摘要 | 第14-16页 |
ABSTRACT | 第16-17页 |
符号说明 | 第18-20页 |
第一章 血栓性疾病及白花丹参研究进展(综述) | 第20-41页 |
1.1 血栓性疾病研究进展 | 第20-22页 |
1.1.1 血栓性疾病的形成及其机制 | 第21-22页 |
1.2 丹参的研究进展 | 第22-26页 |
1.2.1 化学成分研究 | 第23-24页 |
1.2.1.1 丹参酮类成分 | 第23-24页 |
1.2.1.2 酚酸类成分 | 第24页 |
1.2.1.3 其他化学成分 | 第24页 |
1.2.2 丹参药理作用研究进展 | 第24-26页 |
1.2.2.1 抗血栓作用 | 第24-25页 |
1.2.2.2 抗心肌缺血作用 | 第25-26页 |
1.2.2.3 抗炎作用 | 第26页 |
1.2.2.4 抗氧化作用 | 第26页 |
1.2.2.5 其他药理作用 | 第26页 |
1.3 白花丹参的研究进展 | 第26-32页 |
1.3.1 化学成分研究 | 第27-31页 |
1.3.1.1 丹参酮类成分 | 第27-29页 |
1.3.1.2 酚酸类成分 | 第29-31页 |
1.3.2 白花丹参药理研究进展 | 第31-32页 |
1.3.2.1 抗血栓作用 | 第31页 |
1.3.2.2 抗缺血缺氧作用 | 第31-32页 |
1.3.2.3 抗炎作用 | 第32页 |
1.3.2.4 抗癌作用 | 第32页 |
1.3.2.5 抗衰老作用 | 第32页 |
1.4 本课题的提出 | 第32-34页 |
参考文献 | 第34-41页 |
第二章 丹参酮类化合物抗血栓活性评价 | 第41-64页 |
2.1 前言 | 第41-42页 |
2.2 实验材料 | 第42-46页 |
2.2.1 细胞系 | 第42页 |
2.2.2 化合物 | 第42-44页 |
2.2.3 主要实验仪器 | 第44-45页 |
2.2.4 主要实验试剂 | 第45-46页 |
2.3 实验方法 | 第46-53页 |
2.3.1 细胞培养 | 第46-47页 |
2.3.1.1 培养基及冻存条件 | 第46页 |
2.3.1.2 细胞传代、冻存和复苏 | 第46-47页 |
2.3.2 MTT法测定EA.hy926细胞毒 | 第47页 |
2.3.3 ELISA法测定EA.hy926细胞上清液中PAI-1和t-PA的表达水平 | 第47-49页 |
2.3.3.1 试剂准备 | 第47页 |
2.3.3.2 标准曲线配制 | 第47-48页 |
2.3.3.3 检测步骤 | 第48-49页 |
2.3.3.4 预实验 | 第49页 |
2.3.4 qRT-PCR法检测EA.hy926细胞中PAI-1和t-PA的mRNA表达水平 | 第49-51页 |
2.3.4.1 目的基因和内参基因的引物序列 | 第49页 |
2.3.4.2 总RNA提取 | 第49-50页 |
2.2.4.3 逆转录cDNA链合成 | 第50-51页 |
2.3.4.4 实时荧光定量PCR | 第51页 |
2.3.5 EA.hy926细胞表面FⅩa含量的检测 | 第51-52页 |
2.3.6 EA.hy926细胞表面FⅡa含量的检测 | 第52页 |
2.3.7 丹参酮类化合物体外抗FⅩa和FⅡa活性检测 | 第52-53页 |
2.3.7.1 试剂准备 | 第52页 |
2.3.7.2 实验步骤 | 第52-53页 |
2.3.8 统计分析 | 第53页 |
2.4 实验结果 | 第53-60页 |
2.4.1 丹参酮类化合物对EA.hy926细胞的毒性 | 第53页 |
2.4.2 丹参酮类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞上清中t-PA和PAI-1表达的影响 | 第53-57页 |
2.4.3 丹参酮类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞的PAI-1和t-PAmRNA表达的影响 | 第57-59页 |
2.4.4 EA.hy926细胞表面FⅩa和FⅡa的产生 | 第59页 |
2.4.5 丹参酮类化合物抗FⅡIa和FⅩa活性 | 第59-60页 |
2.5 讨论与总结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-64页 |
第三章 酚酸类化合物的抗血栓活性评价 | 第64-78页 |
3.1 前言 | 第64-66页 |
3.2 实验材料 | 第66页 |
3.2.1 主要实验仪器 | 第66页 |
3.2.2 主要实验试剂 | 第66页 |
3.3 实验方法 | 第66-69页 |
3.3.1 细胞培养 | 第66-67页 |
3.3.2 CCK-8法测定EA.hy926细胞毒 | 第67页 |
3.3.3 ELISA法测定EAhy926细胞上清液中PAI-1和t-PA的表达水平 | 第67-69页 |
3.3.3.1 试剂准备 | 第67页 |
3.3.3.2 标准曲线配制 | 第67-68页 |
3.3.3.3 样品准备 | 第68页 |
3.3.3.4 检测步骤 | 第68-69页 |
3.3.4 qRT-PCR法检测EA.hy926细胞中PAI-1和t-PA的mRNA表达水平 | 第69页 |
3.3.5 EA.hy926细胞表面FⅩa和FⅡa的生成 | 第69页 |
3.3.6 酚酸类化合物体外抗FⅩa和FⅡa活性 | 第69页 |
3.3.7 统计分析 | 第69页 |
3.4 实验结果 | 第69-76页 |
3.4.1 酚酸类化合物对EA.hy926细胞的毒性 | 第69页 |
3.4.2 酚酸类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞的t-PA和PAI-1表达的影响 | 第69-70页 |
3.4.3 酚酸类化合物对TNF-α诱导的EA.hy926细胞的PAI-1和t-PA mRNA表达的影响 | 第70-74页 |
3.4.4 FⅩa和FⅡa在EA.hy926细胞表面的产生 | 第74-75页 |
3.4.5 酚酸类化合物抗FⅡa和FⅩa活性 | 第75-76页 |
3.5 讨论与总结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-78页 |
第四章 丹参酮类和酚酸类化合物抗血栓机制研究 | 第78-89页 |
4.1 前言 | 第78页 |
4.2 实验材料 | 第78-80页 |
4.2.1 主要实验仪器 | 第78-79页 |
4.2.2 主要实验试剂 | 第79-80页 |
4.3 实验方法 | 第80-83页 |
4.3.1 Western blot法检测EA.hy926细胞中p65、p-p65、p38、p-p38、JNK和pJNK的蛋白表达 | 第80-83页 |
4.3.1.1 细胞给药 | 第80页 |
4.3.1.2 总蛋白提取 | 第80-81页 |
4.3.1.3 BCA蛋白浓度测定 | 第81页 |
4.3.1.4 SDS-PAGE电泳 | 第81-83页 |
4.4 实验结果 | 第83-86页 |
4.4.1 丹参酮ⅡA和脱氧基新隐丹参酮对TNF-α诱导的EA.hy926细胞中NF-κB、p38 MAPK和JNK信号通路的影响 | 第83-84页 |
4.4.2 丹酚酸B和紫草酸对TNF-α诱导的EA.hy926细胞中NF-κB、p38MAPK和JNK信号通路的影响 | 第84-86页 |
4.5 讨论与总结 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第90-91页 |
附录 | 第91-96页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第96页 |