摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
前言 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-27页 |
1 水稻纹枯病 | 第12-13页 |
·水稻纹枯病症状 | 第12-13页 |
2 水稻纹枯病菌及其遗传分化 | 第13-15页 |
·水稻纹枯病菌的形态特点 | 第14-15页 |
·水稻纹枯病菌的遗传分化 | 第15页 |
3 水稻纹枯病抗性研究 | 第15-17页 |
4 抑制差减杂交(SUPPRESSION SUBTRACTIVE HYBRIDIZATION,SSH) | 第17-21页 |
·抑制差减杂交基本原理 | 第17-19页 |
·抑制差减杂交技术在植物抗病相关基因分离中的应用 | 第19-21页 |
参考文献 | 第21-27页 |
实验部分 | 第27页 |
第一章 浙江省水稻纹枯病菌的遗传分化与致病力研究 | 第27-39页 |
1 材料与方法 | 第28-30页 |
·实验材料 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-30页 |
2 结果与分析 | 第30-36页 |
·水稻纹枯病菌菌丝融合群鉴定结果 | 第30-32页 |
·水稻纹枯病菌致病力鉴定结果 | 第32-33页 |
·水稻纹枯病菌的ITS序列分析 | 第33-36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-39页 |
第二章 水稻T-DNA突变体材料纹枯病抗性资源的筛选 | 第39-47页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
·供试材料 | 第40页 |
·供试菌株 | 第40页 |
·接种时间和方法 | 第40-41页 |
·病情调查 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-44页 |
·2006年初筛鉴定结果 | 第42页 |
·2007年复筛鉴定结果 | 第42-43页 |
·温室终筛鉴定结果 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-47页 |
第三章 抑制差减杂交分离水稻纹枯病抗性相关基因 | 第47-59页 |
1 材料与方法 | 第48-49页 |
·实验材料 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-49页 |
2 实验结果 | 第49-54页 |
·突变体的T-DNA插入位点 | 第49页 |
·RNA纯度 | 第49-50页 |
·同源序列比对结果 | 第50-54页 |
·同源基因功能分析 | 第54页 |
·同源基因的GO分类结果 | 第54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
附录 | 第59-83页 |
附录1:各培养基配方 | 第59页 |
1.PDA | 第59页 |
2.LB | 第59页 |
3.水琼脂 | 第59页 |
附录2:各缓冲液配方 | 第59-60页 |
1.TBE电泳缓冲液5× | 第59页 |
2.TE缓冲液 | 第59-60页 |
附录3:CTAB/NACL法提取真菌基因组DNA | 第60页 |
附录4:CTAB法提取植物基因组DNA | 第60-61页 |
1.实验步骤 | 第60-61页 |
2.所需溶液配方 | 第61页 |
附录5:TRIZOL提取植物组织RNA | 第61页 |
附录6:抑制差减杂交 | 第61-66页 |
1.cDNA第一链合成 | 第61-62页 |
2.cDNA第二链合成 | 第62页 |
3.Rsa Ⅰ酶切 | 第62-63页 |
4.接头连接 | 第63-64页 |
5.第一次差减杂交 | 第64页 |
6.第二次差减杂交 | 第64-65页 |
7.PCR扩增 | 第65-66页 |
8.PCR反应液与pGEM T-easy Vector连接 | 第66页 |
9.感受态细胞的转化 | 第66页 |
附录7:大肠杆菌DH5A感受态细胞的制备 | 第66-67页 |
附录8:碱法提取质粒 | 第67-68页 |
1.碱法提取质粒步骤 | 第67-68页 |
2.碱法提取质粒所需溶液的配制 | 第68页 |
附录9:部分实验电泳图 | 第68-69页 |
附录10:TAIL PCR所用引物表和扩增程序表 | 第69-70页 |
附录11:差减杂交同源基因功能表 | 第70-75页 |
附录12:差减杂交cDNA序列匹配基因功能的GO分类表 | 第75-83页 |
攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |