摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
前言 | 第10-13页 |
材料与方法 | 第13-36页 |
1 实验材料 | 第13-15页 |
1.1 仪器设备 | 第13-14页 |
1.2 试剂耗材 | 第14-15页 |
1.3 其他 | 第15页 |
2 实验方法 | 第15-34页 |
2.1 细胞培养及处理 | 第15-17页 |
2.2 大鼠原代胰岛的分离 | 第17-19页 |
2.3 质粒构建 | 第19-23页 |
2.4 GST融合蛋白沉降(GST-pull down)实验 | 第23-24页 |
2.5 RNA的提取及相对定量分析 | 第24-27页 |
2.6 蛋白提取及Western Blot检测分析 | 第27-32页 |
2.7 蛋白质免疫沉淀(Co-IP)实验 | 第32-33页 |
2.8 RNA干扰片段的合成和设计 | 第33页 |
2.9 细胞免疫荧光染色实验 | 第33-34页 |
2.10 细胞内荧光点计数 | 第34页 |
2.11 流式细胞术 | 第34页 |
3 数据处理及统计学 | 第34-36页 |
结果 | 第36-53页 |
1 通过GST-pull down发现RAGE的相互作用蛋白Rab31 | 第36-38页 |
2 验证Rab31是RAGE的相互作用蛋白 | 第38-43页 |
2.1 Rab31在胰岛β细胞中的表达和分布 | 第38-39页 |
2.2 Rab31在GS刺激后发生分布改变 | 第39-40页 |
2.3 免疫荧光实验观察RAGE与Rab31在细胞内存在共定位 | 第40-42页 |
2.4 Co-IP实验验证RAGE与Rab31相互结合 | 第42-43页 |
3 Rab31在配体介导的RAGE内化过程中发挥作用 | 第43-45页 |
4 GS刺激下Rab31的招募可能依赖于Akt信号通路的激活 | 第45-46页 |
5 Rab31对RAGE蛋白水平的影响 | 第46-48页 |
6 Rab31在GS诱导胰岛β细胞凋亡的过程中发挥作用 | 第48-50页 |
7 Rab31参与AGEs介导的胰岛β细胞线粒体途径的内源性凋亡 | 第50-52页 |
8 GK大鼠胰岛中Rab31与RAGE蛋白水平呈负相关 | 第52-53页 |
讨论 | 第53-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
综述 RAGE相互作用蛋白的研究进展 | 第62-71页 |
参考文献 | 第67-71页 |
附录 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |