| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1.引言 | 第10-17页 |
| 1.1 猪流行性腹泻概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 病原学 | 第10页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第10页 |
| 1.1.3 致病机理 | 第10-11页 |
| 1.1.4 临床症状 | 第11页 |
| 1.1.5 病理变化 | 第11页 |
| 1.1.6 诊断 | 第11页 |
| 1.1.7 免疫机制 | 第11页 |
| 1.2 单域抗体 | 第11-12页 |
| 1.2.1 单域抗体结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 单域抗体的生物学特性 | 第12页 |
| 1.3 噬菌体展示技术研究现状和发展趋势 | 第12-15页 |
| 1.3.1 噬菌体展示技术 | 第12-13页 |
| 1.3.2 噬菌体抗体库 | 第13-14页 |
| 1.3.3 噬菌体抗体库技术的优势及应用 | 第14-15页 |
| 1.4 噬菌体展示技术展望 | 第15页 |
| 1.5 研究目的、意义及内容 | 第15-17页 |
| 1.5.1 研究目的、意义 | 第15-16页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 2 试验一PEDV S蛋白特异性单域抗体的富集与筛选 | 第17-27页 |
| 2.1 试验材料及试剂 | 第17-20页 |
| 2.1.1 试验试剂 | 第17页 |
| 2.1.2 主要培养基及缓冲液配制方法 | 第17-19页 |
| 2.1.3 试验仪器和设备 | 第19-20页 |
| 2.2 试验内容和方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 PEDV S蛋白特异性单域抗体的富集和筛选 | 第20-22页 |
| 2.2.2 提取PEDV单域抗体阳性克隆质粒 | 第22页 |
| 2.2.3 质粒的基因序列测定及序列分析 | 第22-23页 |
| 2.3 结果 | 第23-25页 |
| 2.3.1 PEDV S蛋白特异性噬菌体抗体库的富集和筛选结果 | 第23页 |
| 2.3.2 重组噬菌体单域抗体ELISA鉴定结果 | 第23-24页 |
| 2.3.3 PEDV S蛋白特异性单域抗体VHH序列分析 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-26页 |
| 2.5 小结 | 第26-27页 |
| 3 试验二PEDV特异性单域抗体的诱导表达、纯化及鉴定 | 第27-39页 |
| 3.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 3.1.1 PEDV病毒与Vero细胞 | 第27页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 主要培养基及缓冲液 | 第27-28页 |
| 3.1.4 引物 | 第28页 |
| 3.2 试验内容和方法 | 第28-32页 |
| 3.2.1 表达质粒的构建 | 第28-30页 |
| 3.2.2 重组VHH-p ET-28a蛋白的表达及纯化 | 第30页 |
| 3.2.3 表达、纯化的PEDV特异性单域抗体鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.4 PEDV特异性单域抗体抗原结合特性鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 结果 | 第32-37页 |
| 3.3.1 S7克隆质粒和p ET-28a载体酶切结果 | 第32-33页 |
| 3.3.2 VHH-p ET-28a重组菌落PCR鉴定结果 | 第33页 |
| 3.3.3 VHH-p ET-28a重组质粒双酶切鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE鉴定结果 | 第34页 |
| 3.3.5 Western-Blot鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.3.6 ELISA鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3.3.7 Vero细胞免疫荧光试验结果 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 3.5 小结 | 第38-39页 |
| 4 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
