中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一篇 文献综述 | 第10-28页 |
第一章 “睡美人”(Sleeping Beauty ,SB)转座子研究现状 | 第10-15页 |
一、SB 转座系统的结构 | 第10-12页 |
二、SB 转座的机制 | 第12-13页 |
三、SB 作为基因转移载体的应用 | 第13-15页 |
第二章 转基因鸡研究进展 | 第15-20页 |
一、转基因鸡的研制方法 | 第15-17页 |
二、鸡输卵管生物反应器研究进展 | 第17-20页 |
第三章 人乳铁蛋白的研究现状 | 第20-22页 |
参考文献 | 第22-28页 |
第二篇 试验研究 | 第28-68页 |
前言 | 第28-30页 |
第四章 SB 整合型鸡输卵管特异表达载体的构建 | 第30-42页 |
摘要 | 第30页 |
前言 | 第30-31页 |
1 材料和方法 | 第31-37页 |
·菌株及试剂 | 第31页 |
·试验鸡 | 第31页 |
·鸡基因组DNA 的制备 | 第31页 |
·PCR 扩增 | 第31-32页 |
·PCR 产物的克隆及序列分析 | 第32-33页 |
·pcDNA3.0 的改造 | 第33页 |
·输卵管特异表达载体的构建 | 第33-34页 |
·pOV-EGFP 的构建 | 第34-35页 |
·pOV-LF 的构建 | 第35页 |
·SB 整合型表达载体的构建 | 第35-37页 |
2 结果 | 第37-41页 |
·鸡输卵管特异表达载体的构建与鉴定 | 第37页 |
·表达EGFP 基因重组载体的构建与鉴定 | 第37-38页 |
·表达LF 基因重组载体的构建与鉴定 | 第38-39页 |
·表达EGFP 基因的SB 整合型载体的构建与鉴定 | 第39-40页 |
·表达LF 基因的SB 整合型载体的构建与鉴定 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-42页 |
第五章 SB 整合型鸡输卵管特异表达载体体内表达 | 第42-52页 |
摘要 | 第42页 |
前言 | 第42页 |
1 材料与方法 | 第42-45页 |
·试剂 | 第42-43页 |
·试验鸡 | 第43页 |
·质粒DNA 的制备 | 第43页 |
·产蛋鸡的重组载体注射 | 第43页 |
·RT-PCR 检测 | 第43-44页 |
·注射鸡输卵管膨大部组织冰冻切片检测 | 第44页 |
·注射鸡输卵管膨大部组织免疫组织化学检测 | 第44页 |
·输卵管注射部位基因组PCR 检测 | 第44页 |
·输卵管注射部位基因组dot blotting 检测 | 第44-45页 |
2 结果 | 第45-50页 |
·EGFP 基因在鸡输卵管膨大部的转录 | 第45页 |
·EGFP 基因在输卵管膨大部的表达 | 第45-46页 |
·输卵管注射部位基因组PCR 检测 | 第46-47页 |
·输卵管注射部位基因组dot blotting 检测 | 第47-48页 |
·LF 基因在鸡输卵管膨大部的转录 | 第48-49页 |
·LF 基因在输卵管膨大部的表达 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
第六章 SB 整合型组织表达载体的构建及睾丸内整合表达 | 第52-65页 |
摘要 | 第52页 |
前言 | 第52-53页 |
1 材料和方法 | 第53-57页 |
·试验材料 | 第53页 |
·试验鸡 | 第53页 |
·转座子载体pT2/HB-CMV-EGFP 的构建 | 第53-54页 |
·质粒DNA 的准备 | 第54页 |
·重组载体公鸡睾丸网注射 | 第54-55页 |
·RT-PCR 检测 | 第55页 |
·注射鸡睾丸组织冰冻切片检测 | 第55页 |
·注射鸡睾丸组织免疫组化检测 | 第55-56页 |
·睾丸注射部位基因组PCR 检测 | 第56-57页 |
·睾丸注射部位基因组dot blotting 检测 | 第57页 |
2 结果 | 第57-64页 |
·转座子重组载体pT2/HB-CMV-EGFP 的构建与鉴定 | 第57-58页 |
·EGFP 基因在鸡睾丸的转录 | 第58-60页 |
·EGFP 基因在鸡睾丸的表达 | 第60-61页 |
·睾丸组织免疫组化检测 | 第61-62页 |
·睾丸基因组的PCR 检测 | 第62-63页 |
·睾丸注射部位基因组dot blotting 检测 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表学术论文目录 | 第69页 |