| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 动物乳腺钙代谢研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2 CASR 基因的研究进展 | 第13-22页 |
| 1.2.1 CaSR 基因概述 | 第13-15页 |
| 1.2.2 CaSR 主要生物学功能 | 第15-22页 |
| 1.3 PTHRP 等几个基因在乳腺钙代谢方面的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.3.1 PTHrP 基因 | 第22-23页 |
| 1.3.2 △FosB 基因 | 第23页 |
| 1.3.3 PMCA2 基因 | 第23页 |
| 1.3.4 MMP-9 基因 | 第23-24页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 山羊 CASR 基因的 CDNA 克隆和生物信息学分析 | 第25-33页 |
| 2.1 试验材料 | 第25页 |
| 2.1.1 试验样品 | 第25页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试验试剂 | 第25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第25-26页 |
| 2.2.2 总 RNA 的提取及反转录 cDNA | 第26页 |
| 2.2.3 PCR 扩增目的基因 | 第26页 |
| 2.2.4 目的片段的纯化回收 | 第26页 |
| 2.2.5 目的片段与克隆载体的连接 | 第26页 |
| 2.2.6 转化及挑取阳性克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.7 序列分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.3.1 山羊 CaSR 基因 cDNA 片段的克隆 | 第27页 |
| 2.3.2 CaSR 基因序列分析 | 第27-29页 |
| 2.3.3 氨基酸序列的理化性质和磷酸化位点 | 第29-30页 |
| 2.3.4 同源性分析 | 第30页 |
| 2.3.5 蛋白结构预测 | 第30-31页 |
| 2.3.6 亚细胞定位 | 第31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-32页 |
| 2.5 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 山羊 CASR 基因的组织差异性表达分析 | 第33-37页 |
| 3.1 试验材料 | 第33页 |
| 3.1.1 试验样品 | 第33页 |
| 3.1.2 主要试验设备及试剂 | 第33页 |
| 3.2 试验方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 引物设计及合成 | 第33-34页 |
| 3.2.2 山羊各组织总 RNA 的提取及反转录 | 第34页 |
| 3.2.3 RT-qPCR 引物特异性检测 | 第34页 |
| 3.2.4 RT-qPCR 分析各组织中 CaSR 基因的表达 | 第34-35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 3.5 小结 | 第36-37页 |
| 第四章 山羊 CASR 对 PTHRP 等钙代谢相关基因表达的影响 | 第37-43页 |
| 4.1 试验材料 | 第37页 |
| 4.1.1 试验动物 | 第37页 |
| 4.1.2 主要试验设备及试剂 | 第37页 |
| 4.2 试验方法 | 第37-39页 |
| 4.2.1 奶山羊乳腺上皮原代细胞的培养和处理 | 第37-38页 |
| 4.2.2 实时定量引物设计 | 第38-39页 |
| 4.3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 4.3.1 CaCl_2处理乳腺上皮细胞以后，PTHrP 等钙代谢相关基因的表达变化 | 第39页 |
| 4.3.2 GdCl_3处理乳腺上皮细胞以后，PTHrP 等钙代谢相关基因的表达变化 | 第39页 |
| 4.3.3 NPS2390 处理乳腺上皮细胞以后，PTHrP 等钙代谢相关基因的表达变化 | 第39-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42页 |
| 4.5 小结 | 第42-43页 |
| 第五章 CASR 基因对山羊乳腺上皮细胞凋亡的影响 | 第43-46页 |
| 5.1 试验材料 | 第43页 |
| 5.1.1 试验动物 | 第43页 |
| 5.1.2 主要试验设备及试剂 | 第43页 |
| 5.2 试验方法 | 第43-44页 |
| 5.2.1 奶山羊乳腺上皮原代细胞的培养和处理 | 第43页 |
| 5.2.2 乳腺上皮细胞凋亡情况检测 | 第43-44页 |
| 5.3 结果与分析 | 第44-45页 |
| 5.3.1 Ca~(2+)对细胞凋亡的影响 | 第44页 |
| 5.3.2 Gd~(3+)对细胞凋亡的影响 | 第44页 |
| 5.3.3 NPS2390 对细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 5.4 讨论 | 第45页 |
| 5.5 小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 缩略词 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
