| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-33页 |
| ·抗生素的研究历史及近况 | 第12-16页 |
| ·抗生素的研究简史和定义 | 第12-13页 |
| ·抗生素耐药性危机及其应对 | 第13-16页 |
| ·海洋放线菌 | 第16-24页 |
| ·放线菌概述 | 第16-17页 |
| ·海洋放线菌的发现和证实 | 第17-18页 |
| ·海洋放线菌的分布和种属 | 第18页 |
| ·海洋放线菌的生物活性天然产物 | 第18-21页 |
| ·海洋专性放线菌属Salinispora及其潜在药用天然产物 | 第21-24页 |
| ·非核糖体多肽(NRP) | 第24-27页 |
| ·多肽类天然产物 | 第24页 |
| ·非核糖体多肽及其多样性 | 第24-27页 |
| ·非核糖体多肽合酶(NRPS) | 第27-29页 |
| ·非核糖体多肽合酶的结构与功能 | 第27-28页 |
| ·非核糖体多肽合酶的类型和研究意义 | 第28-29页 |
| ·腺苷化酶超家族与NRPS氨基酸腺苷化结构域 | 第29-32页 |
| ·腺苷化酶超家族 | 第29页 |
| ·NRPS氨基酸腺苷化结构域(NRPS A domain) | 第29-32页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-50页 |
| ·实验材料与仪器 | 第33-37页 |
| ·菌株、质粒 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要试剂的配制 | 第33-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要分子生物学数据库和软件 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-50页 |
| ·基因的生物信息学分析 | 第37页 |
| ·Salinispora areniocola CNS-205基因组DNA的提取 | 第37页 |
| ·引物的设计、合成及目的基因的PCR扩增 | 第37-40页 |
| ·原核重组表达载体的构建及鉴定 | 第40-44页 |
| ·目的蛋白的诱导表达、纯化及Western blotting鉴定 | 第44-46页 |
| ·pGEX-2T-sare0718诱导表达融合蛋白(Sare0718-GST)的酶活性测定 | 第46-50页 |
| 第三章 结果与分析 | 第50-66页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| ·sare0357基因的生物信息学分析 | 第50页 |
| ·sare0718基因的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| ·目的基因的克隆 | 第52页 |
| ·原核重组表达载体的构建与鉴定 | 第52-55页 |
| ·sare0357基因pET重组子的构建与鉴定 | 第52-53页 |
| ·sare0718基因pET重组子的构建与鉴定 | 第53页 |
| ·sare0718基因pGEX-2T重组子的构建与鉴定 | 第53-55页 |
| ·目的蛋白的诱导表达、纯化及Western blotting鉴定 | 第55-61页 |
| ·pET重组质粒的诱导表达及其表达蛋白的纯化、Western blotting鉴定 | 第55-60页 |
| ·pGEX-2T重组质粒的诱导表达及其表达蛋白的纯化、Western blotting鉴定#49 | 第60-61页 |
| ·Sare0718-GST融合蛋白的酶活性分析 | 第61-66页 |
| ·Sare0718融合蛋白特异性底物的筛选 | 第61-62页 |
| ·基本酶动力学参数的测定 | 第62-66页 |
| 第四章 论文总结 | 第66-71页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·总结 | 第68-71页 |
| ·sare0357 | 第69页 |
| ·sare0718 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 在读期间发表论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
