摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
英文缩略词 | 第12-17页 |
前言 | 第17-23页 |
第一章 PTBP1在结肠癌组织芯片中的表达 | 第23-29页 |
1.1 实验材料 | 第23-24页 |
1.1.1 试剂 | 第23页 |
1.1.2 组织标本 | 第23-24页 |
1.2 实验方法 | 第24-25页 |
1.2.1 组织芯片制作 | 第24页 |
1.2.2 Envision二部法免疫组化染色 | 第24-25页 |
1.2.3 判断染色结果 | 第25页 |
1.2.4 统计方法 | 第25页 |
1.3 结果 | 第25-27页 |
1.3.1 标本临床信息 | 第25页 |
1.3.2 PTBP1在结肠癌组织和癌旁组织中的表达 | 第25-27页 |
1.3.3 PTBP1与临床分期 | 第27页 |
1.4 讨论 | 第27-29页 |
第二章 PTBP1基因对结肠癌细胞生物学行为的影响 | 第29-49页 |
2.1 材料 | 第29-31页 |
2.1.1 试剂 | 第29-30页 |
2.1.2 siRNA与抗体 | 第30页 |
2.1.3 实验仪器设备 | 第30-31页 |
2.1.4 实验耗材 | 第31页 |
2.2 试验方法 | 第31-38页 |
2.2.1 细胞培养 | 第31-32页 |
2.2.2 Real-time PCR法检测PTBP1 m RNA的表达 | 第32-34页 |
2.2.3 细胞转染(均用6孔板接种细胞转染) | 第34页 |
2.2.4 细胞活力检测 | 第34-35页 |
2.2.5 细胞周期检测 | 第35页 |
2.2.6 细胞凋亡检测 | 第35-36页 |
2.2.7 Hoechst染核检测凋亡 | 第36页 |
2.2.8 细胞形态学观察 | 第36页 |
2.2.9 EdU实验 | 第36-37页 |
2.2.10 生物信息处理软件 | 第37-38页 |
2.3 实验结果 | 第38-46页 |
2.3.1 PTBP1 m RNA在结肠正常细胞及肿瘤细胞中的表达 | 第38-39页 |
2.3.2 PTBP1蛋白在结肠正常细胞及肿瘤细胞中的表达 | 第39-40页 |
2.3.3 沉默PTBP1基因抑制结肠癌HCT116和SW480细胞生长 | 第40-41页 |
2.3.4 沉默PTBP1基因可抑制HCT116细胞的增殖 | 第41-42页 |
2.3.5 沉默PTBP1基因表达可诱导结肠癌HCT116和SW480细胞周期阻滞 | 第42-43页 |
2.3.6 沉默PTBP1基因表达可诱导结肠癌HCT116和SW480细胞凋亡 | 第43-45页 |
2.3.7 沉默PTBP1基因表达可增加结肠癌HCT116细胞对肿瘤药物的敏感性 | 第45-46页 |
2.4 讨论 | 第46-49页 |
第三章 PTBP1在结肠癌中生物学功能的机制研究 | 第49-59页 |
3.1 材料 | 第49-50页 |
3.1.1 试剂 | 第49-50页 |
3.1.2 抗体、质粒与si RNA | 第50页 |
3.1.3 实验仪器设备 | 第50页 |
3.1.4 实验耗材 | 第50页 |
3.2 试验方法 | 第50-54页 |
3.2.1 细胞培养 | 第50-51页 |
3.2.2 细胞转染(均用6孔板接种细胞转染) | 第51-52页 |
3.2.3 免疫印迹(Western blot) | 第52-53页 |
3.2.4 生物信息处理软件 | 第53-54页 |
3.3 结果 | 第54-56页 |
3.3.1 沉默PTBP1后结肠癌HCT116细胞增殖相关蛋白的改变 | 第54页 |
3.3.2 沉默PTBP1后结肠癌HCT116细胞周期相关蛋白的改变 | 第54-55页 |
3.3.3 沉默PTBP1后结肠癌HCT116细胞凋亡关蛋白的改变 | 第55-56页 |
3.4 讨论 | 第56-59页 |
结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
在学期间的研究成果 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |