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白花丹参中丹参酮类和酚酸类化合物抗血栓活性评价及机制研究

摘要第14-16页
ABSTRACT第16-17页
符号说明第18-20页
第一章 血栓性疾病及白花丹参研究进展(综述)第20-41页
    1.1 血栓性疾病研究进展第20-22页
        1.1.1 血栓性疾病的形成及其机制第21-22页
    1.2 丹参的研究进展第22-26页
        1.2.1 化学成分研究第23-24页
            1.2.1.1 丹参酮类成分第23-24页
            1.2.1.2 酚酸类成分第24页
            1.2.1.3 其他化学成分第24页
        1.2.2 丹参药理作用研究进展第24-26页
            1.2.2.1 抗血栓作用第24-25页
            1.2.2.2 抗心肌缺血作用第25-26页
            1.2.2.3 抗炎作用第26页
            1.2.2.4 抗氧化作用第26页
            1.2.2.5 其他药理作用第26页
    1.3 白花丹参的研究进展第26-32页
        1.3.1 化学成分研究第27-31页
            1.3.1.1 丹参酮类成分第27-29页
            1.3.1.2 酚酸类成分第29-31页
        1.3.2 白花丹参药理研究进展第31-32页
            1.3.2.1 抗血栓作用第31页
            1.3.2.2 抗缺血缺氧作用第31-32页
            1.3.2.3 抗炎作用第32页
            1.3.2.4 抗癌作用第32页
            1.3.2.5 抗衰老作用第32页
    1.4 本课题的提出第32-34页
    参考文献第34-41页
第二章 丹参酮类化合物抗血栓活性评价第41-64页
    2.1 前言第41-42页
    2.2 实验材料第42-46页
        2.2.1 细胞系第42页
        2.2.2 化合物第42-44页
        2.2.3 主要实验仪器第44-45页
        2.2.4 主要实验试剂第45-46页
    2.3 实验方法第46-53页
        2.3.1 细胞培养第46-47页
            2.3.1.1 培养基及冻存条件第46页
            2.3.1.2 细胞传代、冻存和复苏第46-47页
        2.3.2 MTT法测定EA.hy926细胞毒第47页
        2.3.3 ELISA法测定EA.hy926细胞上清液中PAI-1和t-PA的表达水平第47-49页
            2.3.3.1 试剂准备第47页
            2.3.3.2 标准曲线配制第47-48页
            2.3.3.3 检测步骤第48-49页
            2.3.3.4 预实验第49页
        2.3.4 qRT-PCR法检测EA.hy926细胞中PAI-1和t-PA的mRNA表达水平第49-51页
            2.3.4.1 目的基因和内参基因的引物序列第49页
            2.3.4.2 总RNA提取第49-50页
            2.2.4.3 逆转录cDNA链合成第50-51页
            2.3.4.4 实时荧光定量PCR第51页
        2.3.5 EA.hy926细胞表面FⅩa含量的检测第51-52页
        2.3.6 EA.hy926细胞表面FⅡa含量的检测第52页
        2.3.7 丹参酮类化合物体外抗FⅩa和FⅡa活性检测第52-53页
            2.3.7.1 试剂准备第52页
            2.3.7.2 实验步骤第52-53页
        2.3.8 统计分析第53页
    2.4 实验结果第53-60页
        2.4.1 丹参酮类化合物对EA.hy926细胞的毒性第53页
        2.4.2 丹参酮类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞上清中t-PA和PAI-1表达的影响第53-57页
        2.4.3 丹参酮类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞的PAI-1和t-PAmRNA表达的影响第57-59页
        2.4.4 EA.hy926细胞表面FⅩa和FⅡa的产生第59页
        2.4.5 丹参酮类化合物抗FⅡIa和FⅩa活性第59-60页
    2.5 讨论与总结第60-62页
    参考文献第62-64页
第三章 酚酸类化合物的抗血栓活性评价第64-78页
    3.1 前言第64-66页
    3.2 实验材料第66页
        3.2.1 主要实验仪器第66页
        3.2.2 主要实验试剂第66页
    3.3 实验方法第66-69页
        3.3.1 细胞培养第66-67页
        3.3.2 CCK-8法测定EA.hy926细胞毒第67页
        3.3.3 ELISA法测定EAhy926细胞上清液中PAI-1和t-PA的表达水平第67-69页
            3.3.3.1 试剂准备第67页
            3.3.3.2 标准曲线配制第67-68页
            3.3.3.3 样品准备第68页
            3.3.3.4 检测步骤第68-69页
        3.3.4 qRT-PCR法检测EA.hy926细胞中PAI-1和t-PA的mRNA表达水平第69页
        3.3.5 EA.hy926细胞表面FⅩa和FⅡa的生成第69页
        3.3.6 酚酸类化合物体外抗FⅩa和FⅡa活性第69页
        3.3.7 统计分析第69页
    3.4 实验结果第69-76页
        3.4.1 酚酸类化合物对EA.hy926细胞的毒性第69页
        3.4.2 酚酸类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞的t-PA和PAI-1表达的影响第69-70页
        3.4.3 酚酸类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞的PAI-1和t-PA mRNA表达的影响第70-74页
        3.4.4 FⅩa和FⅡa在EA.hy926细胞表面的产生第74-75页
        3.4.5 酚酸类化合物抗FⅡa和FⅩa活性第75-76页
    3.5 讨论与总结第76-77页
    参考文献第77-78页
第四章 丹参酮类和酚酸类化合物抗血栓机制研究第78-89页
    4.1 前言第78页
    4.2 实验材料第78-80页
        4.2.1 主要实验仪器第78-79页
        4.2.2 主要实验试剂第79-80页
    4.3 实验方法第80-83页
        4.3.1 Western blot法检测EA.hy926细胞中p65、p-p65、p38、p-p38、JNK和pJNK的蛋白表达第80-83页
            4.3.1.1 细胞给药第80页
            4.3.1.2 总蛋白提取第80-81页
            4.3.1.3 BCA蛋白浓度测定第81页
            4.3.1.4 SDS-PAGE电泳第81-83页
    4.4 实验结果第83-86页
        4.4.1 丹参酮ⅡA和脱氧基新隐丹参酮对TNF-α诱导的EA.hy926细胞中NF-κB、p38 MAPK和JNK信号通路的影响第83-84页
        4.4.2 丹酚酸B和紫草酸对TNF-α诱导的EA.hy926细胞中NF-κB、p38MAPK和JNK信号通路的影响第84-86页
    4.5 讨论与总结第86-88页
    参考文献第88-89页
致谢第89-90页
攻读学位期间发表的学术论文第90-91页
附录第91-96页
学位论文评阅及答辩情况表第96页

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