摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1 番茄斑萎病毒概况 | 第13-14页 |
1.1 番茄斑萎病毒基本特征 | 第13页 |
1.2 番茄斑萎病毒的危害 | 第13-14页 |
1.3 番茄斑萎病毒的发生及分布 | 第14页 |
2 重庆辣椒生产和病毒病害发生情况 | 第14-16页 |
2.1 重庆辣椒发展情况 | 第14-15页 |
2.2 重庆辣椒上的病害 | 第15-16页 |
3 作物对病毒抗性评测方法 | 第16-17页 |
3.1 指示植物检测法 | 第16页 |
3.2 血清学检测 | 第16-17页 |
3.3 分子生物学检测技术 | 第17页 |
4 实时荧光定量PCR技术 | 第17-19页 |
4.1 实时荧光定量PCR技术的原理 | 第17-18页 |
4.2 实时荧光定量PCR的方法 | 第18-19页 |
4.3 实时荧光定量PCR的特点 | 第19页 |
4.4 实时荧光定量PCR的应用 | 第19页 |
5 植物病毒的遗传变异 | 第19页 |
6 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
第二章 重庆主栽辣椒品种对TSWV的抗性评价 | 第21-31页 |
1 材料 | 第21页 |
1.1 不同品种的辣椒样品(由重庆农科院提供) | 第21页 |
1.2 毒源 | 第21页 |
1.3 实验试剂 | 第21页 |
1.4 常用实验仪器 | 第21页 |
2 方法 | 第21-24页 |
2.1 TSWV摩擦接种 | 第21-22页 |
2.2 斑点酶联免疫吸附测定法(Dot-ELISA)检测 | 第22页 |
2.3 辣椒总RNA的提取 | 第22-23页 |
2.4 RT-PCR检测 | 第23页 |
2.5 TSWV接种后不同症状观察 | 第23页 |
2.6 不同品种的抗性分析 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-28页 |
3.1 接种TSWV的不同品种辣椒的发病率检测 | 第24-25页 |
3.2 接种TSWV的不同品种辣椒病情指数的分析 | 第25-28页 |
4 讨论 | 第28-31页 |
第三章 TSWV在不同主栽辣椒品种中的积累量分析 | 第31-43页 |
1 材料 | 第31页 |
1.1 不同品种辣椒 | 第31页 |
1.2 实验试剂 | 第31页 |
1.3 常用实验仪器 | 第31页 |
2 方法 | 第31-35页 |
2.1 辣椒总RNA的提取 | 第31页 |
2.2 RT-PCR技术 | 第31-32页 |
2.3 PCR产物的纯化 | 第32页 |
2.4 分子克隆 | 第32页 |
2.5 序列的测定与分析 | 第32-33页 |
2.6 标准品的制备 | 第33-34页 |
2.7 RT-qPCR条件的优化和标准曲线的建立 | 第34-35页 |
2.8 RT-qPCR病毒积累量的检测 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-40页 |
3.1 RT-qPCR检测体系的建立及优化 | 第35-39页 |
3.2 TSWV病毒积累量的分析 | 第39-40页 |
3.3 不同辣椒品种不同时期TSWV的积累量 | 第40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
第四章 TSWV在不同主栽辣椒品种中的变异分析 | 第43-51页 |
1 材料 | 第43页 |
1.1 不同抗性的辣椒样品 | 第43页 |
1.2 实验试剂 | 第43页 |
1.3 常用实验仪器 | 第43页 |
2 方法 | 第43-44页 |
2.1 辣椒总RNA的提取 | 第43页 |
2.2 RT-PCR扩增 | 第43页 |
2.3 PCR产物的纯化 | 第43页 |
2.4 分子克隆 | 第43-44页 |
2.5 序列的测定与分析 | 第44页 |
3 结果与分析 | 第44-48页 |
3.1 艳椒417和艳椒11辣椒中TSWV的NSs基因片段的扩增 | 第44页 |
3.2 种群分析 | 第44-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
结论与展望 | 第51-53页 |
1 结论 | 第51页 |
2 展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附录 | 第59-63页 |
附录A 本论文所用病毒缩写及中英文对照 | 第59-60页 |
附录B 本论文中所用缩写词及中英文对照 | 第60-61页 |
附录C 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |