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RXRα对miR-103a-2调节作用的研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 前言第15-29页
    1. 核受体超家族第15-17页
        1.1 核受体的发现第15-16页
        1.2 核受体的分类第16页
        1.3 核受体的结构第16-17页
    2. 视黄醇类X受体第17-20页
        2.1 RXR的简介第17-18页
        2.2 RXR的结构与配体第18-19页
        2.3 RXRα的基因型功能与非基因型功能第19-20页
    3. Micro RNA简介第20-25页
        3.1. MicroRNA的成熟加工过程第20-25页
    4. Hsa-miR-103简介第25-26页
    5. 核受体与MicroRNA的关系第26页
    6. IL6/STAT3/ SOCS3信号通路第26-27页
    7. 硝基苯乙烯衍生物Z10第27-28页
    8. 本课题研究的目的与意义第28-29页
第二章 实验材料和方法第29-50页
    1. 实验材料第29-32页
        1.1 细胞株、质粒和菌株第29页
        1.2 主要试剂第29-31页
        1.3 主要仪器第31-32页
    2. 实验方法第32-50页
        2.1. TRIzol法提取RNA第32-33页
        2.2. RNA反转录成cDNA第33-34页
        2.3. 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)第34-36页
        2.4 RNA免疫共沉淀(RNA Immunoprecipitation assay)第36-37页
        2.5. 重组的蛋白表达和纯化第37-39页
        2.6. 质粒DNA转录及纯化第39-40页
        2.7. GST-puLldown RNAAssay第40-42页
        2.8. 蛋白印迹法(Western Blot)第42-44页
        2.9. 质粒大量抽提(CsCl密度梯度离心法)第44-47页
        2.10 细胞培养第47页
        2.11 细胞转染第47-48页
        2.12 感受态制备第48-50页
第三章 实验结果与分析第50-71页
    1. 筛选人类基因组中含有AGGUCA序列的部分miRNA第50-51页
    2. 体外实验证实RXRα可以与pre-miR-103a-2结合第51-52页
    3. GST标签融合蛋白的构建与表达第52-54页
    4. RXR α与pre-miR-103a-2的结合是具有选择性的第54-56页
    5. RXR α与pre-miR-103a-2可以在细胞内结合第56-58页
        5.1 RXRα与pre-miR-103a-2可以在细胞内结合第56-57页
        5.2 过表达的RXRα与pre-miR-103a-2可以在细胞内结合第57-58页
    6. 体外实验表明RXR α的N端介导了与pre-miR-103a-2的结合第58-59页
    7. RXRα和pre-miR-103a-2的结合需要AGGUCA序列第59-61页
    8. RXR α可以通过结合pre-miR-103a-2而抑制miR-103a-2的生成第61-64页
        8.1 RXRα的过表达可以抑制miR-103a-2的生成第62-63页
        8.2 RXRα表达下调时可以促进miR-103a-2的生成第63-64页
    9. miR-103a-2的靶基因预测结果及分析第64-65页
    10. RXRα可以调控miR-103a-2靶基因SOCS-3的表达第65-67页
    11. RXR α的小分子配体Z-10可以调控miR-103a-2及其靶基因SOCS-3的表达第67-68页
    12. 对miR-103a-2靶基因SOCS-3生理功能的初步探索第68-71页
第四章 讨论第71-73页
    1. RXRα对成熟的miRNA的调控作用第71页
    2. RXR α配体对RXR α与miRNA相互作用的调节第71页
    3. 对miR-103a-2的靶基因SOCS-3作进一步的证明第71-72页
    4. RXRα与miRNA交互作用的生理学,病理学意义第72-73页
第五章 结论与展望第73-74页
参考文献第74-82页
致谢第82页

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