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两种鳃金龟围食膜及其结构蛋白的分离鉴定

中文摘要第1-10页
Abstract第10-13页
1 前言第13-28页
   ·昆虫中肠防御体系-围食膜第13-20页
     ·围食膜的结构组成第13-17页
     ·围食膜的功能第17-19页
     ·围食膜的形成及机理第19-20页
   ·生物防治促进因子第20-25页
     ·病毒增效蛋白第20-23页
     ·荧光增白剂第23-24页
     ·几丁质酶及几丁质合成抑制剂对围食膜的作用第24-25页
     ·外源凝集素对围食膜的作用第25页
   ·cDNA 文库—研究新基因的有效工具第25-26页
   ·研究的目的及意义第26-28页
2 材料与方法第28-53页
   ·材料与试剂第28-33页
     ·供试昆虫第28页
     ·供试昆虫病原微生物第28页
     ·供试菌株及试剂盒第28页
     ·供试抗体第28-29页
     ·常用培养基第29页
     ·常用试剂及溶液第29-32页
     ·常用蛋白与DNA Marker第32页
     ·常用仪器设备第32-33页
   ·方法步骤第33-53页
     ·围食膜的形态观察第33页
     ·围食膜组分含量测定第33-37页
     ·华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库的构建第37-43页
     ·围食膜蛋白的筛选第43-45页
     ·围食膜蛋白基因的原核表达及特性鉴定第45-49页
     ·丝氨酸蛋白酶的原核表达第49-51页
     ·增效蛋白对PM 的作用第51-52页
     ·荧光增白剂FB28对PM的作用与影响第52页
     ·低温对鳃金龟围食膜的影响第52-53页
3 结果与分析第53-123页
   ·鳃金龟围食膜结构与组成第53-57页
     ·PM 的生理位置第53页
     ·PM 的结构组成第53-57页
   ·华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库的构建第57-60页
     ·总RNA 的提取第57-58页
     ·cDNA 第一链、第二链的合成第58页
     ·cDNA 分级分离及定量第58-59页
     ·文库的容量及重组率第59页
     ·PCR 鉴定文库插入片段大小第59-60页
   ·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白的筛选第60-96页
     ·利用棉铃虫围食膜蛋白多克隆抗体筛选华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库第60-65页
     ·利用粉纹夜蛾围食膜蛋白多克隆抗体筛选华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库第65-68页
     ·华北大黑鳃金龟PM 蛋白基因序列分析第68-96页
   ·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白基因的原核表达及特性鉴定第96-103页
     ·重组表达质粒 PET-21b-Ho-Peritrophin 的构建第96-98页
     ·重组子的鉴定第98-99页
     ·围食膜蛋白在原核系统的表达第99-102页
     ·重组围食膜蛋白的几丁质结合活性第102-103页
   ·丝氨酸蛋白酶与羧酸酯酶的筛选与鉴定第103-118页
     ·丝氨酸蛋白酶的筛选与鉴定第103-113页
     ·羧酸酯酶的筛选与序列分析第113-118页
   ·生物防治促进因子对鳃金龟围食膜的影响第118-122页
     ·增效蛋白对PM 的影响第118-120页
     ·荧光增白剂 FB28 对 PM 的作用与影响第120-122页
   ·低温对PM 的影响第122-123页
4 讨论第123-135页
   ·鳃金龟围食膜结构与组成第123-124页
     ·PM 的形态与结构分析第123页
     ·PM 蛋白及糖含量分析第123-124页
   ·cDNA 文库的构建第124-126页
     ·高质量的RNA 和载体第124页
     ·cDNA 文库质量第124-126页
   ·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白的分离及鉴定第126-129页
     ·华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库的筛选第126页
     ·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白基因克隆及鉴定第126-129页
   ·丝氨酸蛋白酶与羧酸酯酶第129-132页
     ·丝氨酸蛋白酶第129-131页
     ·羧酸酯酶第131-132页
   ·增效蛋白及荧光增白剂对PM 的作用第132-133页
     ·增效蛋白对PM 的作用第132页
     ·荧光增白剂对PM 的作用与影响第132-133页
   ·问题与展望第133-135页
5 结论第135-137页
6 参考文献第137-151页
7 附录第151-153页
8 致谢第153-154页
9 攻读学位期间发表论文情况第154页

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