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利用WISH技术研究斑马鱼TMP3和FHLA基因在心脏和骨骼肌发育中的作用

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1 引言第10-22页
    1.1 斑马鱼心脏发育概论第10-13页
        1.1.1 斑马鱼作为模式生物的优点第10-11页
        1.1.2 斑马鱼心脏发育过程第11-13页
    1.2 斑马鱼心脏早期发育的基因调控第13-15页
    1.3 骨骼肌发育的分子机制第15-19页
        1.3.1 骨骼肌发育的基因调控第16-19页
    1.4 相关标记基因第19-20页
        1.4.1 amhc第19页
        1.4.2 vmhc第19页
        1.4.3 cmlc2第19-20页
        1.4.4 vmhc第20页
    1.5 FHLA基因背景介绍第20-21页
    1.6 本文研究的目标与研究意义第21-22页
2 材料和方法第22-32页
    2.1 材料、试剂与设备第22-24页
        2.1.1 酶类、试剂盒以及抗体第22页
        2.1.2 菌株和质粒第22页
        2.1.3 其他试剂第22-23页
        2.1.4 主要实验仪器第23页
        2.1.5 生物信息学分析的主要软件与数据库第23-24页
    2.2 常规分子生物学实验方法第24-32页
        2.2.1 分子克隆第24-27页
        2.2.2 Anti-sense RNA的转录及探针合成第27-28页
        2.2.3 总RNA的提取第28-29页
        2.2.4 斑马鱼morpholino技术第29页
        2.2.5 斑马鱼整体胚胎原位杂交(WISH)第29-30页
        2.2.6 斑马鱼整体胚胎抗体染色第30-32页
3 结果第32-54页
    3.1 斑马鱼原位杂交探针的制备第32-37页
        3.1.1 vmhc、amhc探针的制备第32-33页
        3.1.2 myl7探针合成的结果第33页
        3.1.3 GATA4探针的合成第33-34页
        3.1.4 EGFP探针的合成第34-35页
        3.1.5 skMLCK探针的合成第35-36页
        3.1.6 MyoD探针的合成第36-37页
    3.2 斑马鱼TMP3在心脏发育中的作用研究第37-46页
        3.2.1 TMP3基因的表达谱分析第37页
        3.2.2 TMP3基因对斑马鱼心脏和心室发育的影响第37-39页
        3.2.3 TMP3对斑马鱼心房发育的影响第39-40页
        3.2.4 TMP3相互作用基因TMPA4对斑马鱼心脏和心室发育的影响第40-41页
        3.2.5 TMP3相互作用基因TMPA4对斑马鱼心房发育的影响第41-42页
        3.2.6 TMP3的下游直接靶基因GATA4的拯救实验结果第42-46页
    3.3 斑马鱼FHLA基因在骨骼肌发育中的功能研究第46-54页
        3.3.1 FHLA在斑马鱼骨骼肌的表达谱分析第46-47页
        3.3.2 FHLA对斑马鱼骨骼和肌纤维的影响第47-49页
        3.3.3 FHLA对骨骼肌发育的影响第49-50页
        3.3.4 FHLA对斑马鱼慢肌发育的影响第50-51页
        3.3.5 FHLA对卫星细胞发育的影响第51-52页
        3.3.6 RA对斑马鱼骨骼肌发育的影响第52-54页
4 讨论第54-56页
5 结语第56-57页
参考文献第57-62页
附录第62-63页
致谢第63-64页

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