中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-12页 |
1 绪论 | 第12-30页 |
·引言 | 第12页 |
·机械应力对植物生长发育的影响 | 第12-15页 |
·外环境应力对植物生长发育的影响 | 第13-14页 |
·内环境机械应力对植物发育的影响 | 第14-15页 |
·力信号的转导机制 | 第15-20页 |
·植物力信号转导假想模型Ⅰ:机械敏感性离子通道的作用 | 第15-16页 |
·植物力信号转导假想模型Ⅱ:细胞壁-细胞骨架连续体的作用 | 第16-20页 |
·细胞骨架的观察方法 | 第20-21页 |
·植物机械应激响应研究的实验方法学进展 | 第21-25页 |
·施加于植物器官或组织的力学刺激及响应的研究 | 第21-23页 |
·施加于细胞及亚细胞水平的应力刺激及响应研究 | 第23-25页 |
·课题的提出及研究意义 | 第25-26页 |
·课题的研究内容和技术路线 | 第26-30页 |
·课题的研究内容 | 第26-28页 |
·技术路线 | 第28-30页 |
2 转基因拟南芥悬浮细胞系的建立、优化及应激响应能力检测 | 第30-44页 |
·引言 | 第30-31页 |
·材料与方法 | 第31-34页 |
·材料来源 | 第31页 |
·愈伤组织的诱导 | 第31页 |
·悬浮细胞培养系的建立和优化 | 第31-32页 |
·细胞鲜重的测定方法[130] | 第32页 |
·细胞形态的检测 | 第32页 |
·悬浮细胞活力的测定 | 第32-33页 |
·细胞骨架的观察 | 第33页 |
·悬浮细胞对外源性机械应力响应能力检测 | 第33页 |
·悬浮细胞对高渗的应激响应能力检测 | 第33-34页 |
·悬浮细胞的冷耐受实验 | 第34页 |
·统计分析 | 第34页 |
·实验结果 | 第34-39页 |
·愈伤组织的诱导 | 第34-36页 |
·悬浮细胞培养体系的建立 | 第36页 |
·悬浮细胞培养体系的优化 | 第36-38页 |
·转基因悬浮细胞内细胞骨架清晰可见 | 第38页 |
·悬浮细胞对环境刺激的应激响应能力 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
·结论 | 第42-44页 |
3 拟南芥悬浮细胞中细胞壁-细胞骨架的联系研究 | 第44-58页 |
·引言 | 第44-45页 |
·材料与方法 | 第45-46页 |
·选择性酶解细胞壁 | 第45页 |
·细胞形态的检测 | 第45页 |
·悬浮细胞的包埋 | 第45页 |
·细胞质壁分离率的测定 | 第45页 |
·细胞骨架的CD,Oryzalin 处理 | 第45-46页 |
·RGD 肽处理 | 第46页 |
·共聚焦显微镜实时观察选择性酶解细胞壁对细胞骨架的影响 | 第46页 |
·统计分析 | 第46页 |
·实验结果 | 第46-52页 |
·选择性酶解细胞壁对细胞形态和质壁分离率的影响 | 第46-48页 |
·CD 或oryzalin 处理对细胞质壁分离率的影响 | 第48页 |
·选择性酶解细胞壁对细胞骨架的影响 | 第48-51页 |
·RGD 肽预处理对悬浮细胞质壁分离率的影响 | 第51页 |
·RGD 肽预处理对细胞骨架的影响 | 第51页 |
·RGD 肽预处理后选择性酶解细胞壁对微丝骨架的干扰 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
·结论 | 第55-58页 |
4 膨压响应中,拟南芥悬浮细胞微丝、微管骨架的动态 | 第58-76页 |
·引言 | 第58-59页 |
·材料与方法 | 第59-61页 |
·质壁分离法测细胞渗透压 | 第59页 |
·改变细胞膨压方法的建立 | 第59页 |
·药理学方法处理细胞骨架 | 第59页 |
·悬浮细胞的包埋 | 第59-60页 |
·膨压动态改变状态下细胞骨架动态的实时观察 | 第60页 |
·细胞骨架荧光强度的测量及变化分析 | 第60页 |
·细胞的长短轴测量、沿短轴和长轴方向排列的微管数量比的统计 | 第60-61页 |
·不同形态悬浮细胞的壁表面应力初步建模分析 | 第61页 |
·统计分析 | 第61页 |
·实验结果 | 第61-71页 |
·动态膨压状态下,微管骨架的实时动态 | 第61-63页 |
·膨压波动时的微管骨架荧光强度变化趋势 | 第63页 |
·动态膨压状态下,微丝骨架的实时动态 | 第63-65页 |
·膨压波动时的微丝骨架荧光强度变化趋势 | 第65页 |
·CD 处理对膨压波动时微管骨架的排布动态及荧光强度的影响 | 第65-69页 |
·Oryzalin 处理对膨压波动时微丝骨架的排布动态及荧光强度的影响 | 第69-70页 |
·微管的排布与细胞形态的相关性 | 第70页 |
·细胞形态与细胞壁应力的分布模式 | 第70-71页 |
·讨论 | 第71-75页 |
·结论 | 第75-76页 |
5 钙阻断对膨压响应中拟南芥悬浮细胞微丝、微管骨架动态的影响 | 第76-102页 |
·引言 | 第76页 |
·材料与方法 | 第76-78页 |
·药物处理阻断钙离子通道 | 第76-77页 |
·药理学方法处理细胞骨架 | 第77页 |
·细胞的包埋固定 | 第77页 |
·质壁分离率的测定 | 第77页 |
·膨压动态改变状态下细胞骨架动态的实时观察 | 第77-78页 |
·细胞骨架荧光强度的测量及变化分析 | 第78页 |
·统计分析 | 第78页 |
·实验结果 | 第78-95页 |
·氯化镧和钌红对细胞质壁分离率的影响 | 第78页 |
·Phalloidin、Taxol 预处理影响细胞的质壁分离率 | 第78-79页 |
·氯化镧、钌红和Phalloidin 处理对细胞微丝骨架的荧光强度的影响 | 第79-81页 |
·氯化镧、钌红和Taxol 处理对细胞微管骨架荧光强度的影响 | 第81页 |
·氯化镧处理对微丝、微管骨架的排布动态和相对荧光强度的影响 | 第81-86页 |
·钌红处理影响微丝、微管骨架的排布动态和相对荧光强度的变化 | 第86-91页 |
·Phalloidin 处理对微丝骨架的排布动态和相对荧光强度的影响 | 第91页 |
·Taxol 处理对微管骨架的排布动态和相对荧光强度的影响 | 第91-95页 |
·讨论 | 第95-100页 |
·结论 | 第100-102页 |
6 共聚焦显微镜下可控机械力加载方法的探索 | 第102-112页 |
·引言 | 第102-103页 |
·材料与方法 | 第103-104页 |
·原子力显微镜和共聚焦显微镜联机观察微管骨架动态 | 第103页 |
·共聚焦显微镜下压应力加载及细胞骨架动态观察 | 第103-104页 |
·药理学方法处理细胞骨架 | 第104页 |
·IPP 软件分析骨架动态 | 第104页 |
·实验结果 | 第104-110页 |
·原子力显微镜探针加载下的微管骨架排布 | 第104-106页 |
·动态加压下细胞骨架的表现 | 第106页 |
·Oryzalin 解聚微管影响微丝骨架对压应力的响应 | 第106-110页 |
·讨论 | 第110-111页 |
·结论 | 第111-112页 |
7 结论与后续工作建议 | 第112-114页 |
·本文主要结论 | 第112-113页 |
·后续工作建议 | 第113-114页 |
致谢 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-130页 |
附录 | 第130页 |