致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语 | 第7-10页 |
第一章 引言 | 第10-19页 |
·C至U RNA编辑 | 第10-11页 |
·高等植物中的RNA编辑 | 第10页 |
·哺乳动物载脂蛋白RNA的编辑 | 第10-11页 |
·A至I RNA编辑 | 第11-16页 |
·A至I RNA编辑酶 | 第12-13页 |
·底物与位点编辑特异性 | 第13-15页 |
·非编码区的A至I RNA编辑 | 第15-16页 |
·A-I RNA编辑与RNA干扰 | 第16页 |
·RNA编辑与人类疾病 | 第16-19页 |
·癫痫 | 第17页 |
·抑郁症和精神分裂 | 第17-18页 |
·病毒侵染 | 第18页 |
·肿瘤 | 第18-19页 |
第二章 Kv2基因研究进展 | 第19-23页 |
·钾离子通道分布与组成 | 第19页 |
·Kv家族种类及结构 | 第19-20页 |
·Kv2离子通道 | 第20-21页 |
·Kv2基因的RNA编辑 | 第21-23页 |
第三章 实验方案及设计 | 第23-26页 |
·研究目的和意义 | 第23页 |
·研究内容 | 第23-25页 |
·Kv2基因A-I RNA编辑位点的检测及分析 | 第24页 |
·昆虫Kv2基因A-I RNA编辑机理研究 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25-26页 |
第四章 Kv2基因RNA编辑位点的鉴定与分析 | 第26-49页 |
·材料与试剂 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-35页 |
·引物设计 | 第27-29页 |
·基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
·使用Qiagen RNeasy mini-Kit从昆虫组织中提取总RNA: | 第30-31页 |
·使用Invitrogen SuperScriptⅢ 1st Strand cDNA Synthesis System进行RT-PCR进行逆转录反应: | 第31页 |
·分别以gDNA和cDNA为模板进行PCR扩增 | 第31-32页 |
·PCR产物的纯化 | 第32页 |
·PCR产物的胶回收 | 第32-33页 |
·PCR产物直接测序(由上海英骏生物技术公司完成) | 第33页 |
·PCR扩增产物的T载体连接反应 | 第33页 |
·E.coli TG1感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第34页 |
·使用AxyGEN Plasmid Miniprep Kit抽提质粒DNA | 第34-35页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-45页 |
·所研究物种系统进化树的构建 | 第35-37页 |
·各物种基因组与RT-PCR的扩增与序列分析 | 第37-39页 |
·各辑位点编辑效率的分析 | 第39-45页 |
·讨论 | 第45-49页 |
第五章 编辑系统的建立及体内编辑的检测 | 第49-63页 |
·材料与试剂 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-54页 |
·引物设计 | 第49-50页 |
·细胞培养 | 第50-51页 |
·转染载体的构建 | 第51-53页 |
·共转染果蝇S2细胞 | 第53页 |
·编辑系统中的RNA回收 | 第53页 |
·RT-PCR检测编辑情况: | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-60页 |
·二级结构的预测 | 第54-56页 |
·编辑系统的建立 | 第56-58页 |
·体内编辑 | 第58-60页 |
·讨论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
个人简历 | 第67页 |