| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 前言 | 第10-27页 |
| 1 高等植物茎端分生组织 | 第10-16页 |
| 1.1 茎端分生组织的形成 | 第10-11页 |
| 1.2 茎端分生组织的结构、功能 | 第11页 |
| 1.3 茎端分生组织的调控机制 | 第11-13页 |
| 1.4 WUS基因 | 第13-16页 |
| 2 泛素蛋白酶体系统 | 第16-21页 |
| 2.1 泛素蛋白酶体系统的构成 | 第17-19页 |
| 2.2 泛素蛋白酶体系统介导的蛋白降解过程 | 第19-20页 |
| 2.3 蛋白酶体抑制剂 | 第20-21页 |
| 3 酵母双杂交技术 | 第21-26页 |
| 3.1 酵母双杂交技术的原理 | 第21-22页 |
| 3.2 酵母双杂交技术的发展、应用及特点 | 第22-24页 |
| 3.3 Matchmaker~(TM)Gold Yeast Two-Hybrid System简介 | 第24-26页 |
| 4 立题依据及研究意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-46页 |
| 1 实验材料 | 第27-32页 |
| 1.1 植物材料 | 第27页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第27页 |
| 1.3 常用培养基 | 第27-28页 |
| 1.4 抗生素 | 第28页 |
| 1.5 引物 | 第28-29页 |
| 1.6 主要试剂 | 第29-31页 |
| 1.7 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-46页 |
| 2.1 拟南芥相关实验操作 | 第32-33页 |
| 2.2 DNA和RNA相关实验操作 | 第33-38页 |
| 2.3 蛋白相关实验操作 | 第38-41页 |
| 2.4 酵母双杂交相关实验技术 | 第41-46页 |
| 第三章 结果与分析 | 第46-61页 |
| 1 超表达WUS植株中WUS蛋白和mRNA水平的检测 | 第46-48页 |
| 2 蛋白酶体介导WUS蛋白的降解 | 第48-52页 |
| 2.1 体外表达载体pMBP-WUS的构建 | 第48页 |
| 2.2 MBP-WUS蛋白的体外诱导表达与纯化 | 第48-49页 |
| 2.3 MBP-WUS蛋白在WT无细胞提取液中会被降解 | 第49-50页 |
| 2.4 蛋白酶体抑制剂可以抑制MBP-WUS蛋白的降解 | 第50-51页 |
| 2.5 蛋白酶体抑制剂可以抑制超表达WUS幼苗中WUS蛋白的降解 | 第51-52页 |
| 3 酵母双杂交筛选与WUS相互作用的蛋白 | 第52-61页 |
| 3.1 酵母双杂交自激活检测和毒性检测 | 第52-56页 |
| 3.2 酵母双杂交筛选cDNA文库 | 第56页 |
| 3.3 阳性菌落插入片段的筛选及测序 | 第56-61页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第61-64页 |
| 1 WUS蛋白通过蛋白酶体途径被降解 | 第61页 |
| 2 酵母双杂交筛选到可能与WUS有相互作用的蛋白 | 第61-62页 |
| 3 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
