中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第11-14页 |
第一部分 胃癌相关miRNA的筛选与鉴定 | 第14-24页 |
1 材料 | 第14-15页 |
2 方法 | 第15-20页 |
2.1 组织总RNA的提取及鉴定 | 第15-16页 |
2.2 琼脂糖凝胶电泳检测RNA的质量 | 第16页 |
2.3 miRNA芯片标记、杂交和芯片扫描分析 | 第16-19页 |
2.4 Real-time RT-PCR对芯片分析中部分差异表达的miRNA的表达水平进行验证 | 第19-20页 |
2.5 数据分析 | 第20页 |
3 结果 | 第20-22页 |
3.1 芯片检测胃癌组织中差异表达的miRNA | 第20-22页 |
3.2 Real-time RT-PCR验证芯片结果中部分差异表达的miRNA | 第22页 |
4 讨论 | 第22-24页 |
第二部分miR-520d-5p在胃癌细胞系中的功能研究 | 第24-50页 |
1 材料 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-37页 |
2.1 细胞培养 | 第25-26页 |
2.2 细胞瞬时转染 | 第26-27页 |
2.3 Real-time RT-PCR(Taqman)验证miR-520d-5p在转染后的胃癌细胞中的表达量 | 第27-29页 |
2.4 WST-1 实验检测细胞增殖能力 | 第29-31页 |
2.5 细胞克隆形成实验 | 第31页 |
2.6 采用流式细胞术(PI染色法)检测细胞周期 | 第31-32页 |
2.7 transwell侵袭实验 | 第32-35页 |
2.8 transwell迁移实验 | 第35-37页 |
2.9 划痕实验 | 第37页 |
2.10 据统计与处理 | 第37页 |
3 结果 | 第37-48页 |
3.1 Real-time RT-PCR检测AGS和HGC-27 细胞中miR-520d-5p的表达 | 第37-38页 |
3.2 WST-1 细胞增殖实验结果 | 第38-40页 |
3.3 细胞克隆形成实验结果 | 第40-41页 |
3.4 降低miR-520d-5p的表达水平,对AGS和HGC-27 细胞周期的影响 | 第41-43页 |
3.5 tranwell侵袭实验 | 第43-45页 |
3.6 tranwell迁移实验 | 第45-47页 |
3.7 划痕实验结果 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
全文总结 | 第50-51页 |
本研究的主要创新点 | 第51-52页 |
References | 第52-58页 |
附录一硕士期间发表的论文 | 第58-59页 |
附录二 缩写词及中英文对照表 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |