摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 引言 | 第10-22页 |
1.1 斑马鱼心脏发育概论 | 第10-13页 |
1.1.1 斑马鱼作为模式生物的优点 | 第10-11页 |
1.1.2 斑马鱼心脏发育过程 | 第11-13页 |
1.2 斑马鱼心脏早期发育的基因调控 | 第13-15页 |
1.3 骨骼肌发育的分子机制 | 第15-19页 |
1.3.1 骨骼肌发育的基因调控 | 第16-19页 |
1.4 相关标记基因 | 第19-20页 |
1.4.1 amhc | 第19页 |
1.4.2 vmhc | 第19页 |
1.4.3 cmlc2 | 第19-20页 |
1.4.4 vmhc | 第20页 |
1.5 FHLA基因背景介绍 | 第20-21页 |
1.6 本文研究的目标与研究意义 | 第21-22页 |
2 材料和方法 | 第22-32页 |
2.1 材料、试剂与设备 | 第22-24页 |
2.1.1 酶类、试剂盒以及抗体 | 第22页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第22页 |
2.1.3 其他试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第23页 |
2.1.5 生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第23-24页 |
2.2 常规分子生物学实验方法 | 第24-32页 |
2.2.1 分子克隆 | 第24-27页 |
2.2.2 Anti-sense RNA的转录及探针合成 | 第27-28页 |
2.2.3 总RNA的提取 | 第28-29页 |
2.2.4 斑马鱼morpholino技术 | 第29页 |
2.2.5 斑马鱼整体胚胎原位杂交(WISH) | 第29-30页 |
2.2.6 斑马鱼整体胚胎抗体染色 | 第30-32页 |
3 结果 | 第32-54页 |
3.1 斑马鱼原位杂交探针的制备 | 第32-37页 |
3.1.1 vmhc、amhc探针的制备 | 第32-33页 |
3.1.2 myl7探针合成的结果 | 第33页 |
3.1.3 GATA4探针的合成 | 第33-34页 |
3.1.4 EGFP探针的合成 | 第34-35页 |
3.1.5 skMLCK探针的合成 | 第35-36页 |
3.1.6 MyoD探针的合成 | 第36-37页 |
3.2 斑马鱼TMP3在心脏发育中的作用研究 | 第37-46页 |
3.2.1 TMP3基因的表达谱分析 | 第37页 |
3.2.2 TMP3基因对斑马鱼心脏和心室发育的影响 | 第37-39页 |
3.2.3 TMP3对斑马鱼心房发育的影响 | 第39-40页 |
3.2.4 TMP3相互作用基因TMPA4对斑马鱼心脏和心室发育的影响 | 第40-41页 |
3.2.5 TMP3相互作用基因TMPA4对斑马鱼心房发育的影响 | 第41-42页 |
3.2.6 TMP3的下游直接靶基因GATA4的拯救实验结果 | 第42-46页 |
3.3 斑马鱼FHLA基因在骨骼肌发育中的功能研究 | 第46-54页 |
3.3.1 FHLA在斑马鱼骨骼肌的表达谱分析 | 第46-47页 |
3.3.2 FHLA对斑马鱼骨骼和肌纤维的影响 | 第47-49页 |
3.3.3 FHLA对骨骼肌发育的影响 | 第49-50页 |
3.3.4 FHLA对斑马鱼慢肌发育的影响 | 第50-51页 |
3.3.5 FHLA对卫星细胞发育的影响 | 第51-52页 |
3.3.6 RA对斑马鱼骨骼肌发育的影响 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
5 结语 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |