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非脊椎动物Kv2基因A至I RNA编辑位点的鉴定和形成机制的初步研究

致谢第1-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-7页
缩略语第7-10页
第一章 引言第10-19页
   ·C至U RNA编辑第10-11页
     ·高等植物中的RNA编辑第10页
     ·哺乳动物载脂蛋白RNA的编辑第10-11页
   ·A至I RNA编辑第11-16页
     ·A至I RNA编辑酶第12-13页
     ·底物与位点编辑特异性第13-15页
     ·非编码区的A至I RNA编辑第15-16页
   ·A-I RNA编辑与RNA干扰第16页
   ·RNA编辑与人类疾病第16-19页
     ·癫痫第17页
     ·抑郁症和精神分裂第17-18页
     ·病毒侵染第18页
     ·肿瘤第18-19页
第二章 Kv2基因研究进展第19-23页
   ·钾离子通道分布与组成第19页
   ·Kv家族种类及结构第19-20页
   ·Kv2离子通道第20-21页
   ·Kv2基因的RNA编辑第21-23页
第三章 实验方案及设计第23-26页
   ·研究目的和意义第23页
   ·研究内容第23-25页
     ·Kv2基因A-I RNA编辑位点的检测及分析第24页
     ·昆虫Kv2基因A-I RNA编辑机理研究第24-25页
   ·技术路线第25-26页
第四章 Kv2基因RNA编辑位点的鉴定与分析第26-49页
   ·材料与试剂第26-27页
   ·实验方法第27-35页
     ·引物设计第27-29页
     ·基因组DNA的提取第29-30页
     ·使用Qiagen RNeasy mini-Kit从昆虫组织中提取总RNA:第30-31页
     ·使用Invitrogen SuperScriptⅢ 1st Strand cDNA Synthesis System进行RT-PCR进行逆转录反应:第31页
     ·分别以gDNA和cDNA为模板进行PCR扩增第31-32页
     ·PCR产物的纯化第32页
     ·PCR产物的胶回收第32-33页
     ·PCR产物直接测序(由上海英骏生物技术公司完成)第33页
     ·PCR扩增产物的T载体连接反应第33页
     ·E.coli TG1感受态细胞的制备第33-34页
     ·连接产物转化感受态细胞第34页
     ·使用AxyGEN Plasmid Miniprep Kit抽提质粒DNA第34-35页
     ·重组质粒酶切鉴定第35页
   ·结果与分析第35-45页
     ·所研究物种系统进化树的构建第35-37页
     ·各物种基因组与RT-PCR的扩增与序列分析第37-39页
     ·各辑位点编辑效率的分析第39-45页
   ·讨论第45-49页
第五章 编辑系统的建立及体内编辑的检测第49-63页
   ·材料与试剂第49页
   ·实验方法第49-54页
     ·引物设计第49-50页
     ·细胞培养第50-51页
     ·转染载体的构建第51-53页
     ·共转染果蝇S2细胞第53页
     ·编辑系统中的RNA回收第53页
     ·RT-PCR检测编辑情况:第53-54页
   ·结果与分析第54-60页
     ·二级结构的预测第54-56页
     ·编辑系统的建立第56-58页
     ·体内编辑第58-60页
   ·讨论第60-63页
参考文献第63-67页
个人简历第67页

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