| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-27页 |
| ·协同刺激分子概述 | 第10页 |
| ·PD-1 及其配体PD-L 构成的负性免疫调节通路 | 第10-17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机制研究进展 | 第17-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-41页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第27页 |
| ·质粒、细胞与病毒 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·猪PD-1 基因的克隆与鉴定 | 第28-33页 |
| ·猪PD-1 及其配体的荧光定量RT-PCR 检测方法的建立 | 第33-35页 |
| ·猪PD-1 和PD-L1 蛋白的单克隆抗体的制备 | 第35-38页 |
| ·PRRSV 体外感染猪PAM 细胞对PD-L1 和PD-L2 表达的影响 | 第38-39页 |
| ·PRRSV 感染仔猪对PBMC 中PD-1 分子表达的影响 | 第39-40页 |
| ·统计学分析 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-71页 |
| ·从猪 PBMC 的 cDNA 中克隆猪 PD-1 基因 | 第41页 |
| ·猪PD-1 基因的序列分析 | 第41-42页 |
| ·从猪 PBMC 的 cDNA 中克隆猪的 PD-L1 基因 | 第42页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第42页 |
| ·可溶性蛋白的制备 | 第42-47页 |
| ·猪PD-1 与PD-L1 的结合试验 | 第47页 |
| ·猪PD-1 与PD-L1 结合对T 细胞增殖和细胞因子分泌的影响 | 第47-52页 |
| ·猪PD-1 及其配体的荧光定量RT-PCR 检测方法的建立 | 第52-55页 |
| ·抗猪PD-1 和PD-L1 蛋白单克隆抗体的制备 | 第55-63页 |
| ·PRRSV 体外感染猪PAM 细胞对PD-L1 和PD-L2 表达的影响 | 第63-66页 |
| ·PRRSV 感染仔猪对PBMC 中PD-1 分子表达的影响 | 第66-71页 |
| 4 讨论 | 第71-76页 |
| ·研究PD-1/PD-L 通路与PRRSV 感染机制的必要性 | 第71页 |
| ·PD-1 基因多态性与疾病的关系 | 第71-72页 |
| ·猪PD-1 与PD-L1 结合可以抑制T 细胞功能 | 第72页 |
| ·荧光定量PCR 技术是研究基因表达变化的有效方法 | 第72-73页 |
| ·单克隆抗体制备策略 | 第73页 |
| ·PD-1/PD-L 通路与病毒持续性感染 | 第73-74页 |
| ·阻断PD-1/PD-L 通路是多种疾病治疗的靶标 | 第74-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-92页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第92页 |
