| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言与文献综述 | 第10-32页 |
| ·甘蔗概述 | 第10-12页 |
| ·甘蔗的生物学特性 | 第10页 |
| ·甘蔗的经济价值 | 第10-12页 |
| ·甘蔗是重要的糖料作物 | 第10-11页 |
| ·甘蔗作为生物反应器的优点 | 第11页 |
| ·甘蔗副产品的利用 | 第11页 |
| ·甘蔗是重要的能源植物 | 第11-12页 |
| ·甘蔗转基因技术 | 第12-18页 |
| ·农杆菌介导法 | 第12-14页 |
| ·农杆菌介导的转化机理 | 第12-13页 |
| ·农杆菌转化系统的特点 | 第13页 |
| ·质粒载体系统的构建 | 第13-14页 |
| ·农杆菌介导植物转化技术在禾本科植物中的应用 | 第14页 |
| ·其他转化方法 | 第14-16页 |
| ·基因枪法 | 第14页 |
| ·电激法 | 第14-15页 |
| ·脂质介导法 | 第15页 |
| ·PEG介导法 | 第15页 |
| ·微注射法 | 第15页 |
| ·超声波介导法 | 第15页 |
| ·脉冲电泳法 | 第15页 |
| ·病毒介异法 | 第15-16页 |
| ·染色体直接介导转化法 | 第16页 |
| ·筛选标记基因的研究进展 | 第16页 |
| ·甘蔗遗传转化的研究进展 | 第16-18页 |
| ·甘蔗抗虫转基因研究 | 第16页 |
| ·甘蔗抗病毒转基因研究 | 第16-17页 |
| ·甘蔗抗菌转基因研究 | 第17页 |
| ·甘蔗抗除草剂转基因研究 | 第17页 |
| ·提高甘蔗抗逆性的转基因研究 | 第17页 |
| ·甘蔗作为生物反应器的研究 | 第17-18页 |
| ·提高甘蔗蔗糖含量和改良蔗糖色泽的转基因研究 | 第18页 |
| ·锌指蛋白的研究进展 | 第18-25页 |
| ·锌指蛋白的分类 | 第19页 |
| ·锌指蛋白调控基因转录的功能 | 第19-22页 |
| ·锌指蛋白的DNA识别作用 | 第20-21页 |
| ·锌指蛋白的RNA识别作用 | 第21页 |
| ·锌指蛋白与蛋白质的作用 | 第21-22页 |
| ·植物C2H2型锌指蛋白 | 第22-24页 |
| ·植物C2H2型锌指蛋白的结构 | 第22-23页 |
| ·植物C2H2型锌指蛋白对靶DNA的识别 | 第23-24页 |
| ·逆境胁迫相关的锌指蛋白 | 第24-25页 |
| ·反义RNA研究进展 | 第25-28页 |
| ·反义RNA作用机制 | 第25-26页 |
| ·DNA复制水平上的调控 | 第25-26页 |
| ·转录水平上的调控 | 第26页 |
| ·翻译水平上的调控 | 第26页 |
| ·反义RNA在植物基因工程中的应用 | 第26-28页 |
| ·控制果实性状 | 第26-27页 |
| ·雄性不育的控制 | 第27页 |
| ·植物抗病性的研究 | 第27页 |
| ·对植物性状的控制 | 第27-28页 |
| ·植物逆境生理及其耐(抗)性机制 | 第28-31页 |
| ·生物膜及一些保护酶系统 | 第28-29页 |
| ·活性氧的产生与清除 | 第29页 |
| ·渗透胁迫及其调节 | 第29页 |
| ·光合作用减弱 | 第29-30页 |
| ·激素水平的变化 | 第30页 |
| ·胁迫蛋白的合成 | 第30页 |
| ·胁迫诱导基因的表达及调控 | 第30-31页 |
| ·本研究的目的、内容和技术路线 | 第31-32页 |
| ·研究目的 | 第31页 |
| ·研究内容 | 第31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-47页 |
| ·材料与试剂 | 第32-33页 |
| ·质粒及菌种 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-42页 |
| ·引物设计及基因扩增 | 第33-34页 |
| ·甘蔗锌指蛋白ShZP基因cDNA引物的设计 | 第33页 |
| ·甘蔗锌指蛋白ShZP基因正义反义目的片段的扩增 | 第33-34页 |
| ·电泳检测PCR产物 | 第34页 |
| ·PCR扩增产物的克隆与测序 | 第34-38页 |
| ·目的片段的回收 | 第34-35页 |
| ·目的片段与pMD18-T Vector的连接 | 第35页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36页 |
| ·重组质粒DNA的小量提取 | 第36-37页 |
| ·电泳分析 | 第37页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第37页 |
| ·重组菌pMDShZP和pMDantiShZP的保存 | 第37-38页 |
| ·PCR产物的测序 | 第38页 |
| ·甘蔗锌指蛋白ShZP基因植物表达载体的构建 | 第38-41页 |
| ·质粒载体的小量提取及纯化 | 第38-39页 |
| ·pCRBI中间载体质粒的小量提取与纯化 | 第38页 |
| ·中间载体pCRBI的保存 | 第38-39页 |
| ·pMDShZP和pMDantiShZP质粒的小量提取与纯化 | 第39页 |
| ·中间载体pCRBI的酶切 | 第39页 |
| ·克隆载体pMDShZP和pMDantiShZP的酶切 | 第39页 |
| ·目的基因与中间载体的连接反应 | 第39-40页 |
| ·连接产物的转化 | 第40页 |
| ·重组质粒DNA的小量提取 | 第40页 |
| ·重组质粒的电泳分析 | 第40页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组菌pCRBIShZP和pCRBIantiShZP的保存 | 第41页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第41-42页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化 | 第41-42页 |
| ·重组子PCR鉴定 | 第42页 |
| ·甘蔗锌指蛋白SHZP基因正义反义基因遗传转化甘蔗 | 第42-45页 |
| ·甘蔗转化材料的准备 | 第43-44页 |
| ·甘蔗培养基的成分 | 第43页 |
| ·甘蔗转化愈伤的诱导 | 第43页 |
| ·甘蔗分化苗Basta筛选浓度实验 | 第43页 |
| ·甘蔗生根苗的Basta筛选实验 | 第43-44页 |
| ·甘蔗组培苗的生根实验 | 第44页 |
| ·农杆菌菌液的准备 | 第44页 |
| ·农杆菌菌液浸染愈伤组织及共培养 | 第44-45页 |
| ·侵染 | 第44页 |
| ·农杆菌浸染后的愈伤组织分化成苗 | 第44-45页 |
| ·甘蔗小植株的筛选培养及定植 | 第45页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第45-47页 |
| ·植物总DNA的小量提取 | 第45页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第45-47页 |
| ·bar基因的检测 | 第46页 |
| ·启动子连接目的基因区间一个特异片段的检测 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-56页 |
| ·甘蔗锌指蛋白SHZP基因正义反义目的片段的扩增 | 第47-48页 |
| ·甘蔗锌指蛋白SHZP基因的序列比较 | 第48-49页 |
| ·甘蔗锌指蛋白SHZP基因植物表达载体的构建 | 第49页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导的甘蔗转化 | 第50-54页 |
| ·甘蔗转化材料的选择 | 第50-51页 |
| ·甘蔗分化苗Basta筛选浓度实验 | 第51页 |
| ·甘蔗生根苗的Basta筛选实验 | 第51-52页 |
| ·甘蔗组培苗的生根实验 | 第52页 |
| ·农杆菌介导的甘蔗遗传转化 | 第52-54页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第54-56页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第54页 |
| ·抗性植株的Bar基因PCR检测 | 第54-55页 |
| ·启动子连接目的基因的一个特异片段PCR检测 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| ·关于甘蔗锌指蛋白SHZP基因 | 第56页 |
| ·关于反义RNA抑制基因的表达 | 第56页 |
| ·关于干旱诱导启动子 | 第56-57页 |
| 5. 结论 | 第57-58页 |
| 6 本试验研究的后续工作 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 缩写词 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
