| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第10-14页 |
| 1.1 炎症 | 第10页 |
| 1.2 与炎症相关的细胞因子 | 第10-12页 |
| 1.2.1 细胞因子 | 第10-11页 |
| 1.2.2 人白介素-1 (interleukin-1，IL-1) | 第11页 |
| 1.2.3 白细胞介素-6 (interleukin-6，IL-6) | 第11-12页 |
| 1.2.4 肿瘤坏死因子(TNF-a) | 第12页 |
| 1.3 PAMM简述 | 第12-14页 |
| 第2章 PAMM重组质粒的构建 | 第14-25页 |
| 2.1 引言 | 第14-15页 |
| 2.2 材料与方法 | 第15-20页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第15页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第15页 |
| 2.2.3 PAMM基因扩增及胶回收 | 第15-17页 |
| 2.2.4 PAMM与pET-28a双酶切、酶连及转化 | 第17-19页 |
| 2.2.5 pET-28a-Pamm重组质粒的鉴定 | 第19-20页 |
| 2.2.6 转化 | 第20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20-23页 |
| 2.3.1 PAMM目的基因扩增结果 | 第20-21页 |
| 2.3.2 PAMM与pET-28a双酶切实验结果 | 第21页 |
| 2.3.3 pET-28a-Pamm重组质粒的鉴定实验结果 | 第21-23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-25页 |
| 第3章 PAMM蛋白的表达及纯化 | 第25-34页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 材料与方法 | 第25-29页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第25页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第25页 |
| 3.2.3 PAMM蛋白的表达鉴定 | 第25-27页 |
| 3.2.4 PAMM蛋白的原核细菌表达 | 第27-28页 |
| 3.2.5 PAMM蛋白纯化 | 第28-29页 |
| 3.2.6 纯化的PAMM进行除盐处理 | 第29页 |
| 3.3 实验结果 | 第29-33页 |
| 3.3.1 PAMM蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 3.3.2 PAMM蛋白可溶性表达诱导IPTG浓度优化 | 第30页 |
| 3.3.3 PAMM蛋白可溶性表达的温度条件优化 | 第30-31页 |
| 3.3.4 蛋白纯化实验结果 | 第31-33页 |
| 3.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第4章 PAMM蛋白抗炎活性验证 | 第34-47页 |
| 4.1 引言 | 第34页 |
| 4.2 材料与方法 | 第34-42页 |
| 4.2.1 试剂与材料 | 第34页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第34-35页 |
| 4.2.3 RAW264.7 细胞的培养 | 第35页 |
| 4.2.4 考马斯亮蓝法（Bradford）蛋白浓度测定 | 第35-36页 |
| 4.2.5 PAMM对细胞毒性实验 | 第36页 |
| 4.2.6 PAMM对LPS诱导的RAW264.7 释放NO抑制作用 | 第36-37页 |
| 4.2.7 荧光定量PCR分析PAMM抑炎作用 | 第37-40页 |
| 4.2.8 Mouse IL-6 Platinum ELISA检测PAMM蛋白对炎症的抑制作用 | 第40-42页 |
| 4.3 结果 | 第42-45页 |
| 4.3.1 验证PAMM蛋白对RAW264.7 是否毒害作用实验 | 第42页 |
| 4.3.2 PAMM蛋白对炎症模型RAW264.7 细胞NO的释放具有抑制作用 | 第42-43页 |
| 4.3.3 实时定量核酸 PCR 方法进一步验证 PAMM 蛋白抑制炎症作用 | 第43-44页 |
| 4.3.4 ELISA方法证明PAMM蛋白的抗炎作用 | 第44-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第5章 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 综述 | 第53-57页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
