致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1 针叶树组织培养研究概况及影响因素 | 第10-15页 |
·针叶树组织培养研究概况 | 第10-13页 |
·针叶树组织培养的影响因素 | 第13-15页 |
·外植体的选择 | 第13-14页 |
·基本培养基对针叶树组织培养的影响 | 第14页 |
·生长调节物质对针叶树组织培养的影响 | 第14页 |
·其他因素对针叶树组织培养的影响 | 第14-15页 |
2 林木转基因研究进展 | 第15页 |
3 遗传转化方法 | 第15-18页 |
·基因枪的类型 | 第16页 |
·影响基因枪技术转化效率的主要因素 | 第16-18页 |
·基因枪的轰击参数 | 第16-17页 |
·金属微粒的种类 | 第17页 |
·金属微粒的大小 | 第17页 |
·微弹运动速度 | 第17页 |
·微弹射程 | 第17页 |
·弹膛内的真空度 | 第17页 |
·轰击次数 | 第17页 |
·DNA 的纯度和浓度 | 第17-18页 |
·DNA 沉淀剂 | 第18页 |
·受体材料和基因型 | 第18页 |
·受体的生理因素 | 第18页 |
4 基因枪转化法步骤 | 第18-19页 |
·微弹的制备 | 第18页 |
·轰击前后材料的处理 | 第18-19页 |
·轰击后转化材料的筛选 | 第19页 |
·PCR 检测 | 第19页 |
5 基因枪转化技术在针叶树育种上的应用 | 第19-21页 |
6 木质素生物合成及其基因工程研究进展 | 第21-24页 |
·木质素的组成 | 第21页 |
·木质素生物合成途径 | 第21-23页 |
·木质素含量与组成的基因调控 | 第23-24页 |
第二章 杉木茎段外植体组织培养再生体系的建立 | 第24-39页 |
1 组培苗的获得 | 第24-25页 |
·实验材料 | 第24页 |
·实验方法 | 第24页 |
·数据统计方法 | 第24-25页 |
2 愈伤组织的诱导、增殖及不定芽的分化 | 第25-26页 |
·实验材料 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-26页 |
·愈伤组织诱导 | 第25页 |
·愈伤组织继代和增殖 | 第25页 |
·愈伤组织抑制褐化实验 | 第25页 |
·愈伤组织诱导不定芽 | 第25-26页 |
·生根培养 | 第26页 |
·数据统计方法 | 第26页 |
·愈伤组织诱导 | 第26页 |
·愈伤组织继代和增殖 | 第26页 |
·不定芽的诱导 | 第26页 |
3 结果与分析 | 第26-34页 |
·组培苗的获得 | 第26-28页 |
·愈伤组织的诱导 | 第28-30页 |
·基本培养基对愈伤组织诱导的影响 | 第28页 |
·不同激素组合对愈伤组织诱导的影响 | 第28-30页 |
·愈伤组织的继代与增殖 | 第30-33页 |
·基本培养基对愈伤继代增殖的影响 | 第30页 |
·2,4-D 对愈伤组织继代增殖的影响 | 第30-31页 |
·TDZ 对愈伤组织继代增殖的影响 | 第31页 |
·继代时间对愈伤组织继代增殖的影响 | 第31-32页 |
·抗褐化剂、培养条件对愈伤组织继代增殖的影响 | 第32-33页 |
·不同培养基对愈伤组织诱导不定芽的影响 | 第33-34页 |
·不定芽的伸长 | 第34页 |
·生根培养 | 第34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
·基本培养基与愈伤组织的诱导 | 第34页 |
·生长素类物质与愈伤组织诱导 | 第34-35页 |
·继代次数与不定芽的诱导 | 第35页 |
·愈伤组织继代与褐化抑制 | 第35-36页 |
图版I | 第36-39页 |
第三章 杉木茎段卡那霉素敏感性测定 | 第39-43页 |
1 材料与方法 | 第39-40页 |
·材料 | 第39页 |
·方法 | 第39页 |
·统计分析 | 第39-40页 |
2 结果与分析 | 第40-41页 |
·卡那霉素对杉木茎段愈伤组织诱导的影响 | 第40页 |
·卡那霉素对杉木愈伤组织不定芽分化的影响 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-42页 |
图版Ⅱ | 第42-43页 |
第四章 基因枪介导的阔叶树木质素合成关键酶 CAld5H 基因转化实验 | 第43-55页 |
1 材料与方法 | 第43-46页 |
·实验材料 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-46页 |
·外植体材料的制备及培养基 | 第44页 |
·质粒提取 | 第44-45页 |
·基因枪转化 | 第45-46页 |
·金粉悬液的制备 | 第45页 |
·DNA-微粒载体的制备 | 第45页 |
·基因枪的操作 | 第45-46页 |
·轰击参数的优化 | 第46页 |
·绿色荧光蛋白表达检测 | 第46页 |
·CAld5H 基因的转化 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-51页 |
·轰击距离对GFP 瞬间表达的影响 | 第46-47页 |
·金粉用量对GFP 基因瞬时表达的影响 | 第47-48页 |
·真空度对GFP 基因瞬时表达的影响 | 第48-49页 |
·质粒DNA 用量对GFP 瞬时表达的影响 | 第49页 |
·不同轰击次数、轰击距离组合GFP 基因瞬时表达的影响 | 第49-50页 |
·CAld5H 基因的转化结果 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
·轰击参数的优化 | 第51页 |
·CAld5H 基因的转化 | 第51-53页 |
图版Ⅲ | 第53-55页 |
第五章 主要结论及展望 | 第55-57页 |
1 主要结论 | 第55-56页 |
·组织培养再生体系的建立 | 第55页 |
·遗传转化体系的优化 | 第55页 |
·转 CAld5H 基因实验 | 第55-56页 |
2 展望 | 第56-57页 |
·进一步优化杉木遗传转化受体系统 | 第56页 |
·尝试农杆菌与基因枪结合的转化方法 | 第56页 |
·探索基因整合表达规律 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附表 缩略词表 | 第64-65页 |
详细摘要 | 第65-66页 |