蝙蝠BOULE基因新型异构体的克隆和鉴定
| 论文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 一、BOULE基因概述 | 第10-15页 |
| (一)、BOULE的发现 | 第10-11页 |
| (二)、BOULE基因的结构 | 第11-12页 |
| (三)、BOULE的染色体、组织和细胞定位 | 第12-13页 |
| 1、染色体定位 | 第12页 |
| 2、组织定位 | 第12页 |
| 3、细胞和亚细胞定位 | 第12-13页 |
| (四)、BOULE的生物学功能与作用机制 | 第13-15页 |
| 1、生物学功能 | 第13-14页 |
| 2、作用机制 | 第14-15页 |
| 二、蝙蝠分类和进化 | 第15-18页 |
| 三、蝙蝠生殖生物学 | 第18-22页 |
| (一)、蝙蝠的特殊生殖现象 | 第18-19页 |
| (二)、蝙蝠特殊生殖现象的国际、国内研究背景 | 第19-20页 |
| (三)、研究蝙蝠精子储存的意义 | 第20页 |
| (四)、研究方法和预期结果 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-41页 |
| 一、实验材料 | 第22页 |
| 二、仪器和试剂 | 第22-27页 |
| (一)、主要仪器 | 第22-24页 |
| (二)、主要耗材 | 第24页 |
| (三)、主要试剂 | 第24-25页 |
| (四)、注意事项 | 第25-27页 |
| 三、实验方法 | 第27-38页 |
| (一)、引物设计 | 第27页 |
| (二)、总RNA提取 | 第27-29页 |
| 1、实验样品的研磨和匀浆 | 第28页 |
| 2、总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 3、RNA沉淀的清洗 | 第29页 |
| 4、RNA的溶解 | 第29页 |
| (三)、RNA质量和浓度检测 | 第29-32页 |
| 1、琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量 | 第29-31页 |
| 2、分光光度法检测RNA浓度 | 第31-32页 |
| (四)、一链cDNA的合成(RT-PCR) | 第32页 |
| (五)、进行PCR反应 | 第32-33页 |
| (六)、PCR产物的回收 | 第33-34页 |
| (七)、胶回收产物的连接及转化 | 第34-35页 |
| 1、胶回收产物的连接 | 第34-35页 |
| 2、连接产物的转化 | 第35页 |
| (八)、阳性克隆的鉴定及测序 | 第35-38页 |
| 1、白斑的挑取及培养 | 第35-36页 |
| 2、阳性克隆的鉴定 | 第36-38页 |
| 3、阳性克隆的测序 | 第38页 |
| 四、分析方法 | 第38-41页 |
| 第三章 研究结果 | 第41-51页 |
| 一、蝙蝠BOULE基因的克隆和结构分析 | 第41-46页 |
| 二、系统发生树重建结果 | 第46-48页 |
| 三、BOULE基因功能区进化分析 | 第48-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-55页 |
| 第五章 结论 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-65页 |
| 附录1:硕士期间参加的课题 | 第56-57页 |
| 附录2:硕士期间发表文章 | 第57-58页 |
| 附录3:实验蝙蝠物种 | 第58-60页 |
| 附录4:分子克隆中常用缓冲液和试剂的配置 | 第60-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
