| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-30页 |
| 综述一 沙门氏菌及其致病性研究进展 | 第11-15页 |
| 1、沙门氏菌血清型 | 第11-12页 |
| 2、沙门氏菌毒力因子 | 第12-14页 |
| 2.1、菌毛黏附素 | 第12-13页 |
| 2.2、鞭毛 | 第13页 |
| 2.3、生物被膜 | 第13-14页 |
| 2.4、毒力质粒 | 第14页 |
| 3、沙门氏菌致病过程 | 第14-15页 |
| 综述二 Ⅱ型分泌系统研究进展 | 第15-19页 |
| 1、分泌系统概述 | 第15-17页 |
| 2、T2SS概述 | 第17-19页 |
| 2.1 T2SS发现及分布 | 第17页 |
| 2.2 T2SS组成及分泌过程 | 第17-18页 |
| 2.3 T2SS对细菌致病性的影响 | 第18-19页 |
| 3、T2SS的核心组分-GspE | 第19页 |
| 总结与展望 | 第19-21页 |
| 参考文献 | 第21-30页 |
| 第二章 试验研究 | 第30-77页 |
| 研究一 鼠伤寒沙门氏菌W32△gspE缺失株的构建及外膜蛋白蛋白组学分析 | 第30-57页 |
| 1、材料 | 第32-33页 |
| 1.1 菌株、质粒 | 第32页 |
| 1.2 培养基和主要试剂 | 第32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2、方法 | 第33-40页 |
| 2.1 一次同源重组菌的构建 | 第33-35页 |
| 2.2 二次重组菌的构建 | 第35-36页 |
| 2.3 回补株W32△gspE/pgspE的构建 | 第36-37页 |
| 2.4 差速离心提取外膜蛋白 | 第37-38页 |
| 2.5 Bradford测定外膜蛋白浓度 | 第38页 |
| 2.6 SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第38页 |
| 2.7 iTRAQ技术筛选差异表达蛋白 | 第38-39页 |
| 2.8 生物信息分析 | 第39-40页 |
| 3、结果 | 第40-51页 |
| 3.1 含氯霉素片段PCR产物的制备 | 第40-41页 |
| 3.2 一次重组菌W32△gspE::cat的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3 W32AgspE缺失突变株的鉴定 | 第42-43页 |
| 3.4 回补质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.5 回补株的鉴定 | 第44页 |
| 3.6 Bradford法测定外膜蛋白浓度 | 第44-45页 |
| 3.7 SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第45-46页 |
| 3.8 鉴定和差异蛋白质功能注释 | 第46-51页 |
| 4、分析与讨论 | 第51-57页 |
| 研究二 伤寒沙门氏菌GspE相关特性及毒力研究 | 第57-75页 |
| 1、材料 | 第59页 |
| 1.1 菌株、细胞系 | 第59页 |
| 1.2 培养基和主要试剂 | 第59页 |
| 1.3 仪器设备 | 第59页 |
| 2、方法 | 第59-65页 |
| 2.1 生长试验 | 第59-60页 |
| 2.2 生物被膜形成试验 | 第60页 |
| 2.3 泳动性试验 | 第60-61页 |
| 2.4 DF1细胞黏附试验 | 第61页 |
| 2.5 HD11细胞侵袭试验 | 第61-62页 |
| 2.6 qRT-PCR试验 | 第62-65页 |
| 3、结果 | 第65-71页 |
| 3.1 GspE对W32生长的影响 | 第65-66页 |
| 3.2 GspE对W32生物被膜形成的影响 | 第66-67页 |
| 3.3 泳动性试验 | 第67-68页 |
| 3.4 DF1细胞黏附试验 | 第68-69页 |
| 3.5 HD11鸡巨噬细胞侵袭试验 | 第69-70页 |
| 3.6 qRT-PCR | 第70-71页 |
| 4、分析与讨论 | 第71-75页 |
| 4.1 GspE对W32生长速率的影响 | 第71-72页 |
| 4.2 GspE对W32形成生物被膜能力的调控 | 第72页 |
| 4.3 GspE对W32运动能力的调控 | 第72-73页 |
| 4.4 GspE对W32黏附DF1细胞能力的影响 | 第73页 |
| 4.5 GspE对W32侵袭HD11细胞能力的影响 | 第73-74页 |
| 4.6 GspE对W32毒力相关基因表达的影响 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 全文小结 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
