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miR-19b调控胰腺祖细胞增殖及其机制研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 绪论第11-16页
    1.1 胰腺祖细胞的研究进展第11页
    1.2 miRNA的发生及功能概述第11-12页
    1.3 miR-17-92在干细胞发育和肿瘤发生中的研究进展第12-13页
    1.4 miR-19b的生物学功能第13页
    1.5 miR-17-92基因簇成员之间的拮抗作用第13-14页
    1.6 PI3K/AKT与ERK信号通路第14页
    1.7 Wnt与Hippo信号通路第14-15页
    1.8 本研究的目的和意义第15-16页
2 miR-19b促进胰腺祖细胞的增殖第16-27页
    2.1 实验材料第16-17页
        2.1.1 实验细胞第16页
        2.1.2 miRNAs第16页
        2.1.3 实验仪器和设备第16-17页
        2.1.4 实验试剂第17页
    2.2 实验方法第17-22页
        2.2.1 细胞的培养第17-18页
        2.2.2 细胞的转染第18页
        2.2.3 总RNA的提取和反转第18-20页
        2.2.4 QRT PCR第20-21页
        2.2.5 CCK8第21页
        2.2.6 Edu检测细胞增殖第21-22页
    2.3 实验结果第22-25页
        2.3.1 miR-19b在胰腺细胞中的差异表达第22-23页
        2.3.2 过表达miR-19b促进胰腺祖细胞的增殖第23-25页
    2.4 讨论第25-26页
    2.5 本章小结第26-27页
3 miR-19b靶基因的预测鉴定和相关信号通路第27-41页
    3.1 引言第27页
    3.2 实验材料第27-29页
        3.2.1 实验细胞第27页
        3.2.2 miRNAs第27页
        3.2.3 实验试剂第27-29页
    3.3 实验方法第29-33页
        3.3.1 双荧光素酶报告载体的构建第29-31页
        3.3.2 双荧光素酶报告系统的检测第31-32页
        3.3.3 细胞的培养第32页
        3.3.4 3T3细胞的转染第32页
        3.3.5 总RNA的提取和反转第32页
        3.3.6 Western blot第32-33页
    3.4 实验结果第33-39页
        3.4.1 用生物信息软件对miR-19b的靶基因进行预测第33-34页
        3.4.2 双荧光素酶报告载体检测miR-19b对于PTEN的靶向调控作用第34页
        3.4.3 过表达miR-19b对PTEN mRNA和蛋白水平的调控第34-35页
        3.4.4 过表达miR-19b对PI3K/AKT、ERK和STAT3信号通路的影响第35-37页
        3.4.5 过表达miR-19b对Wnt和Hippo信号通路的影响第37-39页
    3.5 讨论第39-40页
    3.6 本章小结第40-41页
4 miR-19b对miR-18a的拮抗作用第41-47页
    4.1 引言第41页
    4.2 实验材料第41页
        4.2.1 miRNAs第41页
        4.2.2 实验试剂第41页
    4.3 实验方法第41-42页
    4.4 实验结果第42-45页
        4.4.1 miR-19b拮抗miR-18a对胰腺祖细胞增殖的抑制作用第42-43页
        4.4.2 miR-19b拮抗miR-18a对其靶基因的靶向调控作用第43-45页
    4.5 讨论第45-46页
    4.6 本章小结第46-47页
结论第47-48页
参考文献第48-52页
攻读学位期间发表的学术论文第52-53页
致谢第53-54页

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