| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-21页 |
| ·肝细胞生长因子 | 第13-16页 |
| ·HGF的临床应用 | 第13-15页 |
| ·HGF对肾损伤的修复作用 | 第15-16页 |
| ·脐带间质干细胞 | 第16-19页 |
| ·HucMSCs的分化潜能 | 第17-18页 |
| ·HucMSCs的临床应用 | 第18-19页 |
| ·基因修饰MSCs的临床应用前景 | 第19-21页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第21-26页 |
| ·研究目的 | 第21页 |
| ·研究方法 | 第21-22页 |
| ·实验设计方案 | 第22-25页 |
| ·体外实验 | 第22-24页 |
| ·体内实验 | 第24-25页 |
| ·研究意义 | 第25-26页 |
| 第三章 HGF腺病毒表达载体的构建 | 第26-33页 |
| ·材料及仪器 | 第26-27页 |
| ·材料试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·PCR引物设计 | 第27页 |
| ·TA克隆及测序 | 第27-28页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HGF的构建 | 第28页 |
| ·重组腺病毒质粒pAdGFP-HGF的构建及鉴定 | 第28页 |
| ·293A细胞的复苏和培养 | 第28-29页 |
| ·重组腺病毒AdHGF的转染包装及扩增 | 第29页 |
| ·重组腺病毒AdGFP和AdHGF滴度的测定 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-32页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HGF的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组腺病毒质粒pAdGFP-HGF的鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组腺病毒AdGFP-HGF转染293A细胞 | 第31页 |
| ·病毒滴度测定 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 腺病毒修饰后hucMSCs的生物学特性 | 第33-42页 |
| ·材料和试剂 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·HucMSCs的分离扩增 | 第34页 |
| ·重组腺病毒Ad-HGF感染hucMSCs | 第34-35页 |
| ·基因修饰的hucMSCs培养上清中HGF的检测 | 第35页 |
| ·成骨与成脂分化诱导 | 第35页 |
| ·生长曲线的测定 | 第35-36页 |
| ·细胞周期检测 | 第36页 |
| ·总RNA提取及逆转录反应 | 第36页 |
| ·干细胞相关基因和HGF的检测 | 第36页 |
| ·致瘤性分析 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-41页 |
| ·重组腺病毒AdGFP-HGF感染hucMSCs | 第37页 |
| ·HGF-hucMSCs培养上清中HGF水平 | 第37-38页 |
| ·成骨成脂分化诱导 | 第38页 |
| ·HucMSCs生长特性 | 第38-39页 |
| ·细胞周期 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 HGF修饰hucMSCs修复肾缺血再灌注损伤的研究 | 第42-57页 |
| ·材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·主要材料 | 第42-43页 |
| ·主要仪器、耗材 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| ·大鼠肾缺血再灌注模型建立 | 第43-44页 |
| ·血清学方法分析治疗后大鼠血清肌酐、尿素氮水平 | 第44-45页 |
| ·病理分析 | 第45页 |
| ·HGF-hucMSCs大鼠AKI模型体内定位实验 | 第45页 |
| ·HGF-hucMSCs修复大鼠肾缺血再灌注损伤机制研究 | 第45-46页 |
| ·TUNEL测凋亡 | 第46页 |
| ·Western blot | 第46页 |
| ·数据处理与统计 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-55页 |
| ·HGF-hucMSCs对于肾功能的修复 | 第47-49页 |
| ·HGF-hucMSCs对于肾结构的修复 | 第49-50页 |
| ·HucMSCs在AKI大鼠体内定位 | 第50-51页 |
| ·PCNA免疫组化 | 第51-52页 |
| ·caspase-3和IL-1β定量PCR结果 | 第52-53页 |
| ·TUNEL结果 | 第53-54页 |
| ·IL-1β western bolt结果 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 结论与展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 攻读硕士学位期间获奖及发表的学术论文 | 第66-67页 |
