| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 胰腺祖细胞的研究进展 | 第9页 |
| 1.2 miRNA简介 | 第9-10页 |
| 1.3 miR-17-92在癌症细胞中的生物学功能研究 | 第10-12页 |
| 1.4 miR-18在癌症中的生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.5 miR-17-92调控祖细胞增殖 | 第13-14页 |
| 1.6 PI3K/AKT信号通路 | 第14页 |
| 1.7 ERK信号通路 | 第14-15页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 miR-18a抑制胰腺祖细胞的增殖 | 第16-22页 |
| 2.1 材料与方法 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第16页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第16页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-20页 |
| 2.2.1 总RNA的提取和反转录 | 第17-19页 |
| 2.2.2 RT-PCR | 第19页 |
| 2.2.3 CCK8检测细胞增殖 | 第19-20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20-21页 |
| 2.3.1 miR-18a在胰腺细胞中的表达情况 | 第20页 |
| 2.3.2 过表达miR-18a抑制胰腺祖细胞的增殖 | 第20-21页 |
| 2.4 讨论 | 第21页 |
| 2.5 本章小结 | 第21-22页 |
| 3 miR-18a靶基因预测和鉴定 | 第22-44页 |
| 3.1 引言 | 第22页 |
| 3.2 材料与方法 | 第22-23页 |
| 3.2.1 试剂配制和分装 | 第22-23页 |
| 3.3 实验方法 | 第23-30页 |
| 3.3.1 双荧光素酶载体的构建 | 第23-26页 |
| 3.3.2 双荧光素酶报告载体的转染 | 第26-28页 |
| 3.3.3 双荧光素酶的检测 | 第28页 |
| 3.3.4 细胞总RNA的提取和反转录 | 第28页 |
| 3.3.5 miRNA和siRNA的序列 | 第28-29页 |
| 3.3.6 Western blot | 第29-30页 |
| 3.4 实验结果 | 第30-41页 |
| 3.4.1 生物信息软件预测和miR-18a的靶基因 | 第30页 |
| 3.4.2 双荧光素酶载体的构建 | 第30-31页 |
| 3.4.3 通过双荧光素酶报告系统检测miR-18a对于CTGF、CDK19、NEDD9和IGF1的调控作用 | 第31-33页 |
| 3.4.4 miR-18a对CTGF、CDK19、NEDD9和IGF1 mRNA和蛋白水平的调控 | 第33-34页 |
| 3.4.5 干涉CTGF、CDK19、NEDD9和IGF1后对胰腺组细胞增殖的影响 | 第34-39页 |
| 3.4.6 过表达miR-18a对PI3K/AKT和ERK信号通路的调控 | 第39-40页 |
| 3.4.7 干涉CTGF、CDK19、NEDD9和IGF1对PI3K/AKT和ERK信号通路的影响 | 第40-41页 |
| 3.5 讨论 | 第41-43页 |
| 3.6 本章小结 | 第43-44页 |
| 4 miR-18a抑制胰腺癌细胞系BXPC3细胞的增殖 | 第44-51页 |
| 4.1 实验材料方法 | 第44页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.1.2 siRNA和引物序列 | 第44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-49页 |
| 4.3.1 胰腺癌细胞系BXPC3中过表达miR-18a对NEDD9的调控 | 第44-45页 |
| 4.3.2 过表达miR-18a和干涉NEDD9对BXPC3细胞增殖的影响 | 第45-48页 |
| 4.3.3 过表达miR-18a和干涉NEDD9对PANC-1细胞增殖的影响 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-50页 |
| 4.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
