| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-20页 |
| 前言 | 第20-31页 |
| 第一章 Tiam1基因/蛋白在人正常肝细胞和肝癌细胞中的表达 | 第31-47页 |
| 一、材料与方法 | 第32-39页 |
| (一) 材料 | 第32页 |
| (二) 方法 | 第32-39页 |
| 二、结果 | 第39-44页 |
| (一) 荧光定量PCR检测Tiam1基因在3种细胞株中的表达情况 | 第39-42页 |
| (二) Western blot方法鉴定Tiam1蛋白在3种细胞株中的表达情况 | 第42页 |
| (三) 免疫细胞化学检测Tiam1蛋白在3种细胞株中的表达情况 | 第42-43页 |
| (四) 免疫细胞荧光法检测Tiam1蛋白在3种细胞株中的表达情况 | 第43页 |
| (五) 免疫细胞荧光共聚焦检测Tiam1蛋白在3种细胞株中的表达情况 | 第43-44页 |
| 三、讨论 | 第44-47页 |
| 第二章 Tiam1过表达对低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97L生物学特性的影响 | 第47-80页 |
| 一、材料与方法 | 第47-56页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-56页 |
| 二、结果 | 第56-77页 |
| 1 质粒鉴定 | 第56页 |
| 2 pCDF1-Tiam1~+-copGFP慢病毒载体构建 | 第56-59页 |
| 3 慢病毒包装生产 | 第59页 |
| 4 建立表达Tiam1基因肝癌细胞株,应用流式细胞仪分选带绿色荧光蛋白肝癌细胞 | 第59-62页 |
| 5 稳定表达Tiam1基因肝癌细胞株的建立 | 第62-66页 |
| 6 Tiam1基因表达对肝癌细胞体外增殖的影响 | 第66-68页 |
| 7 Tiam1基因表达对肝癌细胞周期的影响 | 第68-69页 |
| 8 Tiam1基因表达对肝癌细胞体外运动迁移能力的影响 | 第69-72页 |
| 9 Tiam1基因表达对肝癌细胞体外侵袭能力的影响 | 第72-73页 |
| 10 Tiam1基因表达对肝癌细胞体内成瘤的影响 | 第73-75页 |
| 11 Tiam1基因表达对肝癌细胞体内转移能力的影响 | 第75-77页 |
| 三、讨论 | 第77-80页 |
| 第三章 Tiam1沉默对高转移潜能人肝癌细胞株HCCL-M6生物学特性的影响 | 第80-115页 |
| 一、材料与方法 | 第80-87页 |
| 1 材料 | 第80-81页 |
| 2 方法 | 第81-87页 |
| 1 重组慢病毒质粒载体的制备及鉴定 | 第81-84页 |
| 2 RNAi慢病毒包装及滴度测定 | 第84-86页 |
| 3 细胞感染及鉴定 | 第86页 |
| 4 Tiam1基因稳定表达沉默细胞株的建立及鉴定 | 第86-87页 |
| 5 体外实验观察Tiam1基因表达沉默后对肝癌细胞生物学特性的影响 | 第87页 |
| 6 体内实验观察Tiam1基因表达沉默后对肝癌细胞生物学特性的影响 | 第87页 |
| 7 统计学处理 | 第87页 |
| 二、结果 | 第87-110页 |
| 1 重组慢病毒载体的构建及鉴定 | 第87-90页 |
| 2 RNAi慢病毒包装 | 第90页 |
| 3 RNAi慢病毒滴度测定 | 第90-92页 |
| 4 Tiam1有效干扰靶点的筛选 | 第92-93页 |
| 5 Tiam1基因表达沉默肝癌细胞株的建立 | 第93-94页 |
| 6 稳定Tiam1基因表达沉默肝癌细胞株的建立 | 第94-98页 |
| 7 Tiam1基因表达沉默对肝癌细胞体外增殖的影响 | 第98-100页 |
| 8 Tiam1基因表达沉默对肝癌细胞周期的影响 | 第100-102页 |
| 9 Tiam1基因表达沉默对肝癌细胞体外运动迁移能力的影响 | 第102-103页 |
| 10 Tiam1基因表达沉默对肝癌细胞体外侵袭能力的影响 | 第103-105页 |
| 11 Tiam1基因表达沉默对肝癌细胞体内成瘤的影响 | 第105-107页 |
| 12 Tiam1基因表达沉默对肝癌细胞体内转移能力的影响 | 第107-110页 |
| 三、讨论 | 第110-115页 |
| 1 Tiam1基因对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第110-112页 |
| 2 Tiam1基因对肝癌细胞迁移、侵袭、转移能力的影响 | 第112-115页 |
| 参考文献 | 第115-125页 |
| 全文小结 | 第125-127页 |
| 攻读博士学位期间研究成果 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129-132页 |
| 统计学证明 | 第132页 |
