中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
Abbreviations | 第16-19页 |
CHAPTER 1 Introduction | 第19-37页 |
1.1 Myzus persicae biology | 第19-20页 |
1.1.1 Life cycle | 第19-20页 |
1.1.2 Significance | 第20页 |
1.2 Hormesis | 第20-22页 |
1.3 Insecticide and Myzus persicae | 第22-29页 |
1.3.1 Insecticide resistance | 第23页 |
1.3.2 Resistance mechanisms | 第23-29页 |
1.4 Synergists | 第29-30页 |
1.5 Resistance monitoring based on loop-mediated isothermal amplification(LAMP) | 第30-35页 |
1.5.1 Working principle | 第32-35页 |
1.5.2 Detection of LAMP amplicons | 第35页 |
1.6 Objectives and hypothesis | 第35-37页 |
CHAPTER 2 Evaluation of Insecticides induced hormesis based on the demographic parameters and expression changes of CYP6CY3 and E4/FE4 in Myzus persicae | 第37-54页 |
2.1 Introduction | 第37-38页 |
2.2 Material and Methods | 第38-41页 |
2.2.1 Insect rearing | 第38页 |
2.2.2 Insecticides solution | 第38-39页 |
2.2.3 Bioassay | 第39页 |
2.2.4 Sublethal dose exposure | 第39页 |
2.2.5 Analysis of demographic parameters | 第39-40页 |
2.2.6 Total RNA extraction and cDNA synthesis | 第40页 |
2.2.7 Gene expression | 第40-41页 |
2.2.8 Statistical analysis | 第41页 |
2.3 Results | 第41-51页 |
2.3.1 Bioassays | 第41-43页 |
2.3.2 Sublethal effects of neonicotinoids | 第43-46页 |
2.3.3 Sublethal effects of pyrethroids | 第46-49页 |
2.3.4 Insecticides resistance linked genes expression | 第49-51页 |
2.4 Discussion | 第51-54页 |
CHAPTER 3 Resistance to imidacloprid and acetamiprid in a field population of Myzus Persicae in China | 第54-66页 |
3.1 Introduction | 第54-55页 |
3.2 Materials and Methods | 第55-60页 |
3.2.1 M.persicae populations and rearing | 第55-56页 |
3.2.2 Chemicals and Reagents | 第56页 |
3.2.3 Detection of insecticide resistance | 第56页 |
3.2.4 Synergist response assays | 第56-57页 |
3.2.5 Total RNA isolation and cDNA synthesis | 第57页 |
3.2.6 Quantitative real-time PCR | 第57页 |
3.2.7 Sequence analysis of nAChR | 第57-60页 |
3.2.8 Statistical analysis | 第60页 |
3.3 Results | 第60-64页 |
3.3.1 M.persicae collected from Lang fang(FP)resistance to two neonicotinoids | 第60页 |
3.3.2 Synergism of PBO in FP population compared to susceptible clone(SC) | 第60-62页 |
3.3.3 Expression levels of cytochrome P450 CYP6CY3 and esterase E4/EF4 in SC clone and FP population | 第62页 |
3.3.4 Sequence analysis of M.persicae n AChRβ1 subunit | 第62-64页 |
3.4 Discussion | 第64-66页 |
CHAPTER 4 Loop-mediated isothermal amplification for the detection of R81T mutation in nAChR with crude genomic DNA extracted from individual Myzus persicae | 第66-83页 |
4.1 Introduction | 第66-67页 |
4.2 Materials and Methods | 第67-72页 |
4.2.1 M.persicae clones or populations | 第67-68页 |
4.2.2 Genomic DNA extraction,and quantification and quality detection | 第68页 |
4.2.3 Amplification of the part of intronic sequence of the nAChR | 第68-69页 |
4.2.4 Design of LAMP primers | 第69-70页 |
4.2.5 Optimization of LAMP reaction components | 第70-71页 |
4.2.6 Optimization of LAMP reaction conditions | 第71页 |
4.2.7 Assessment of LAMP on detection R81T mutant genotype with different populations | 第71-72页 |
4.3 Results | 第72-81页 |
4.3.1 Quantity and quality of DNA | 第72-74页 |
4.3.2 Amplification of R81T point mutation region of nAChR | 第74页 |
4.3.3 LAMP development | 第74-79页 |
4.3.4 Genotyping of field populations detected with the developed LAMP | 第79-81页 |
4.4 Discussion | 第81-83页 |
CHAPTER 5 General Discussion | 第83-87页 |
Future prospects | 第87-88页 |
ACKNOWLEDGEMENTS | 第88-90页 |
REFERENCES | 第90-108页 |
Author Biography | 第108-115页 |