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柔嫩艾美耳球虫A08与棒状体蛋白的单抗制备及酵母表达系统构建

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第1章 绪论第8-18页
   ·单克隆抗体在球虫研究中的应用第8-16页
     ·单抗在球虫功能分子鉴定中的应用第9-13页
     ·单抗在球虫感染过程中的免疫机制等研究的应用第13-14页
     ·单抗对球虫病的预防作用第14页
     ·新型抗体的探索第14-15页
     ·结语第15-16页
   ·鸡球虫功能基因的酵母表达研究第16-18页
     ·鸡球虫功能基因的常用表达系统第16-17页
     ·酵母表达系统及其在鸡球虫功能基因研究中的应用第17-18页
第2章 柔嫩艾美耳球虫A08蛋白和棒状体蛋白单抗的制备第18-40页
   ·引言第18页
   ·材料与方法第18-32页
     ·试验动物第18页
     ·菌株、虫株与细胞系第18-19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要仪器第19-20页
     ·主要试剂配制第20-23页
     ·柔嫩艾美耳球虫子孢子与子孢子全蛋白的制备第23-24页
     ·重组蛋白的表达、纯化与鉴定第24-26页
     ·动物免疫第26-27页
     ·细胞融合与筛选第27-29页
     ·杂交瘤细胞的克隆化第29页
     ·单克隆抗体腹水的制备第29页
     ·杂交瘤细胞染色体分析第29-30页
     ·单克隆抗体效价测定第30页
     ·单克隆抗体亚类鉴定第30页
     ·单克隆抗体Western-blot 鉴定第30-31页
     ·EtRP 的免疫荧光定位第31-32页
     ·EtRP 的入侵抑制试验第32页
   ·结果第32-37页
     ·柔嫩艾美耳球虫子孢子与子孢子全蛋白的制备第32-33页
     ·重组蛋白的表达纯化第33-34页
     ·杂交瘤细胞株的建立第34页
     ·杂交瘤细胞染色体分析第34页
     ·单抗效价与亚类测定第34-35页
     ·单抗Western-blot 鉴定第35-36页
     ·EtRP 免疫荧光定位第36页
     ·EtRP 入侵抑制试验结果第36-37页
   ·讨论第37-40页
第3章 柔嫩艾美耳球虫A08 基因毕赤酵母表达系统的构建第40-54页
   ·引言第40页
   ·材料与方法第40-48页
     ·菌株与质粒第40页
     ·主要试剂第40-41页
     ·主要仪器第41页
     ·主要试剂配制第41-44页
     ·重组质粒pPIC9k-EtA08 的构建第44-46页
     ·重组质粒pPIC9k-EtA08的转化与筛选第46-48页
     ·目的蛋白的诱导表达第48页
     ·Western-blot 分析第48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·重组质粒pPIC9k-EtA08的构建第48-50页
     ·重组质粒pPIC9k-EtA08 的转化、筛选与鉴定第50-51页
     ·目的蛋白的诱导表达第51-52页
     ·表达产物的Western-blot 鉴定第52页
   ·讨论第52-54页
第4章 全文结论第54-55页
参考文献第55-60页
附录第60-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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