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“睡美人”转座子介导外源基因在鸡输卵管和睾丸整合表达特性研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一篇 文献综述第10-28页
 第一章 “睡美人”(Sleeping Beauty ,SB)转座子研究现状第10-15页
  一、SB 转座系统的结构第10-12页
  二、SB 转座的机制第12-13页
  三、SB 作为基因转移载体的应用第13-15页
 第二章 转基因鸡研究进展第15-20页
  一、转基因鸡的研制方法第15-17页
  二、鸡输卵管生物反应器研究进展第17-20页
 第三章 人乳铁蛋白的研究现状第20-22页
 参考文献第22-28页
第二篇 试验研究第28-68页
 前言第28-30页
 第四章 SB 整合型鸡输卵管特异表达载体的构建第30-42页
  摘要第30页
  前言第30-31页
  1 材料和方法第31-37页
   ·菌株及试剂第31页
   ·试验鸡第31页
   ·鸡基因组DNA 的制备第31页
   ·PCR 扩增第31-32页
   ·PCR 产物的克隆及序列分析第32-33页
   ·pcDNA3.0 的改造第33页
   ·输卵管特异表达载体的构建第33-34页
   ·pOV-EGFP 的构建第34-35页
   ·pOV-LF 的构建第35页
   ·SB 整合型表达载体的构建第35-37页
  2 结果第37-41页
   ·鸡输卵管特异表达载体的构建与鉴定第37页
   ·表达EGFP 基因重组载体的构建与鉴定第37-38页
   ·表达LF 基因重组载体的构建与鉴定第38-39页
   ·表达EGFP 基因的SB 整合型载体的构建与鉴定第39-40页
   ·表达LF 基因的SB 整合型载体的构建与鉴定第40-41页
  3 讨论第41-42页
 第五章 SB 整合型鸡输卵管特异表达载体体内表达第42-52页
  摘要第42页
  前言第42页
  1 材料与方法第42-45页
   ·试剂第42-43页
   ·试验鸡第43页
   ·质粒DNA 的制备第43页
   ·产蛋鸡的重组载体注射第43页
   ·RT-PCR 检测第43-44页
   ·注射鸡输卵管膨大部组织冰冻切片检测第44页
   ·注射鸡输卵管膨大部组织免疫组织化学检测第44页
   ·输卵管注射部位基因组PCR 检测第44页
   ·输卵管注射部位基因组dot blotting 检测第44-45页
  2 结果第45-50页
   ·EGFP 基因在鸡输卵管膨大部的转录第45页
   ·EGFP 基因在输卵管膨大部的表达第45-46页
   ·输卵管注射部位基因组PCR 检测第46-47页
   ·输卵管注射部位基因组dot blotting 检测第47-48页
   ·LF 基因在鸡输卵管膨大部的转录第48-49页
   ·LF 基因在输卵管膨大部的表达第49-50页
  3 讨论第50-52页
 第六章 SB 整合型组织表达载体的构建及睾丸内整合表达第52-65页
  摘要第52页
  前言第52-53页
  1 材料和方法第53-57页
   ·试验材料第53页
   ·试验鸡第53页
   ·转座子载体pT2/HB-CMV-EGFP 的构建第53-54页
   ·质粒DNA 的准备第54页
   ·重组载体公鸡睾丸网注射第54-55页
   ·RT-PCR 检测第55页
   ·注射鸡睾丸组织冰冻切片检测第55页
   ·注射鸡睾丸组织免疫组化检测第55-56页
   ·睾丸注射部位基因组PCR 检测第56-57页
   ·睾丸注射部位基因组dot blotting 检测第57页
  2 结果第57-64页
   ·转座子重组载体pT2/HB-CMV-EGFP 的构建与鉴定第57-58页
   ·EGFP 基因在鸡睾丸的转录第58-60页
   ·EGFP 基因在鸡睾丸的表达第60-61页
   ·睾丸组织免疫组化检测第61-62页
   ·睾丸基因组的PCR 检测第62-63页
   ·睾丸注射部位基因组dot blotting 检测第63-64页
  3 讨论第64-65页
 结论第65-66页
 参考文献第66-68页
致谢第68-69页
攻读学位期间发表学术论文目录第69页

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