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中国野生华东葡萄基因VpALDH2a功能分析与植物侵入后非寄主抗性研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第一章 文献综述第15-28页
   ·葡萄抗病分子机理研究进展第15-17页
     ·葡萄抗病分子标记研究第15-16页
     ·葡萄中分离的抗病(相关)基因第16-17页
   ·醛脱氢酶基因研究进展第17-21页
     ·醛脱氢酶基因的概念、结构与分类第17-18页
     ·醛脱氢酶基因在人和动物中的功能第18页
     ·醛脱氢酶基因在植物生长发育中的功能第18-19页
     ·醛脱氢酶基因在植物应对非生物胁迫中的功能第19-21页
     ·醛脱氢酶基因在植物应对生物胁迫(病原菌)中的功能第21页
   ·葡萄基因工程研究进展第21-25页
     ·葡萄遗传转化受体系统第21-23页
     ·葡萄遗传转化的方法第23-25页
   ·植物非寄主抗性的分子机理研究进展第25-26页
   ·本研究目的与意义第26-28页
第二章 中国野生华东葡萄基因VpALDH2a 在拟南芥中的抗病耐盐功能分析第28-47页
   ·材料第28-29页
     ·材料第28页
     ·主要仪器设备第28页
     ·主要试剂第28-29页
   ·方法第29-34页
     ·病原菌侵染第29页
     ·VpALDH2a 克隆第29-31页
     ·VpALDH2a 亚细胞定位第31页
     ·VpALDH2a 重组蛋白在大肠杆菌中的表达及VpALDH2a 体外酶活分析第31-32页
     ·RT-PCR 和real-time RT-PCR第32-33页
     ·拟南芥VpALDH2a 转化植株筛选第33页
     ·拟南芥VpALDH2a 转基因植株耐盐试验第33页
     ·MDA 含量和SOD 活性测定第33-34页
   ·结果与分析第34-45页
     ·葡萄白粉菌和霜霉菌诱导VpALDH2a 表达第34-35页
     ·VpALDH2a 亚细胞定位第35-37页
     ·VpALDH2a 重组蛋白表现出ALDH 酶的活性第37-39页
     ·VpALDH2a 在拟南芥中过量表达出现过敏性细胞坏死反应第39-40页
     ·拟南芥过量表达VpALDH2a 增强对霜霉菌的抗性第40页
     ·拟南芥过量表达VpALDH2a 增强对白粉菌抗性第40-43页
     ·拟南芥过量表达VpALDH2a 提高植物耐盐性第43-45页
   ·讨论第45-47页
第三章 葡萄再生体系和遗传转化体系的建立与优化第47-58页
   ·材料第47页
     ·材料第47页
     ·主要仪器设备第47页
     ·主要试剂第47页
   ·方法第47-50页
     ·葡萄无菌系的建立第47-48页
     ·葡萄花药发育时期的观察第48页
     ·葡萄花药胚状体再生体系的建立第48页
     ·葡萄叶片再生体系的建立第48-49页
     ·转化载体和菌株第49页
     ·体细胞胚的转化第49-50页
     ·转化植株的GUS 组织化学检测第50页
     ·数据统计分析第50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·不同激素组合对“无核白”葡萄叶片不定芽再生的影响第50-51页
     ·不同激素组合对“无核白”葡萄叶片胚性愈伤组织诱导的影响第51-52页
     ·培养基及不同激素组合对“无核白”葡萄花药胚性愈伤组织诱导的影响第52-53页
     ·花药不同发育时期对胚性愈伤组织诱导的影响第53-55页
     ·预培养时间、抗生素浓度和共培养时间对葡萄转化的影响第55-56页
   ·讨论第56-58页
     ·葡萄胚状体途径与器官发生途径再生体系的建立和优化第56-57页
     ·影响葡萄遗传转化的因素第57-58页
第四章 中国野生华东葡萄基因VpALDH2a 在欧洲感病葡萄上的功能分析第58-70页
   ·材料第58页
     ·材料第58页
     ·主要仪器设备第58页
     ·主要试剂第58页
   ·方法第58-61页
     ·转化载体和菌株第58-59页
     ·体细胞胚的转化第59页
     ·转化植株的再生第59页
     ·转化植株的分子检测第59-60页
     ·转化植株的GUS 组织化学检测第60页
     ·VpALDHa 在转化植株中的表达检测第60页
     ·转化植株抗病性鉴定第60-61页
     ·数据统计分析第61页
   ·结果与分析第61-68页
     ·葡萄花药胚性愈伤组织和胚状体的遗传转化第61-62页
     ·葡萄叶片胚状体的遗传转化第62-63页
     ·葡萄叶片、叶柄的遗传转化第63-64页
     ·转化植株的检测第64-67页
     ·转化植株对葡萄白粉菌和霜霉菌的抗性分析第67-68页
   ·讨论第68-70页
     ·葡萄胚状体途径与器官发生途径的遗传转化第68页
     ·葡萄转基因植株的检测第68-69页
     ·醛脱氢酶基因及其转基因葡萄功能分析第69-70页
第五章 植物侵入后非寄主抗性研究第70-87页
   ·材料和方法第70-71页
     ·材料第70-71页
     ·主要仪器设备第71页
   ·方法第71-72页
     ·分离和描述苦菜白粉菌小种第71页
     ·病原菌侵染和显微镜分析第71-72页
     ·扫描电镜分析(Scanning electron microscopy,SEM)第72页
   ·结果与分析第72-83页
     ·一个新的苦菜白粉菌小种Gc UMSG1 鉴定和分析第72-75页
     ·侵入后抗性在Gc UMSG1 侵染拟南芥过程中发挥重要作用第75-77页
     ·Gc UMSG1 诱导的EHC 和HR 在侵入后抗性中发挥着重要作用第77页
     ·侵入后抗性受SA 依赖性和SA 独立性机制控制第77-81页
     ·Gc UMSG1 诱导的EHC 阻止RPW8.2 定位到吸器外质膜第81-83页
   ·讨论第83-87页
第六章 结论第87-88页
参考文献第88-101页
缩略词第101-102页
致谢第102-103页
个人简介第103-104页

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