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半滑舌鳎脑星形胶质细胞系建立、鉴定及其雌性特异蛋白CSW3的表达与应用研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
1 前言综述第12-26页
    1.1 鱼类细胞培养概述第12-14页
    1.2 鱼类细胞培养历史及进展第14-15页
    1.3 鱼类细胞系的应用领域第15-18页
        1.3.1 鱼类病毒的分离与鉴定第15页
        1.3.2 鱼类的免疫相关研究与应用第15-16页
        1.3.3 环境污染物检测及环境毒理学方面的应用第16-17页
        1.3.4 鱼类资源保护第17页
        1.3.5 鱼类肿瘤学研究第17-18页
        1.3.6 细胞工程遗传育种第18页
    1.4 鱼类脑细胞培养概况第18-19页
    1.5 鱼类性别决定第19-24页
        1.5.1 遗传性性别决定第20-22页
        1.5.2 激素对鱼类性别分化的影响第22-23页
        1.5.3 环境对鱼类性别分化影响第23-24页
    1.6 蛋白转导与蛋白转染对鱼类生理机能产生影响第24-26页
2 半滑舌鳎星形胶质细胞系的建立、鉴定与应用第26-45页
    2.1 引言第26-27页
    2.2 材料和方法第27-33页
        2.2.1 实验材料第27页
        2.2.2 主要试剂和仪器第27页
        2.2.3 原代培养第27-28页
        2.2.4 传代培养第28页
        2.2.5 细胞的保存和冻融第28-29页
        2.2.6 温度对 CSAC 生长的影响第29页
        2.2.7 不同浓度 FBS 对 CSAC 细胞生长的影响第29页
        2.2.8 CSAC 细胞系染色体分析第29页
        2.2.9 免疫荧光检测 GFAP 表达第29-30页
        2.2.10 RT-PCR 分析 GFAP 表达第30-32页
        2.2.11 含 pEGFP-N3 的质粒转化 CSAC 细胞系第32页
        2.2.12 病毒感染实验第32-33页
    2.3 结果及讨论第33-45页
        2.3.1 细胞系生长特性分析第33-35页
        2.3.2 细胞系冻存复苏第35页
        2.3.3 温度、FBS 对细胞生长的影响第35-36页
        2.3.4 CSAC 细胞系染色体分析第36-38页
        2.3.5 免疫荧光检测 GFAP 表达第38-40页
        2.3.6 RT-PCR 分析 GFAP 表达第40-42页
        2.3.7 含 pEGFP-N3 的质粒转化 CSAC 细胞系第42-43页
        2.3.8 淋巴囊肿病毒(LCDV)和半滑舌鳎神经坏死病毒感染 CSAC第43页
        讨论第43-45页
3 半滑舌鳎雌性特异 CSW3 蛋白的表达及其应用第45-56页
    3.1 引言第45-46页
    3.2 材料与方法第46-52页
        3.2.1 试剂与仪器第46-47页
        3.2.2 半滑舌鳎卵巢总 RNA 的提取第47页
        3.2.3 cDNA 合成第47-48页
        3.2.4 CSW3 基因重组表达载体的构建第48页
        3.2.5 重组蛋白的诱导表达与表达产物的分析第48-49页
        3.2.6 重组蛋白的分离纯化第49-51页
        3.2.7 蛋白浓度测定第51页
        3.2.8 半滑舌鳎 CSW3 重组表达产物生物活性的测定及其应用第51-52页
    3.3 结果及讨论第52-56页
        3.3.1 重组蛋白的诱导表达与表达产物的分析第52页
        3.3.2 重组蛋白的分离纯化第52-53页
        3.3.3 半滑舌鳎 CSW3 重组表达产物生物活性的测定及其应用第53-56页
结论第56-58页
参考文献第58-63页
致谢第63-64页
个人简历第64-65页
发表的学术论文第65-66页

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