| 缩写词 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-16页 |
| Abstact | 第16-20页 |
| 第一章 引言 | 第21-36页 |
| 1 植物DCL基因研究进展 | 第22-24页 |
| 1.1 植物DCL的作用 | 第22页 |
| 1.2 DCL与植物生长发育 | 第22-23页 |
| 1.3 DCL与植物抗逆性 | 第23-24页 |
| 1.4 DCL与植物激素代谢 | 第24页 |
| 2 植物miRNA的研究进展 | 第24-28页 |
| 2.1 植物miRNA及1miRNA的合成和作用机理 | 第24-25页 |
| 2.2 miRNA在植物生长发育和应激反应中的作用 | 第25-27页 |
| 2.2.1 miRNA参与植物生长发育 | 第26-27页 |
| 2.2.2 miRNA植物生物和非生物胁迫 | 第27页 |
| 2.3 miRNA与植物体胚发生 | 第27-28页 |
| 3 DNA甲基化的研究进展 | 第28-31页 |
| 3.1 DNA甲基化机制 | 第28-29页 |
| 3.2 RNA介导的DNA甲基化 | 第29-30页 |
| 3.3 DNA甲基化与植物体胚发生 | 第30-31页 |
| 4 植物体细胞胚胎发生研究进展 | 第31-32页 |
| 4.1 激素对植物体胚发生的影响 | 第31页 |
| 4.2 植物体胚发生过程中的基因表达调控 | 第31-32页 |
| 5 龙眼体细胞胚胎发生研究进展 | 第32-33页 |
| 6 研究的意义及主要内容 | 第33-36页 |
| 6.1 研究意义 | 第33-34页 |
| 6.2 研究的主要内容 | 第34-36页 |
| 第二章 龙眼DlDCLs基因家族成员的克隆与生物信息学分析 | 第36-54页 |
| 第一节 龙眼DlDCLs基因家族成员的克隆 | 第36-44页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| 1.1 材料 | 第36-37页 |
| 1.2 方法 | 第37-38页 |
| 1.2.1 龙眼总RNA提取及逆转录 | 第37页 |
| 1.2.2 龙眼转录组数据分析及DlDCLs基因序列的获得 | 第37页 |
| 1.2.3 龙眼DlDCLs基因家族成员的引物设计和克隆 | 第37-38页 |
| 1.2.4 龙眼DlDCLs基因家族成员目的片段的回收和测序 | 第38页 |
| 1.2.5 龙眼DlDCLs基因家族成员cDNA序列分析 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-44页 |
| 2.1 龙眼转录组数据库DCL基因差异表达分析 | 第39页 |
| 2.2 龙眼DlDCLs基因成员的克隆验证 | 第39-41页 |
| 2.2.1 龙眼DlDCL1基因的克隆验证 | 第40页 |
| 2.2.2 龙眼DlDCL2基因的克隆验证 | 第40页 |
| 2.2.3 龙眼DlDCL3基因的克隆验证 | 第40-41页 |
| 2.2.4 龙眼DlDCL4基因的克隆验证 | 第41页 |
| 2.3 龙眼DlDCLs基因氨基酸序列分析及亲缘关系分析 | 第41-44页 |
| 3 讨论 | 第44页 |
| 第二节 龙眼DlDCLs基因家族成员的生物信息学分析 | 第44-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-45页 |
| 1.1 材料 | 第44页 |
| 1.2 方法 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-52页 |
| 2.1 龙眼DlDCLs理化性质分析 | 第45-46页 |
| 2.2 龙眼DlDCLs信号肽及亚细胞定位预测 | 第46-47页 |
| 2.3 龙眼DlDCLs跨膜结构预测与分析 | 第47-48页 |
| 2.4 龙眼DlDCLs卷螺旋预测与分析 | 第48-49页 |
| 2.5 龙眼DlDCLs磷酸化位点预测 | 第49-50页 |
| 2.6 龙眼DlDCLs蛋白结构域预测 | 第50-51页 |
| 2.7 DCL系统进化树分析 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 龙眼DlDCLs基因家族成员启动子的克隆与分析 | 第54-64页 |
| 1 材料与方法 | 第54-56页 |
| 1.1 材料 | 第54页 |
| 1.2 方法 | 第54-56页 |
| 1.2.1 DNA提取 | 第54页 |
| 1.2.2 龙眼DlDCLs基因家族成员启动子序列的获得和克隆 | 第54-55页 |
| 1.2.3 生物信息学分析 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-62页 |
| 2.1 龙眼DlDCLs基因家族成员启动子序列获得 | 第56页 |
| 2.2 龙眼DlDCLs基因家族成员启动子顺式元件功能预测分析 | 第56-61页 |
| 2.2.1 龙眼DlDCLs基因家族成员5'调控序列光反应元件分析 | 第56-58页 |
| 2.2.2 龙眼DlDCLs基因家族成员5'调控序列激素响应元件分析 | 第58页 |
| 2.2.3 龙眼DlDCLs基因家族成员5'调控序列逆境响应元件分析 | 第58-59页 |
| 2.2.4 龙眼DlDCLs基因家族成员5'调控序列生长相关元件分析 | 第59-61页 |
| 2.2.5 龙眼DlDCLs基因家族成员5'调控序列未知相关元件分析 | 第61页 |
| 2.3 龙眼DlDCLs基因家族成员启动子CpG岛的预测 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 龙眼DlDCLs表达模式分析 | 第64-79页 |
| 第一节 DlDCLs在龙眼体胚和组织器官发生过程中表达分析 | 第64-69页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| 1.1 材料 | 第64-65页 |
| 1.2 方法 | 第65-66页 |
| 1.2.1 总RNA的提取和第一链cDNA的合成 | 第65页 |
| 1.2.2 龙眼DCL基因qPCR引物设计和分析 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-67页 |
| 2.1 DlDCLs在龙眼非胚性与胚性培养物中的表达模式分析 | 第66-67页 |
| 2.2 DlDCLs在龙眼红核子不同组织器官中的表达模式分析 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 3.1 龙眼DlDCLs在非胚性愈伤组织和龙眼体胚发生过程中可能具有功能的交叉和互补 | 第68页 |
| 3.2 龙眼DlDCLs可能参与叶片和花器官发育 | 第68-69页 |
| 第二节 龙眼DlDCLs在激素和非生物胁迫处理下的表达分析 | 第69-79页 |
| 1 材料与方法 | 第69-70页 |
| 1.1 材料 | 第69-70页 |
| 1.2.1 不同激素处理下龙眼胚性愈伤组织的获得 | 第69-70页 |
| 1.2.2 不同非生物胁迫下龙眼胚性愈伤组织的获得 | 第70页 |
| 1.2 方法 | 第70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-77页 |
| 2.1 龙眼DlDCLs在不同激素处理下表达模式分析 | 第70-74页 |
| 2.1.1 不同浓度生长素(2,4-D)处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第70-71页 |
| 2.1.2 不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第71-72页 |
| 2.1.3 不同浓度水杨酸(SA)处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第72页 |
| 2.1.4 不同浓度赤霉素(GA3)处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第72-73页 |
| 2.1.5 不同浓度脱落酸(ABA)处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第73-74页 |
| 2.1.6 不同浓度乙烯(ETH)处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第74页 |
| 2.2 非生物胁迫处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第74-77页 |
| 2.2.1 不同光质处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第74-75页 |
| 2.2.2 不同浓度蔗糖处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第75-76页 |
| 2.2.3 不同温度处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第76页 |
| 2.2.4 盐胁迫处理下DlDCLs的表达模式分析 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| 3.1 龙眼DlDCLs可能响应多种激素应答 | 第77-78页 |
| 3.2 龙眼DlDCLs可能响应多种非生物胁迫的应答 | 第78-79页 |
| 第五章 5-氮胞苷（5-azaC）对龙眼胚性愈伤组织细胞和DlDCLs表达的影响 | 第79-86页 |
| 1 材料与方法 | 第79-80页 |
| 1.1 材料 | 第79页 |
| 1.2 方法 | 第79-80页 |
| 1.2.1 不同浓度5-azaC的MS+2,4-D_(1.0mg/L)固体培养基配制 | 第80页 |
| 1.2.2 不同浓度5-azaC的MS+2,4-D_(1.0mg/L)液体培养基配制 | 第80页 |
| 1.2.3 龙眼胚性愈伤组织形态观察 | 第80页 |
| 1.2.4 总RNA的提取和第一链cDNA的合成 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-84页 |
| 2.1 5-azaC处理下龙眼愈伤组织生长量观察 | 第80-81页 |
| 2.2 5-azaC处理下龙眼愈伤组织细胞形态观察 | 第81-83页 |
| 2.3 5-氮胞苷(5-azaC)处理下DlDCLs基因表达模式分析 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 3.1 DNA甲基化影响龙眼胚性愈伤组织生长发育 | 第84-85页 |
| 3.2 龙眼DlDCLs可能参与DNA甲基化过程 | 第85-86页 |
| 第六章 龙眼DlDCLs基因沉默对体胚发生早期的影响 | 第86-97页 |
| 第一节 龙眼DlDCLs基因在体胚发生早期的时空表达 | 第86-90页 |
| 1 材料与方法 | 第86-87页 |
| 1.1 材料 | 第86-87页 |
| 1.1.1 龙眼胚性愈伤组织悬浮材料的获得 | 第86-87页 |
| 1.1.2 龙眼胚性愈伤组织早期体胚发生阶段材料的获得 | 第87页 |
| 1.2 方法 | 第87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-89页 |
| 2.1 龙眼体胚发生早期细胞分化观察 | 第87-88页 |
| 2.2 龙眼体胚发生早期DIDCLs定量表达分析 | 第88-89页 |
| 3 讨论 | 第89-90页 |
| 第二节 DlDCL3和DlDCL4在龙眼体胚发生早期的功能验证 | 第90-97页 |
| 1 材料与方法 | 第91-92页 |
| 1.1 材料 | 第91页 |
| 1.2 方法 | 第91-92页 |
| 1.2.1 siRNA靶点筛选与qPCR检测 | 第91页 |
| 1.2.2 DlDCLs基因抑制后对龙眼体胚早期细胞形态观察 | 第91-92页 |
| 2 结果分析 | 第92-95页 |
| 2.1 龙眼DlDCL3和DlDCL4基因siRNA抑制靶点筛选 | 第92页 |
| 2.2 龙眼DlDCL3基因抑制后对龙眼体胚形态建成的影响 | 第92-94页 |
| 2.3 龙眼DlDCL4基因抑制后对龙眼体胚形态建成的影响 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 第七章 小结与展望 | 第97-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 附录 | 第113-125页 |
| 附录1 龙眼DlDCLs基因cDNA序列信息 | 第113-121页 |
| 附录2 龙眼DlDCLs基因启动子序列信息 | 第121-125页 |
| 在学硕期间发表论文、获奖及参加学术会议情况 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
