中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
1 前言 | 第13-28页 |
·昆虫中肠防御体系-围食膜 | 第13-20页 |
·围食膜的结构组成 | 第13-17页 |
·围食膜的功能 | 第17-19页 |
·围食膜的形成及机理 | 第19-20页 |
·生物防治促进因子 | 第20-25页 |
·病毒增效蛋白 | 第20-23页 |
·荧光增白剂 | 第23-24页 |
·几丁质酶及几丁质合成抑制剂对围食膜的作用 | 第24-25页 |
·外源凝集素对围食膜的作用 | 第25页 |
·cDNA 文库—研究新基因的有效工具 | 第25-26页 |
·研究的目的及意义 | 第26-28页 |
2 材料与方法 | 第28-53页 |
·材料与试剂 | 第28-33页 |
·供试昆虫 | 第28页 |
·供试昆虫病原微生物 | 第28页 |
·供试菌株及试剂盒 | 第28页 |
·供试抗体 | 第28-29页 |
·常用培养基 | 第29页 |
·常用试剂及溶液 | 第29-32页 |
·常用蛋白与DNA Marker | 第32页 |
·常用仪器设备 | 第32-33页 |
·方法步骤 | 第33-53页 |
·围食膜的形态观察 | 第33页 |
·围食膜组分含量测定 | 第33-37页 |
·华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库的构建 | 第37-43页 |
·围食膜蛋白的筛选 | 第43-45页 |
·围食膜蛋白基因的原核表达及特性鉴定 | 第45-49页 |
·丝氨酸蛋白酶的原核表达 | 第49-51页 |
·增效蛋白对PM 的作用 | 第51-52页 |
·荧光增白剂FB28对PM的作用与影响 | 第52页 |
·低温对鳃金龟围食膜的影响 | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-123页 |
·鳃金龟围食膜结构与组成 | 第53-57页 |
·PM 的生理位置 | 第53页 |
·PM 的结构组成 | 第53-57页 |
·华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库的构建 | 第57-60页 |
·总RNA 的提取 | 第57-58页 |
·cDNA 第一链、第二链的合成 | 第58页 |
·cDNA 分级分离及定量 | 第58-59页 |
·文库的容量及重组率 | 第59页 |
·PCR 鉴定文库插入片段大小 | 第59-60页 |
·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白的筛选 | 第60-96页 |
·利用棉铃虫围食膜蛋白多克隆抗体筛选华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库 | 第60-65页 |
·利用粉纹夜蛾围食膜蛋白多克隆抗体筛选华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库 | 第65-68页 |
·华北大黑鳃金龟PM 蛋白基因序列分析 | 第68-96页 |
·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白基因的原核表达及特性鉴定 | 第96-103页 |
·重组表达质粒 PET-21b-Ho-Peritrophin 的构建 | 第96-98页 |
·重组子的鉴定 | 第98-99页 |
·围食膜蛋白在原核系统的表达 | 第99-102页 |
·重组围食膜蛋白的几丁质结合活性 | 第102-103页 |
·丝氨酸蛋白酶与羧酸酯酶的筛选与鉴定 | 第103-118页 |
·丝氨酸蛋白酶的筛选与鉴定 | 第103-113页 |
·羧酸酯酶的筛选与序列分析 | 第113-118页 |
·生物防治促进因子对鳃金龟围食膜的影响 | 第118-122页 |
·增效蛋白对PM 的影响 | 第118-120页 |
·荧光增白剂 FB28 对 PM 的作用与影响 | 第120-122页 |
·低温对PM 的影响 | 第122-123页 |
4 讨论 | 第123-135页 |
·鳃金龟围食膜结构与组成 | 第123-124页 |
·PM 的形态与结构分析 | 第123页 |
·PM 蛋白及糖含量分析 | 第123-124页 |
·cDNA 文库的构建 | 第124-126页 |
·高质量的RNA 和载体 | 第124页 |
·cDNA 文库质量 | 第124-126页 |
·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白的分离及鉴定 | 第126-129页 |
·华北大黑鳃金龟中肠cDNA 文库的筛选 | 第126页 |
·华北大黑鳃金龟围食膜蛋白基因克隆及鉴定 | 第126-129页 |
·丝氨酸蛋白酶与羧酸酯酶 | 第129-132页 |
·丝氨酸蛋白酶 | 第129-131页 |
·羧酸酯酶 | 第131-132页 |
·增效蛋白及荧光增白剂对PM 的作用 | 第132-133页 |
·增效蛋白对PM 的作用 | 第132页 |
·荧光增白剂对PM 的作用与影响 | 第132-133页 |
·问题与展望 | 第133-135页 |
5 结论 | 第135-137页 |
6 参考文献 | 第137-151页 |
7 附录 | 第151-153页 |
8 致谢 | 第153-154页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第154页 |