| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 引言 | 第11-22页 |
| 1.1 肝纤维化概述 | 第11-12页 |
| 1.2 肝星状细胞在肝纤维化过程中的反应及机制 | 第12-18页 |
| 1.2.1 起始阶段 | 第13页 |
| 1.2.2 永生阶段 | 第13-16页 |
| 1.2.3 逆转阶段 | 第16-18页 |
| 1.3 肝纤维化的蛋白质组学研究 | 第18-20页 |
| 1.3.1 组织水平差异蛋白质组学研究 | 第19页 |
| 1.3.2 血浆/血清水平差异蛋白质组学研究 | 第19-20页 |
| 1.3.3 细胞水平差异蛋白质组学研究 | 第20页 |
| 1.4 研究目的及内容 | 第20-22页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第22-33页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.1 细胞培养材料和试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 细胞检测材料和试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 样品制备材料和试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 免疫印记材料和试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 原代分离 HSCs 材料和试剂 | 第23页 |
| 2.1.6 临床血清收集 | 第23-24页 |
| 2.1.7 抗体 | 第24页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.3 方法 | 第25-33页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第25-26页 |
| 2.3.2 油红染色 | 第26页 |
| 2.3.3 细胞周期检测 | 第26页 |
| 2.3.4 细胞增殖检测 | 第26页 |
| 2.3.5 细胞凋亡检测 | 第26-27页 |
| 2.3.6 蛋白提取 | 第27页 |
| 2.3.7 SDS-PAGE 分离 | 第27页 |
| 2.3.8 肽段提取 | 第27-28页 |
| 2.3.9 LTQ-FT 鉴定 | 第28页 |
| 2.3.10 MaxQuant 软件定量蛋白 | 第28-29页 |
| 2.3.11 生物信息学分析定量蛋白 | 第29页 |
| 2.3.12 Western Bloting 检测 | 第29页 |
| 2.3.13 免疫组化 | 第29-30页 |
| 2.3.14 原代分离 HSCs | 第30-31页 |
| 2.3.15 细胞免疫荧光 | 第31页 |
| 2.3.16 细胞转染 | 第31页 |
| 2.3.17 总 RNA 提取 | 第31-32页 |
| 2.3.18 qRT-PCR | 第32页 |
| 2.3.19 细胞迁移 | 第32页 |
| 2.3.20 统计分析 | 第32-33页 |
| 第3章 活化 HSC 恢复期模型建立和 SILAC 实验评估 | 第33-44页 |
| 3.1 活化 HSC 恢复期模型建立 | 第33-38页 |
| 3.1.1 形态学观察 | 第34-35页 |
| 3.1.2 细胞增殖检测 | 第35页 |
| 3.1.3 HSCs 活化的标志分子验证 | 第35-36页 |
| 3.1.4 细胞凋亡检测 | 第36-38页 |
| 3.2 SILAC 技术评估 | 第38-40页 |
| 3.2.1 肽段标记效率分析 | 第39页 |
| 3.2.2 蛋白标记效率分析 | 第39-40页 |
| 3.3 讨论 | 第40-43页 |
| 3.4 小结 | 第43-44页 |
| 第4章 肝星状细胞恢复期和活化期差异蛋白质组研究 | 第44-65页 |
| 4.1 前言 | 第44-45页 |
| 4.2 结果 | 第45-59页 |
| 4.2.1 LTQ-FT 蛋白质的鉴定和 MaxQuant 软件定量 | 第45-47页 |
| 4.2.2 细胞蛋白质组差异表达谱构建 | 第47-49页 |
| 4.2.3 数据分析 | 第49-53页 |
| 4.2.4 差异蛋白 Western blotting 验证 | 第53-55页 |
| 4.2.5 STAT1 功能验证 | 第55-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-63页 |
| 4.4 小结 | 第63-65页 |
| 第5章 肝星状细胞恢复期和活化期分泌蛋白质组研究 | 第65-79页 |
| 5.1 前言 | 第65-66页 |
| 5.2 结果 | 第66-74页 |
| 5.2.1 LTQ-FT 蛋白质的鉴定和 MaxQuant 软件定量 | 第67-68页 |
| 5.2.2 分泌蛋白质组差异表达谱构建 | 第68-69页 |
| 5.2.3 差异蛋白数据挖掘 | 第69-70页 |
| 5.2.4 差异蛋白 Western blotting 验证 | 第70-74页 |
| 5.3 讨论 | 第74-76页 |
| 5.4 小结 | 第76-79页 |
| 第6章 结论与展望 | 第79-84页 |
| 参考文献 | 第84-95页 |
| 附录 | 第95-127页 |
| 致谢 | 第127-129页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第129页 |
