-51页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第51页 |
·质粒 DNA 转化农杆菌 | 第51页 |
·农杆菌介导外植体转化程序 | 第51-52页 |
·影响转化因素的优化 | 第52页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第52-53页 |
·RT-PCR | 第53-55页 |
·GUS 组织染色 | 第55页 |
·苎麻大量基因组DNA 的提取 | 第55-56页 |
·Southern 杂交 | 第56-57页 |
·统计分析的计算公式 | 第57-58页 |
2 结果与分析 | 第58-69页 |
·不同浓度头孢霉素对下胚轴再生的影响 | 第58页 |
·Kan 使用浓度对下胚轴不定芽再生的影响 | 第58-59页 |
·Kan 使用浓度对再生植株生根的影响 | 第59-60页 |
·预培养时间对转化的影响 | 第60页 |
·侵染时间对转化的影响 | 第60-61页 |
·共培养时间对转化的影响 | 第61-62页 |
·下胚轴转化植株的再生 | 第62-63页 |
·子叶转化植株的再生 | 第63页 |
·再生苗的驯化和移栽 | 第63-64页 |
·农杆菌介导苎麻子叶和下胚轴遗传体系的建立 | 第64页 |
·转化体系有效性的验证 | 第64-65页 |
·转化植株 GUS 染色和分子检测 | 第65-69页 |
3 讨论 | 第69-72页 |
·影响农杆菌转化苎麻转基因的因素 | 第69-71页 |
·苎麻子叶和下胚轴农杆菌介导遗传转化体系的建立 | 第71页 |
·需进一步开展的工作 | 第71-72页 |
第四章 苎麻基因枪转化体系的建立 | 第72-83页 |
1 材料与方法 | 第72-76页 |
·材料和仪器 | 第72页 |
·方法 | 第72-76页 |
·质粒 DNA 的大量提取 | 第72-73页 |
·茎尖培养 | 第73-74页 |
·子叶愈伤组织再生 | 第74页 |
·影响基因枪转化因素 | 第74-75页 |
·基因枪转化 | 第75页 |
·基因枪茎尖转化体系 | 第75页 |
·基因枪愈伤组织转化体系 | 第75-76页 |
·GUS 瞬间表达的检测和转基因植株的PCR 检测 | 第76页 |
2 结果与分析 | 第76-81页 |
·影响苎麻茎尖培养的因素 | 第76-77页 |
·影响苎麻基因枪转化参数的优化 | 第77-79页 |
·基因枪转化苎麻茎尖转基因植株的获得 | 第79-80页 |
·基因枪转化获得抗性愈伤组织 | 第80页 |
·转基因植株分子鉴定 | 第80-81页 |
·GUS 染色 | 第81页 |
3 讨论 | 第81-83页 |
第五章 花粉侵入法获得双价转基因抗虫麻 | 第83-98页 |
1 材料与方法 | 第83-87页 |
·材料 | 第83-84页 |
·方法 | 第84-87页 |
·农杆菌的培养 | 第84页 |
·转化受体材料的准备 | 第84页 |
·转化影响因素优化 | 第84页 |
·花粉侵入法转化 | 第84-85页 |
·田间管理和转化种子的收获和贮存 | 第85页 |
·转化后代植株的筛选 | 第85页 |
·GUS 组织染色和分子检测 | 第85-86页 |
·荧光定量PCR 技术检测外源基因的表达 | 第86-87页 |
2 结果与分析 | 第87-95页 |
·卡纳霉素致死浓度的确定和 T1 代抗性种子的筛选 | 第87页 |
·不同浓度silwet-77 对转化频率的影响 | 第87-89页 |
·不同侵染方式和处理对转化效果的影响 | 第89-91页 |
·GUS 染色和分子检测 | 第91-92页 |
·荧光定量 PCR 技术检测外源基因的表达 | 第92-95页 |
3 讨论 | 第95-98页 |
·影响花序浸泡法转基因的重要因素 | 第95页 |
·提高转化效果的措施 | 第95-96页 |
·需进一步开展的工作 | 第96页 |
·农杆菌介导花粉侵入法的特点及应用前景 | 第96-98页 |
第六章 结论 | 第98-101页 |
1 主要研究结果 | 第98页 |
2 三种遗传转化方法的优缺点比较 | 第98-99页 |
3 主要创新点 | 第99页 |
4 今后研究的方向和目标 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
作者简历 | 第112-113页 |