| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 植物抗逆与次此生代谢的转录调控网络 | 第10-14页 |
| 1.1.1 植物转录因子研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.2 MYB转录因子研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 植物RNAi载体的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 本研究目的与意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.2 菌株与试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.1 菌株 | 第17页 |
| 2.2.2 试剂 | 第17-18页 |
| 2.3 培养基 | 第18页 |
| 2.4 方法 | 第18-30页 |
| 2.4.1 苹果叶片总RNA的提取与检测 | 第18-19页 |
| 2.4.2 MdMYB5基因的克隆 | 第19-21页 |
| 2.4.3 pRNAi-E载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.4.4 苹果MdMYB5基因沉默载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.4.5 苹果MdMYB5启动子基因荧光素酶载体的构建 | 第23页 |
| 2.4.6 苹果MdMYB46基因原核表达载体的构建 | 第23页 |
| 2.4.7 苹果MdMYB46基因过表达载体的构建 | 第23页 |
| 2.4.8 苹果和烟草的遗传转化 | 第23-25页 |
| 2.4.9 实时定量PCR | 第25-27页 |
| 2.4.10 MdMYB5基因在盐胁迫和模拟干旱胁迫处理下的表达 | 第27-28页 |
| 2.4.11 EMSA试验 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-48页 |
| 3.1 苹果MdMYB5基因克隆与序列分析 | 第30-33页 |
| 3.1.1 苹果叶片RNA质量及完整性分析 | 第30页 |
| 3.1.2 苹果MdMYB5基因的克隆 | 第30-32页 |
| 3.1.3 MdMYB5的氨基酸序列分析 | 第32-33页 |
| 3.2 MdMYB46对MdMYB5基因的转录调控 | 第33-40页 |
| 3.2.1 过表达和沉默MdMYB46苹果苗中MdMYB5的表达量分析 | 第33-34页 |
| 3.2.2 MdMYB5启动子序列的克隆及分析 | 第34-36页 |
| 3.2.3 MdMYB46转录因子与MdMYB5基因启动子的直接绑定 | 第36-40页 |
| 3.3 苹果MdMYB5基因的功能鉴定 | 第40-48页 |
| 3.3.1 一种用于植物基因沉默的新RNAi载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.3.2 MdMYB5基因植物沉默载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.3.3 转基因苹果的筛选与检测 | 第43-45页 |
| 3.3.4 MdMYB5基因影响苹果对干旱胁迫和盐胁迫的耐性 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 4.1 MdMYB46转录因子对MdMYB5调控的分子机制 | 第48页 |
| 4.2 MdMYB5基因在苹果中的功能 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第63-64页 |
