摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 前言综述 | 第12-26页 |
1.1 鱼类细胞培养概述 | 第12-14页 |
1.2 鱼类细胞培养历史及进展 | 第14-15页 |
1.3 鱼类细胞系的应用领域 | 第15-18页 |
1.3.1 鱼类病毒的分离与鉴定 | 第15页 |
1.3.2 鱼类的免疫相关研究与应用 | 第15-16页 |
1.3.3 环境污染物检测及环境毒理学方面的应用 | 第16-17页 |
1.3.4 鱼类资源保护 | 第17页 |
1.3.5 鱼类肿瘤学研究 | 第17-18页 |
1.3.6 细胞工程遗传育种 | 第18页 |
1.4 鱼类脑细胞培养概况 | 第18-19页 |
1.5 鱼类性别决定 | 第19-24页 |
1.5.1 遗传性性别决定 | 第20-22页 |
1.5.2 激素对鱼类性别分化的影响 | 第22-23页 |
1.5.3 环境对鱼类性别分化影响 | 第23-24页 |
1.6 蛋白转导与蛋白转染对鱼类生理机能产生影响 | 第24-26页 |
2 半滑舌鳎星形胶质细胞系的建立、鉴定与应用 | 第26-45页 |
2.1 引言 | 第26-27页 |
2.2 材料和方法 | 第27-33页 |
2.2.1 实验材料 | 第27页 |
2.2.2 主要试剂和仪器 | 第27页 |
2.2.3 原代培养 | 第27-28页 |
2.2.4 传代培养 | 第28页 |
2.2.5 细胞的保存和冻融 | 第28-29页 |
2.2.6 温度对 CSAC 生长的影响 | 第29页 |
2.2.7 不同浓度 FBS 对 CSAC 细胞生长的影响 | 第29页 |
2.2.8 CSAC 细胞系染色体分析 | 第29页 |
2.2.9 免疫荧光检测 GFAP 表达 | 第29-30页 |
2.2.10 RT-PCR 分析 GFAP 表达 | 第30-32页 |
2.2.11 含 pEGFP-N3 的质粒转化 CSAC 细胞系 | 第32页 |
2.2.12 病毒感染实验 | 第32-33页 |
2.3 结果及讨论 | 第33-45页 |
2.3.1 细胞系生长特性分析 | 第33-35页 |
2.3.2 细胞系冻存复苏 | 第35页 |
2.3.3 温度、FBS 对细胞生长的影响 | 第35-36页 |
2.3.4 CSAC 细胞系染色体分析 | 第36-38页 |
2.3.5 免疫荧光检测 GFAP 表达 | 第38-40页 |
2.3.6 RT-PCR 分析 GFAP 表达 | 第40-42页 |
2.3.7 含 pEGFP-N3 的质粒转化 CSAC 细胞系 | 第42-43页 |
2.3.8 淋巴囊肿病毒(LCDV)和半滑舌鳎神经坏死病毒感染 CSAC | 第43页 |
讨论 | 第43-45页 |
3 半滑舌鳎雌性特异 CSW3 蛋白的表达及其应用 | 第45-56页 |
3.1 引言 | 第45-46页 |
3.2 材料与方法 | 第46-52页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第46-47页 |
3.2.2 半滑舌鳎卵巢总 RNA 的提取 | 第47页 |
3.2.3 cDNA 合成 | 第47-48页 |
3.2.4 CSW3 基因重组表达载体的构建 | 第48页 |
3.2.5 重组蛋白的诱导表达与表达产物的分析 | 第48-49页 |
3.2.6 重组蛋白的分离纯化 | 第49-51页 |
3.2.7 蛋白浓度测定 | 第51页 |
3.2.8 半滑舌鳎 CSW3 重组表达产物生物活性的测定及其应用 | 第51-52页 |
3.3 结果及讨论 | 第52-56页 |
3.3.1 重组蛋白的诱导表达与表达产物的分析 | 第52页 |
3.3.2 重组蛋白的分离纯化 | 第52-53页 |
3.3.3 半滑舌鳎 CSW3 重组表达产物生物活性的测定及其应用 | 第53-56页 |
结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
个人简历 | 第64-65页 |
发表的学术论文 | 第65-66页 |