提要 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
前言 | 第16-17页 |
第一章 文献回顾 | 第17-27页 |
·HMG 家族 | 第17页 |
·HMGA1 的分类及结构特点 | 第17-18页 |
·HMGA1 作用机制 | 第18页 |
·HMGA1 的生物学功能 | 第18-20页 |
·HMGA1 在体内调节基因转录 | 第18页 |
·HMGA1 调节正常细胞的生长和分化 | 第18-19页 |
·HMGA1 参与炎症的调节 | 第19页 |
·HMGA1 参与病毒整合 | 第19-20页 |
·HMGA1 与肿瘤的关系 | 第20页 |
·HMGA1 在肿瘤中的异常表达及作用机制 | 第20页 |
·HMGA1 在肿瘤中的可能的作用机制 | 第20-22页 |
·HMGA1 破坏 DNA 损伤修复能力 | 第20-21页 |
·HMGA1 调节 BRCA1 的表达 | 第21页 |
·HMGA1 调节 COX-2 的表达 | 第21页 |
·HMGA1 上调 STA3 的表达 | 第21-22页 |
·HMGA1 与 P53 相互作用 | 第22页 |
·HMGA1 在肿瘤迁移中的作用 | 第22-23页 |
·HMGA1 与肿瘤化疗 | 第23页 |
·HMGA1 与其他疾病 | 第23页 |
·RNAi 技术的研究进展 | 第23-27页 |
·siRNA 的设计原则 | 第24页 |
·核酸的化学修饰 | 第24-25页 |
·siRNA 的导入及在人体启动 RNAi 的基本机制 | 第25页 |
·RNAi 的应用 | 第25-26页 |
·RNAi 的治疗前景 | 第26-27页 |
第二章 实验研究 | 第27-49页 |
·实验材料 | 第27-30页 |
·细胞株、菌株及质粒 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要仪器设备 | 第28页 |
·主要试剂的配制 | 第28-30页 |
·实验方法 | 第30-38页 |
·人前列腺癌细胞 PC-3M 的复苏与传代培养 | 第30页 |
·检测 PC-3M 细胞中 HMGA1 的表达 | 第30-33页 |
·JM109 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
·pU6mRFP 和 pU6mRFPsiRNA-HMGA1 重组质粒的扩增与鉴定 | 第33-34页 |
·pU6mRFPsiRNA-HMGA1 重组质粒瞬时转染 PC-3M 细胞 | 第34-35页 |
·检测瞬时转染后 HMGA1 的表达 | 第35-36页 |
·MTT 法检测基因转染后 PC-3M 细胞的增殖活性 | 第36-37页 |
·平板克隆实验检测转染后 PC-3M 的克隆增殖能力 | 第37页 |
·流式细胞仪检测细胞周期与凋亡 | 第37页 |
·RT-PCR 法检测 PC-3M 细胞中相关免疫抑制因子和凋亡基因表达 | 第37-38页 |
·实验结果 | 第38-49页 |
·HMGA1 在 PC-3M 细胞中的表达 | 第38-39页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第39-40页 |
·质粒的转染效率的观察 | 第40-41页 |
·基因沉默 HMGA1 后 PC-3M 细胞中 HMGA1 表达变化 | 第41-42页 |
·基因沉默 HMGA1 对 PC-3M 细胞增殖活性的影响 | 第42-43页 |
·基因沉默 HMGA1 对 PC-3M 细胞克隆形成能力的影响 | 第43-44页 |
·基因沉默 HMGA1 对 PC-3M 细胞的凋亡的影响 | 第44-46页 |
·基因沉默 HMGA1 对 PC-3M 细胞免疫抑制相关因子表达的影响 | 第46-49页 |
第三章 讨论 | 第49-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
作者简介 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |