摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第15-29页 |
1. 核受体超家族 | 第15-17页 |
1.1 核受体的发现 | 第15-16页 |
1.2 核受体的分类 | 第16页 |
1.3 核受体的结构 | 第16-17页 |
2. 视黄醇类X受体 | 第17-20页 |
2.1 RXR的简介 | 第17-18页 |
2.2 RXR的结构与配体 | 第18-19页 |
2.3 RXRα的基因型功能与非基因型功能 | 第19-20页 |
3. Micro RNA简介 | 第20-25页 |
3.1. MicroRNA的成熟加工过程 | 第20-25页 |
4. Hsa-miR-103简介 | 第25-26页 |
5. 核受体与MicroRNA的关系 | 第26页 |
6. IL6/STAT3/ SOCS3信号通路 | 第26-27页 |
7. 硝基苯乙烯衍生物Z10 | 第27-28页 |
8. 本课题研究的目的与意义 | 第28-29页 |
第二章 实验材料和方法 | 第29-50页 |
1. 实验材料 | 第29-32页 |
1.1 细胞株、质粒和菌株 | 第29页 |
1.2 主要试剂 | 第29-31页 |
1.3 主要仪器 | 第31-32页 |
2. 实验方法 | 第32-50页 |
2.1. TRIzol法提取RNA | 第32-33页 |
2.2. RNA反转录成cDNA | 第33-34页 |
2.3. 实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第34-36页 |
2.4 RNA免疫共沉淀(RNA Immunoprecipitation assay) | 第36-37页 |
2.5. 重组的蛋白表达和纯化 | 第37-39页 |
2.6. 质粒DNA转录及纯化 | 第39-40页 |
2.7. GST-puLldown RNAAssay | 第40-42页 |
2.8. 蛋白印迹法(Western Blot) | 第42-44页 |
2.9. 质粒大量抽提(CsCl密度梯度离心法) | 第44-47页 |
2.10 细胞培养 | 第47页 |
2.11 细胞转染 | 第47-48页 |
2.12 感受态制备 | 第48-50页 |
第三章 实验结果与分析 | 第50-71页 |
1. 筛选人类基因组中含有AGGUCA序列的部分miRNA | 第50-51页 |
2. 体外实验证实RXRα可以与pre-miR-103a-2结合 | 第51-52页 |
3. GST标签融合蛋白的构建与表达 | 第52-54页 |
4. RXR α与pre-miR-103a-2的结合是具有选择性的 | 第54-56页 |
5. RXR α与pre-miR-103a-2可以在细胞内结合 | 第56-58页 |
5.1 RXRα与pre-miR-103a-2可以在细胞内结合 | 第56-57页 |
5.2 过表达的RXRα与pre-miR-103a-2可以在细胞内结合 | 第57-58页 |
6. 体外实验表明RXR α的N端介导了与pre-miR-103a-2的结合 | 第58-59页 |
7. RXRα和pre-miR-103a-2的结合需要AGGUCA序列 | 第59-61页 |
8. RXR α可以通过结合pre-miR-103a-2而抑制miR-103a-2的生成 | 第61-64页 |
8.1 RXRα的过表达可以抑制miR-103a-2的生成 | 第62-63页 |
8.2 RXRα表达下调时可以促进miR-103a-2的生成 | 第63-64页 |
9. miR-103a-2的靶基因预测结果及分析 | 第64-65页 |
10. RXRα可以调控miR-103a-2靶基因SOCS-3的表达 | 第65-67页 |
11. RXR α的小分子配体Z-10可以调控miR-103a-2及其靶基因SOCS-3的表达 | 第67-68页 |
12. 对miR-103a-2靶基因SOCS-3生理功能的初步探索 | 第68-71页 |
第四章 讨论 | 第71-73页 |
1. RXRα对成熟的miRNA的调控作用 | 第71页 |
2. RXR α配体对RXR α与miRNA相互作用的调节 | 第71页 |
3. 对miR-103a-2的靶基因SOCS-3作进一步的证明 | 第71-72页 |
4. RXRα与miRNA交互作用的生理学,病理学意义 | 第72-73页 |
第五章 结论与展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
致谢 | 第82页 |