| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 1 材料与方法 | 第13-22页 |
| ·材料 | 第13-16页 |
| ·实验材料来源与细胞株 | 第13页 |
| ·手术器材 | 第13页 |
| ·主要实验仪器 | 第13-14页 |
| ·实验耗材 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-16页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞、HTK与人胎儿角膜基质细胞培养液 | 第14页 |
| ·小鼠3T3成纤维细胞培养液 | 第14-15页 |
| ·消化酶类 | 第15页 |
| ·BCA蛋白定量实验试剂 | 第15页 |
| ·MTT实验试剂 | 第15页 |
| ·细胞免疫荧光技术试剂 | 第15页 |
| ·逆转录多聚酶链反应实验试剂 | 第15-16页 |
| ·试剂配置 | 第16-17页 |
| ·高糖型DMEM、DMEM/F12的配制 | 第16页 |
| ·胰蛋白酶/EDTA | 第16页 |
| ·5mg/ml DispaseⅡ的配制 | 第16页 |
| ·0.02M PBS配方 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-22页 |
| ·细胞培养方法 | 第17-18页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞的原代培养 | 第17页 |
| ·人胎儿角膜基质细胞组织块贴壁法培养 | 第17-18页 |
| ·牛角膜上皮、基质细胞的培养 | 第18页 |
| ·小鼠3T3成纤维细胞、HTK、人胎儿角膜基质细胞的培养 | 第18页 |
| ·小鼠3T3成纤维细胞、HTK、人胎儿角膜基质细胞条件培养液的制备 | 第18页 |
| ·小鼠3T3成纤维细胞、HTK、人胎儿角膜基质细胞饲养层的制备 | 第18-19页 |
| ·牛角膜上皮、基质、内皮细胞破碎液的制备 | 第19页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞的传代方法 | 第19页 |
| ·细胞相关检测 | 第19-22页 |
| ·CBA法测定不同条件培养液蛋白含量 | 第19-20页 |
| ·四甲基偶氮比色(MTT)检测法 | 第20页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR方法检测K12、K15、Pax6、P75和ABCG2的表达 | 第21-22页 |
| ·统计学分析 | 第22页 |
| 2 结果 | 第22-25页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞的生长情况观察 | 第22-24页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞原代培养 | 第22-23页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞传代培养 | 第23-24页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞培养体系的优化 | 第24页 |
| ·三种条件培养液对人角膜上皮细胞增殖的影响 | 第24页 |
| ·三种牛角膜细胞破碎液对人角膜上皮细胞增殖的影响 | 第24页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞的性质鉴定 | 第24-25页 |
| ·免疫荧光染色结果 | 第24-25页 |
| ·角蛋白K12、CK15、Pax6、P75和ABCG2mRNA水平的表达情况 | 第25页 |
| 3 讨论 | 第25-29页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞的原代和传代培养方法的建立及其优化 | 第25-28页 |
| ·原代培养 | 第25-26页 |
| ·传代培养 | 第26-28页 |
| ·人胎儿角膜上皮细胞的性质鉴定 | 第28-29页 |
| 结论 | 第29页 |
| 参考文献 | 第29-33页 |
| 论文相关照片 | 第33-41页 |
| 综述 | 第41-46页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第46-47页 |
| 附录 缩略词表 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-50页 |
