摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1.1 生长因子在骨修复中的研究进展 | 第9-13页 |
1.1.1 骨修复中常见的生长因子及其应用 | 第9-11页 |
1.1.2 BMP在骨修复中的应用 | 第11-13页 |
1.1.2.1 BMP在骨修复中的意义 | 第11-12页 |
1.1.2.2 BMP的结构与诱导成骨机制 | 第12-13页 |
1.1.2.3 BMP应用中存在的问题 | 第13页 |
1.2 骨修复投递生长因子支架材料 | 第13-19页 |
1.2.1 常见的骨修复材料 | 第14-17页 |
1.2.1.1 金属骨修复材料 | 第14页 |
1.2.1.2 无机非金属骨修复材料 | 第14-15页 |
1.2.1.3 高分子骨修复材料 | 第15-17页 |
1.2.1.4 复合骨修复材料 | 第17页 |
1.2.2 聚乳酸支架投递生长因子 | 第17-19页 |
1.2.2.1 聚乳酸支架材料的应用及意义 | 第17-18页 |
1.2.2.2 生长因子聚乳酸投递生长因子存在的问题 | 第18-19页 |
1.3 单蛋白纳米微囊技术 | 第19-20页 |
1.4 本课题的提出 | 第20-22页 |
第二章 辐照消毒对蛋白活性影响 | 第22-34页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验部分 | 第22-26页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第22-23页 |
2.2.2 实验过程 | 第23-26页 |
2.2.2.1 伽马射线对蛋白辐照 | 第23页 |
2.2.2.2 细胞实验测辐照前后蛋白活性 | 第23-24页 |
2.2.2.3 辐照前后蛋白结构测试 | 第24-25页 |
2.2.2.4 动物实验测辐照前后蛋白活性 | 第25-26页 |
2.3 结果与讨论 | 第26-32页 |
2.3.1 细胞实验测伽马射线辐照对BMP-2 活性的影响 | 第26-28页 |
2.3.1.1 PCR测ALP表达量 | 第26-27页 |
2.3.1.2 ALP钙钴法染色结果 | 第27-28页 |
2.3.2 辐照前后蛋白结构分析 | 第28-31页 |
2.3.2.1 琼脂糖凝胶电泳测BSA一级结构 | 第29页 |
2.3.2.2 MALDI TOF测BMP一级结构 | 第29-30页 |
2.3.2.3 BCA法测BSA一级结构 | 第30-31页 |
2.3.3 动物实验测伽马射线辐照对BMP-2 活性的影响 | 第31-32页 |
2.4 本章结论 | 第32-34页 |
第三章 纳米微囊化对BMP工程化聚乳酸支架负载蛋白活性影响的研究 | 第34-50页 |
3.1 引言 | 第34页 |
3.2 实验部分 | 第34-39页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第34-36页 |
3.2.2 实验过程 | 第36-39页 |
3.2.2.1 蛋白纳米微囊的制备 | 第36页 |
3.2.2.2 异硫氰酸荧光素(FITC)标记 | 第36-37页 |
3.2.2.3 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第37页 |
3.2.2.4 透射电子显微镜观察 | 第37页 |
3.2.2.5 动态光散射粒度分析以及ZETA电位分析 | 第37页 |
3.2.2.6 凝胶电泳检测蛋白纳米微囊释放 | 第37-38页 |
3.2.2.7 有机溶剂处理蛋白 | 第38页 |
3.2.2.8 聚乳酸乳液法包载蛋白成膜 | 第38页 |
3.2.2.9 聚乳酸二氯甲烷溶液处理蛋白释放测试 | 第38页 |
3.2.2.10 紫外分光光度计测有机溶剂处理前后GOX活性 | 第38-39页 |
3.2.2.11 细胞实验测有机溶剂处理前后BMP-2 活性 | 第39页 |
3.2.2.12 BCA法测蛋白在两相界面上的聚沉 | 第39页 |
3.3 结果与讨论 | 第39-48页 |
3.3.1 蛋白纳米微囊的表征 | 第39-43页 |
3.3.1.1 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第40-41页 |
3.3.1.2 透射电子显微镜分析 | 第41页 |
3.3.1.3 动态光散射(DLS)分析 | 第41-42页 |
3.3.1.4 ZETA电位分析 | 第42-43页 |
3.3.2 蛋白纳米微囊的释放 | 第43-44页 |
3.3.3 不同有机试剂处理对GOX活性的影响 | 第44-45页 |
3.3.4 聚乳酸二氯甲烷溶液成膜对GOX活性影响 | 第45-46页 |
3.3.5 聚乳酸二氯甲烷溶液处理BSA释放测试 | 第46-47页 |
3.3.6 聚乳酸二氯甲烷溶液对BMP活性影响 | 第47-48页 |
3.3.7 蛋白在两相界面聚沉 | 第48页 |
3.4 本章结论 | 第48-50页 |
第四章 全文结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |