| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 图题索引 | 第13-15页 |
| 缩略词 | 第15-17页 |
| 目录 | 第17-20页 |
| 绪论 | 第20-23页 |
| 第一章 Decorin 抑制视网膜色素上皮细胞低氧条件下 VEGF 分泌的研究 | 第23-42页 |
| 1.1 前言 | 第23-25页 |
| 1.2 材料与方法 | 第25-33页 |
| 1.2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 1.2.2 ARPE-19 细胞培养和低氧模型 | 第27页 |
| 1.2.3 CCK-8 检测不同浓度 decorin 对细胞活力的影响 | 第27页 |
| 1.2.4 ELISA 法检测 decorin 抑制 ARPE-19 细胞低氧条件下分泌 VEGF 的作用 | 第27-28页 |
| 1.2.5 荧光定量 PCR 检测 decorin 对 ARPE-19 细胞低氧条件下 Met、Rac1、HIF-1α和VEGF mRNA表达的影响 | 第28-30页 |
| 1.2.6 Western blot 检测 decorin 对 ARPE-19 细胞低氧条件下 Met、Rac1 和 HIF-1α蛋白表达的影响 | 第30-31页 |
| 1.2.7 敲除 ARPE-19 细胞的 Met 基因及验证 | 第31-32页 |
| 1.2.8 ARPE-19 细胞转染 Met siRNA 后在低氧条件下 Rac1、HIF-1α和 VEGF 的表达变化 | 第32页 |
| 1.2.9 统计学分析 | 第32-33页 |
| 1.3 结果 | 第33-40页 |
| 1.3.1 不同浓度 decorin 对 ARPE-19 细胞活力的影响 | 第33页 |
| 1.3.2 不同浓度 decorin 对 ARPE-19 细胞低氧条件下过量分泌 VEGF 的影响 | 第33-34页 |
| 1.3.3 Decorin 抑制 ARPE-19 细胞低氧条件下 Met、Rac1、HIF-1α和 VEGF 的高表达 | 第34-36页 |
| 1.3.4 Met siRNA 抑制 ARPE-19 细胞低氧条件下 Met、Rac1、HIF-1α和 VEGF 的表达 | 第36-40页 |
| 1.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第二章 视网膜色素上皮细胞 decorin 过表达抑制脉络膜新生血管形成的体外研究 | 第42-63页 |
| 2.1 前言 | 第42-44页 |
| 2.2 材料与方法 | 第44-54页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 2.2.2 构建含 decorin 开框区序列的慢病毒质粒 pGMLV-PA5 | 第45-48页 |
| 2.2.3 慢病毒的包装和浓缩 | 第48-52页 |
| 2.2.4 携 decorin 基因的慢病毒载体转染 ARPE-19 细胞的验证 | 第52页 |
| 2.2.5 ARPE-19 细胞 decorin 过表达对低氧环境下 VEGF 分泌的影响 | 第52页 |
| 2.2.6 ARPE-19 细胞与 RF/6A 细胞共培养 | 第52-53页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第53-54页 |
| 2.3 结果 | 第54-61页 |
| 2.3.1 成功构建含 decorin 开框区的慢病毒质粒 pGMLV-PA5 | 第54-55页 |
| 2.3.2 ARPE-19 细胞转染携 decorin 基因慢病毒载体的验证 | 第55-56页 |
| 2.3.3 低氧环境下 ARPE-19 细胞 decorin 过表达对 VEGF 分泌的影响 | 第56页 |
| 2.3.4 低氧条件下 ARPE-19 细胞过表达 decorin 抑制共培养 RF/6A 细胞的血管生成能力 | 第56-61页 |
| 2.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第三章 自身互补型腺相关病毒携载 decorin 抑制 C57 小鼠视网膜新生血管的实验研究 | 第63-85页 |
| 3.1 前言 | 第63-66页 |
| 3.2 材料与方法 | 第66-75页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 3.2.2 原代培养大鼠神经胶质细胞 | 第67-68页 |
| 3.2.3 构建含 decorin 开框区序列的自身互补型腺相关病毒质粒scAAV-CMV-decorin | 第68-71页 |
| 3.2.4 自身互补型腺相关病毒质粒转染大鼠神经胶质细胞的验证及病毒包装 | 第71-72页 |
| 3.2.5 小鼠氧诱导视网膜病变模型建立及玻璃体腔注射 | 第72页 |
| 3.2.6 视网膜铺片染色 | 第72-73页 |
| 3.2.7 荧光定量 PCR 检测 | 第73-74页 |
| 3.2.8 Western blot 检测 | 第74页 |
| 3.2.9 ELISA 检测 | 第74页 |
| 3.2.10 统计学分析 | 第74-75页 |
| 3.3 结果 | 第75-82页 |
| 3.3.1 大鼠神经胶质细胞的培养和鉴定 | 第75页 |
| 3.3.2 scAAV-CMV-Decorin 病毒质粒的构建及验证 | 第75-78页 |
| 3.3.3 scAAV-CMV-decorin 质粒转染大鼠神经胶质细胞的验证 | 第78-79页 |
| 3.3.4 玻璃体腔注射 scAAV-CMV-decorin 病毒抑制 OIR 小鼠视网膜新生血管的生成 | 第79-80页 |
| 3.3.5 玻璃体腔注射 scAAV-CMV-decorin 病毒抑制 OIR 小鼠视网膜 HIF-1α和 VEGF的表达 | 第80-82页 |
| 3.4 讨论 | 第82-85页 |
| 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-99页 |
| 致谢 | 第99-101页 |
| 学术论文和科研成果目录 | 第101页 |
