| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstracts | 第10-12页 |
| 主要英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 参考文献 | 第17-20页 |
| 第一部分 去甲肾上腺素促进内皮祖细胞动员 | 第20-33页 |
| 一、材料和设备 | 第21-22页 |
| (一) 材料 | 第21-22页 |
| (二) 设备 | 第22页 |
| 二. 方法 | 第22-25页 |
| (一) C57小鼠肢体缺血模型的制备 | 第22-23页 |
| (二) 给药干预方案 | 第23页 |
| (三) 小鼠骨髓细胞的分离制备 | 第23-24页 |
| (四) 脾脏淋巴细胞的分离制备 | 第24页 |
| (五) 外周血单个核细胞的分离与制备 | 第24页 |
| (六) 细胞的标记染色和流式检测 | 第24-25页 |
| 三、结果 | 第25-27页 |
| (一) 去甲肾上腺素促进骨髓内皮祖细胞的增殖 | 第25-26页 |
| (二) 去甲肾上腺素增加外周血内皮祖细胞的数量 | 第26页 |
| (三) 去甲肾上腺素增加脾脏内内皮祖细胞的数量 | 第26-27页 |
| 四、讨论 | 第27-30页 |
| 五、参考文献 | 第30-33页 |
| 第二部分 去甲肾上腺素改善体外培养的内皮祖细胞功能 | 第33-49页 |
| 一、材料与设备 | 第33-36页 |
| (一)材料 | 第33-35页 |
| (二) 设备 | 第35-36页 |
| 二、方法 | 第36-38页 |
| (一) EPCs的分离、培养及鉴定 | 第36-37页 |
| (二) EPCs增殖实验 | 第37页 |
| (三) EPCs迁移实验 | 第37-38页 |
| 三、结果 | 第38-43页 |
| (一) 去甲肾上腺素显著地促进EPCs的增殖 | 第38页 |
| (二) beta1受体阻滞剂促进EPCs的增殖 | 第38-39页 |
| (三) 去甲肾上腺素促进EPCs增殖的作用受体 | 第39-41页 |
| (四) MAPK和PI3K信号通路在去甲肾上腺素促进EPCs增殖的作用 | 第41-42页 |
| (五) 去甲肾上腺素促进EPCs迁移 | 第42-43页 |
| 四、讨论 | 第43-46页 |
| 五、参考文献 | 第46-49页 |
| 第三部分 去甲肾上腺素促进内皮祖细胞功能的分子机制 | 第49-62页 |
| 一. 材料和设备 | 第50-52页 |
| (一) 材料 | 第50-51页 |
| (二) 设备 | 第51-52页 |
| 二. 方法 | 第52-56页 |
| (一) EPCs的分离、培养及鉴定 | 第52-53页 |
| (二) EPCs总蛋白的提取 | 第53页 |
| (三) 蛋白浓度的测定 | 第53-54页 |
| (四) Western-Blot | 第54-56页 |
| 三、结果 | 第56-58页 |
| (一) 去甲肾上腺素激活EPCs SRC-ERK通路 | 第56-57页 |
| (二) α受体阻断剂和beta2受体阻断剂阻断Src-Erk信号通路的激活 | 第57-58页 |
| 四、讨论 | 第58-60页 |
| 五、参考文献 | 第60-62页 |
| 第四部分 beta-arrestin 2在去甲肾上腺素促进内皮祖细胞中的作用 | 第62-87页 |
| 一、材料与设备 | 第63-68页 |
| (一) 材料 | 第63-67页 |
| (二) 设备 | 第67-68页 |
| 二. 方法 | 第68-77页 |
| (一) EPCs的分离、培养及鉴定 | 第68-69页 |
| (二) 带荧光阴性对照SiRNA脂质体转染内皮祖细胞实验 | 第69页 |
| (三) beta-arrestin 2 SiRNA脂质体转染内皮祖细胞 | 第69页 |
| (四) EPCs总RNA的提取 | 第69-70页 |
| (五) RNA质量检测——紫外吸收测定法 | 第70-71页 |
| (六) 使用样品的RNA进行cDNA合成 | 第71页 |
| (七) PCR反应 | 第71-73页 |
| (八) EPCs总蛋白的提取 | 第73页 |
| (九) 蛋白浓度的测定 | 第73-74页 |
| (十) Western-Blot | 第74-76页 |
| (十一) EPCs增殖实验 | 第76-77页 |
| (十二) EPCs迁移实验 | 第77页 |
| 三、结果 | 第77-82页 |
| (一) 糖尿病患者beta-arrestin 2表达降低 | 第77-78页 |
| (二) 荧光阴性SiRNA转染EPCs | 第78页 |
| (三) RNA水平确认SiRNA对beta-arrestin 2的干扰效果 | 第78-79页 |
| (四) 蛋白水平确认SiRNA对beta-arrestin 2的表达抑制作用 | 第79页 |
| (五) beta-arrestin2表达对EPCs增殖能力的影响 | 第79-80页 |
| (六) beta-arrestin2在去甲肾上腺素促进EPCs增殖中的作用 | 第80-81页 |
| (七) beta-arrestin2在去甲肾上腺素促进EPCs迁移中的作用 | 第81-82页 |
| 四、讨论 | 第82-84页 |
| 五、参考文献 | 第84-87页 |
| 综述 | 第87-100页 |
| 参考文献 | 第96-100页 |
| 附录 | 第100-101页 |
| 一、在读期间主要学术活动 | 第100-101页 |
| (一) 参加学习 | 第100页 |
| (二) 发表论文 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
