中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略语表 | 第11-12页 |
一、引言 | 第12-14页 |
二、实验材料与方法 | 第14-28页 |
2.1 实验材料 | 第14-15页 |
2.1.1 实验样本 | 第14页 |
2.1.2 主要药品与试剂 | 第14-15页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第15-28页 |
2.2.1 组织总RNA的提取 | 第15-16页 |
2.2.2 组织RNA逆转录主要步骤 | 第16-17页 |
2.2.3 组织RNA的qRT-PCR扩增和表达检测 | 第17-18页 |
2.2.4 食管癌组织DNA的提取 | 第18页 |
2.2.5 DNA甲基化修饰试剂盒处理组织DNA | 第18-19页 |
2.2.6 亚硫酸氢盐法处理组织基因组DNA | 第19-20页 |
2.2.7 DNA产物纯化实验 | 第20页 |
2.2.8 甲基化特异性PCR | 第20-21页 |
2.2.9 TBE电泳缓冲液的配制 | 第21页 |
2.2.10 核酸电泳实验 | 第21-22页 |
2.2.11 食管癌KYSE-70细胞的复苏与冻存 | 第22-23页 |
2.2.12 体外培养食管癌KYSE-70细胞以及细胞的处理 | 第23页 |
2.2.13 食管癌KYSE-70细胞RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.14 食管癌KYSE-70细胞RNA的逆转录和qRT-PCR扩增 | 第24-26页 |
2.2.15 CCK8法检测细胞的增殖活性 | 第26-27页 |
2.2.16 Annexin V/FITC法细胞凋亡检测 | 第27页 |
2.2.17 统计学方法 | 第27-28页 |
三、实验结果 | 第28-35页 |
3.1 G_0S_2基因在食管癌组织和食管癌旁组织中的表达变化 | 第28-29页 |
3.2 G_0S_2基因在食管癌组织和食管癌旁组织中甲基化检测 | 第29页 |
3.3 腺病毒转染后的验证 | 第29-30页 |
3.4 甲基化抑制剂处理后癌细胞G_0S_2mRNA表达量变化 | 第30-31页 |
3.5 G_0S_2对食管癌KYSE-70细胞增殖的作用 | 第31页 |
3.6 5-氮杂-2-脱氧胞苷对食管癌KYSE-70细胞增殖的作用 | 第31-32页 |
3.7 G_0S_2对食管癌KYSE-70细胞凋亡的作用 | 第32-33页 |
3.8 5-氮杂-2-脱氧胞苷对食管癌KYSE-70细胞凋亡的影响 | 第33-35页 |
四、讨论 | 第35-37页 |
五、小结 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
六、文献综述 | 第42-53页 |
参考文献 | 第49-53页 |
七、论文发表情况 | 第53-54页 |
八、致谢词 | 第54页 |