摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第11-16页 |
1.1 胰腺祖细胞的研究进展 | 第11页 |
1.2 miRNA的发生及功能概述 | 第11-12页 |
1.3 miR-17-92在干细胞发育和肿瘤发生中的研究进展 | 第12-13页 |
1.4 miR-19b的生物学功能 | 第13页 |
1.5 miR-17-92基因簇成员之间的拮抗作用 | 第13-14页 |
1.6 PI3K/AKT与ERK信号通路 | 第14页 |
1.7 Wnt与Hippo信号通路 | 第14-15页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
2 miR-19b促进胰腺祖细胞的增殖 | 第16-27页 |
2.1 实验材料 | 第16-17页 |
2.1.1 实验细胞 | 第16页 |
2.1.2 miRNAs | 第16页 |
2.1.3 实验仪器和设备 | 第16-17页 |
2.1.4 实验试剂 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-22页 |
2.2.1 细胞的培养 | 第17-18页 |
2.2.2 细胞的转染 | 第18页 |
2.2.3 总RNA的提取和反转 | 第18-20页 |
2.2.4 QRT PCR | 第20-21页 |
2.2.5 CCK8 | 第21页 |
2.2.6 Edu检测细胞增殖 | 第21-22页 |
2.3 实验结果 | 第22-25页 |
2.3.1 miR-19b在胰腺细胞中的差异表达 | 第22-23页 |
2.3.2 过表达miR-19b促进胰腺祖细胞的增殖 | 第23-25页 |
2.4 讨论 | 第25-26页 |
2.5 本章小结 | 第26-27页 |
3 miR-19b靶基因的预测鉴定和相关信号通路 | 第27-41页 |
3.1 引言 | 第27页 |
3.2 实验材料 | 第27-29页 |
3.2.1 实验细胞 | 第27页 |
3.2.2 miRNAs | 第27页 |
3.2.3 实验试剂 | 第27-29页 |
3.3 实验方法 | 第29-33页 |
3.3.1 双荧光素酶报告载体的构建 | 第29-31页 |
3.3.2 双荧光素酶报告系统的检测 | 第31-32页 |
3.3.3 细胞的培养 | 第32页 |
3.3.4 3T3细胞的转染 | 第32页 |
3.3.5 总RNA的提取和反转 | 第32页 |
3.3.6 Western blot | 第32-33页 |
3.4 实验结果 | 第33-39页 |
3.4.1 用生物信息软件对miR-19b的靶基因进行预测 | 第33-34页 |
3.4.2 双荧光素酶报告载体检测miR-19b对于PTEN的靶向调控作用 | 第34页 |
3.4.3 过表达miR-19b对PTEN mRNA和蛋白水平的调控 | 第34-35页 |
3.4.4 过表达miR-19b对PI3K/AKT、ERK和STAT3信号通路的影响 | 第35-37页 |
3.4.5 过表达miR-19b对Wnt和Hippo信号通路的影响 | 第37-39页 |
3.5 讨论 | 第39-40页 |
3.6 本章小结 | 第40-41页 |
4 miR-19b对miR-18a的拮抗作用 | 第41-47页 |
4.1 引言 | 第41页 |
4.2 实验材料 | 第41页 |
4.2.1 miRNAs | 第41页 |
4.2.2 实验试剂 | 第41页 |
4.3 实验方法 | 第41-42页 |
4.4 实验结果 | 第42-45页 |
4.4.1 miR-19b拮抗miR-18a对胰腺祖细胞增殖的抑制作用 | 第42-43页 |
4.4.2 miR-19b拮抗miR-18a对其靶基因的靶向调控作用 | 第43-45页 |
4.5 讨论 | 第45-46页 |
4.6 本章小结 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |