| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一部分 理论研究 | 第14-27页 |
| 第一章 中医“肾脑相关”关系研究 | 第14-17页 |
| 第二章 山茱萸活性部位、成份研究 | 第17-22页 |
| 第三章 海马神经元损伤与脑功能障碍和疾病的关系 | 第22-27页 |
| 第二部分 实验研究 | 第27-73页 |
| 第一章 前期研究 | 第27-32页 |
| 第二章 山茱萸活性成分——五羟甲基糠醛(5-HMF)对H_2O_2诱导损伤的大鼠海马神经细胞的保护作用及机制研究 | 第32-73页 |
| 实验一 家兔脑脊液中5-羟甲基糠醛的HPLC和UPLC—MS的检测分标 | 第32-38页 |
| 1. 仪器与材料 | 第32页 |
| 1.1 仪器、药品与试剂 | 第32页 |
| 1.2 实验动物 | 第32页 |
| 2. 实验方法 | 第32-33页 |
| 2.1 药液的制备与分组 | 第32页 |
| 2.2 家兔灌胃与脑脊液制备 | 第32-33页 |
| 2.3 HPLC | 第33页 |
| 2.4 UPLC-MS | 第33页 |
| 3. 实验结果 | 第33-36页 |
| 4. 讨论 | 第36-38页 |
| 实验二 山茱萸中五羟甲基糠醛(5-HMF)的分离提取 | 第38-40页 |
| 1. 药材购置、炮制加工 | 第38页 |
| 2. 山茱萸中分离提取五羟甲基糠醛(5-HMF) | 第38-40页 |
| 实验三 大鼠海马神经细胞原代培养 | 第40-42页 |
| 1. 材料 | 第40页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第40页 |
| 1.2 仪器 | 第40页 |
| 1.3 实验动物 | 第40页 |
| 2. 大鼠海马神经细胞原代培养 | 第40-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-42页 |
| 实验四 五羟甲基糠醛(5-HMF)对H_2O_2诱导损伤的大鼠海马神经细胞的形态学观察和细胞活力检测 | 第42-48页 |
| 1. 材料 | 第42页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第42页 |
| 1.2 仪器 | 第42页 |
| 1.3 药材 | 第42页 |
| 1.4 实验动物 | 第42页 |
| 2. 实验方法 | 第42-44页 |
| 2.1 药液的制备与分组 | 第42-43页 |
| 2.2 大鼠海马神经细胞原代培养 | 第43页 |
| 2.3 透射电镜观察 | 第43页 |
| 2.4 MTT实验 | 第43-44页 |
| 2.5 统计学方法 | 第44页 |
| 3. 实验结果 | 第44-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-48页 |
| 实验五 五羟甲基糠醛(5-HMF)对H_2O_2诱导损伤的大鼠海马神经细胞的抗氧化能力和抗凋亡能力的研究 | 第48-54页 |
| 1. 材料 | 第48页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第48页 |
| 1.2 药材 | 第48页 |
| 1.3 仪器 | 第48页 |
| 1.4 实验动物 | 第48页 |
| 2. 方法与结果 | 第48-50页 |
| 2.1 药液的制备与分组 | 第48-49页 |
| 2.2 大鼠海马神经细胞原代培养 | 第49页 |
| 2.3 LDH、SOD检测 | 第49-50页 |
| 2.4 流式细胞仪检测 | 第50页 |
| 2.5 统计学方法 | 第50页 |
| 3. 实验结果 | 第50-51页 |
| 3.1 LDH、SOD检测结果 | 第50页 |
| 3.2 流式细胞仪检测结果 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-54页 |
| 实验六 五羟甲基糠醛(5-HMF)对H_2O_2诱导损伤的大鼠海马神经细胞凋亡相关基因p53、bcl-2、Bax和caspase-3表达水平的研究 | 第54-73页 |
| 1. 仪器与材料 | 第54-55页 |
| 1.1 仪器、药品与试剂 | 第54页 |
| 1.2 实验药材 | 第54-55页 |
| 1.3 实验动物 | 第55页 |
| 2. 实验方法 | 第55-66页 |
| 2.1 药液的制备与分组 | 第55页 |
| 2.2 大鼠海马神经细胞原代培养 | 第55页 |
| 2.3 Real time-PCR对bcl-2、p53、Bax和caspase-3 mRNA表达水平的检测 | 第55-65页 |
| 2.4 Western blot对bcl-2、p53、Bax和caspase-3蛋白表达水平的检测 | 第65-66页 |
| 2.4.1 蛋白样本提取制备 | 第65-66页 |
| 2.4.2 Western Blot | 第66页 |
| 3. 实验结果 | 第66-68页 |
| 3.1 Real time-PCR实验结果 | 第66-67页 |
| 3.2 Western Blot实验结果 | 第67-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-73页 |
| 全文小结与创新点 | 第73-80页 |
| 1. 家兔脑脊液中5-羟甲基糠醛的HPLC和UPLC—MS的检测分析 | 第73-74页 |
| 2. 五羟甲基糠醛(5-HMF)对H_2O_2诱导损伤的大鼠海马神经细胞的形态学观察和细胞活力检测 | 第74页 |
| 3. 五羟甲基糠醛(5-HMF)对H_2O_2诱导损伤的大鼠海马神经细胞的抗氧化能力和抗凋亡能力的研究 | 第74-78页 |
| 4. 五羟甲基糠醛(5-HMF)对H_2O_2诱导损伤的大鼠海马神经细胞凋亡相关基因p53、bcl-2、Bax和caspase-3表达水平的研究 | 第78-79页 |
| 创新点 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 附录 | 第85-99页 |
| 附录一 名词对照及缩略语 | 第85-88页 |
| 附录二 β-actin、p53、bcl-2、Bax和caspase-3各基因引物与基因序列 | 第88-99页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简历 | 第101页 |
