| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-13页 |
| 1.1 Cdc42 与胰岛素分泌 | 第9-13页 |
| 1.1.1 Cdc42 简介 | 第9页 |
| 1.1.2 胰岛素分泌的经典通路 | 第9-10页 |
| 1.1.3 Cdc42 在胰岛素分泌中的作用 | 第10-13页 |
| 第2章 小鼠胰岛的分离纯化及功能鉴定 | 第13-20页 |
| 2.1 引言 | 第13页 |
| 2.2 材料与方法 | 第13-16页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第13-14页 |
| 2.2.2 小鼠胰岛的分离纯化 | 第14-15页 |
| 2.2.3 小鼠胰岛的鉴定 | 第15页 |
| 2.2.4 葡萄糖、氯化钾刺激诱导胰岛素的分泌 | 第15-16页 |
| 2.3 结果 | 第16-18页 |
| 2.3.1 小鼠胰腺的充盈 | 第16-17页 |
| 2.3.2 小鼠胰岛的培养修复 | 第17页 |
| 2.3.3 小鼠胰岛活度及纯度的鉴定 | 第17-18页 |
| 2.3.4 小鼠胰岛体外胰岛素分泌的鉴定 | 第18页 |
| 2.4 讨论 | 第18-20页 |
| 第3章 Cdc42 调节胰岛素分泌的可能分子机制 | 第20-44页 |
| 3.1 引言 | 第20页 |
| 3.2 材料和方法 | 第20-33页 |
| 3.2.1 试剂与材料 | 第20-21页 |
| 3.2.2 小鼠基因型鉴定 | 第21-22页 |
| 3.2.3 小鼠胰岛 RNA 提取、cDNA 反转录及 qRT-RCR | 第22-25页 |
| 3.2.4 H&E 染色及免疫组化、免疫荧光 | 第25-27页 |
| 3.2.5 葡萄糖耐量实验 | 第27页 |
| 3.2.6 胰岛素敏感实验 | 第27-28页 |
| 3.2.7 小鼠体重监测 | 第28页 |
| 3.2.8 小鼠体重及餐后血糖检测 | 第28页 |
| 3.2.9 小鼠血液甘油三脂检测 | 第28-29页 |
| 3.2.10 体外小鼠胰岛高糖刺激胰岛素释放实验 | 第29-30页 |
| 3.2.11 免疫印迹实验 | 第30-31页 |
| 3.2.12 稳定细胞系的建立及细胞培养 | 第31-33页 |
| 3.3 结果 | 第33-42页 |
| 3.3.1 Cdc42 基因敲除小鼠尾巴的基因型鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3.2 胰岛β细胞 Cdc42 特异性敲除的验证 | 第34-35页 |
| 3.3.3 胰岛β细胞特异性敲除 Cdc42 对小鼠表型的影响 | 第35-37页 |
| 3.3.4 小鼠胰岛形态及结构的观察 | 第37-38页 |
| 3.3.5 体外胰岛刺激实验中 Cdc42 敲除对胰岛素分泌的影响 | 第38页 |
| 3.3.6 qRT-PCR 筛选 Cdc42 下游因子的变化 | 第38-39页 |
| 3.3.7 稳定表达Cdc42-WT 或Cdc42-T17N 或Cdc42-Q61LMin6 细胞系的建立 | 第39-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 3.4.1 胰岛β细胞条件性敲除 Cdc42 小鼠 | 第42页 |
| 3.4.2 Cdc42 调节胰岛素分泌的可能机制 | 第42-44页 |
| 第4章 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录 | 第49-51页 |
| 综述 | 第51-59页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
