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Igf2/H19在宫内TCDD暴露致成年大鼠卵巢功能损伤中的潜在作用机制

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩略语词表第11-13页
前言第13-16页
1 材料第16-19页
    1.1 实验动物及饲养条件第16页
    1.2 实验仪器与耗材第16-17页
    1.3 实验试剂第17-19页
2 方法第19-35页
    2.1 SD大鼠TCDD宫内暴露模型建立第19-21页
        2.1.1 阴道细胞涂片第20页
        2.1.2 组织样本采集第20-21页
    2.2 酶联免疫吸附法(ELISA)第21-22页
    2.3 卵巢卵泡计数第22-23页
        2.3.1 石蜡切片第22-23页
        2.3.2 HE染色第23页
        2.3.3 卵泡计数第23页
    2.4 TUNEL细胞凋亡检测第23-24页
    2.5 荧光定量PCR第24-26页
        2.5.1 总RNA提取第24-25页
        2.5.2 总RNA浓度测定第25页
        2.5.3 反转录第25页
        2.5.4 引物设计与合成第25-26页
        2.5.5 Real-timePCR反应第26页
        2.5.6 Real-timePCR结果分析第26页
    2.6 WesternBlot检测第26-29页
        2.6.1 组织总蛋白提取第26-27页
        2.6.2 蛋白浓度测定第27页
        2.6.3 SDS-PAGE电泳第27-28页
        2.6.4 转膜第28页
        2.6.5 免疫反应第28-29页
        2.6.6 化学发光第29页
        2.6.7 凝胶图像分析第29页
    2.7 亚硫酸氢盐测序法第29-34页
        2.7.1 DNA亚硫酸氢钠修饰第29-30页
        2.7.2 PCR扩增第30-32页
        2.7.3 PCR电泳与DNA回收第32-33页
        2.7.4 PCR纯化产物连接到pUC18-T载体进行转化第33-34页
        2.7.5 蓝白斑筛选和测序第34页
    2.8 统计学分析第34-35页
3 结果第35-46页
    3.1 宫内TCDD暴露对卵巢功能的影响第35-40页
        3.1.1 对SD大鼠子代阴道开口时间、雌雄比例、卵巢脏器系数和动情周期的影响第35页
        3.1.2 对SD大鼠卵巢卵泡发育的影响第35-37页
        3.1.3 对SD大鼠卵泡细胞凋亡的影响第37-39页
        3.1.4 对SD大鼠血清E2和FSH激素水平的影响第39-40页
    3.2 宫内TCDD暴露对SD大鼠卵巢组织中Igf2/H19mRNA表达的影响..第40-42页
    3.3 宫内TCDD暴露对SD大鼠卵巢组织中IGF2蛋白表达的影响第42-43页
    3.4 宫内TCDD暴露对SD大鼠卵巢组织中Igf2-DMR2/H19-ICR区域甲基化状态的影响第43-46页
4 讨论第46-51页
    4.1 TCDD宫内暴露动物模型的建立第46-47页
    4.2 TCDD宫内暴露对SD大鼠子代生长发育和卵巢功能的影响第47-48页
    4.3 TCDD宫内暴露对SD大鼠中卵巢组织总Igf2/H19基因表达的影响第48-49页
    4.4 TCDD宫内暴露对SD大鼠卵巢组织中Igf2/H19甲基化水平的影响第49-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-57页
综述 环境污染物对表观遗传学的影响第57-69页
    参考文献第64-69页
个人简历第69-70页
    教育背景第69页
    硕士期间在校表现第69页
    硕士期间科研成果第69-70页
致谢第70页

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