| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-20页 |
| 研究现状 | 第12-18页 |
| 研究目的、方法 | 第18-20页 |
| 一、肝癌细胞系中靶定AFP的miRNA的确定及其功能分析 | 第20-44页 |
| 1.1 材料和方法 | 第20-34页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 1.1.2 方法 | 第22-34页 |
| 1.2 结果 | 第34-40页 |
| 1.2.1 靶定AFP的miRNA的预测 | 第34-35页 |
| 1.2.2 pcDNA3/pri-mir-1236质粒的构建 | 第35页 |
| 1.2.3 瞬转pri-miR-1236和ASO-1236后Real-time PCR检测质粒有效性 | 第35-36页 |
| 1.2.4 EGFP报告系统验证在肝癌细胞中AFP是miR-1236的靶基因 | 第36-37页 |
| 1.2.5 miR-1236对HepG2细胞AFP蛋白水平的影响 | 第37-38页 |
| 1.2.6 Real-time PCR检测HepG2细胞中miR-1236对AFP mRNA水平的影响 | 第38-39页 |
| 1.2.7 Real-time PCR检测肝癌组织中AFPmRNA以及miR-1236的表达水平 | 第39-40页 |
| 1.3 讨论 | 第40-43页 |
| 1.3.1 靶定AFP的miRNA的证实 | 第40-41页 |
| 1.3.2 miR-1236对AFP表达的负性调节作用 | 第41-43页 |
| 1.4 小结 | 第43-44页 |
| 二、miR-1236对肝癌细胞系HepG2、QGY-7703细胞生长的影响 | 第44-59页 |
| 2.1 材料和方法 | 第44-50页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第44-46页 |
| 2.1.2 方法 | 第46-50页 |
| 2.2 结果 | 第50-56页 |
| 2.2.1 MTT检测分析miR-1236对肝癌细胞活性的影响 | 第50-51页 |
| 2.2.2 平板克隆形成实验 | 第51-52页 |
| 2.2.3 Western bolt检测pcDNA3/AFP质粒有效性 | 第52-53页 |
| 2.2.4 在QGY-7703细胞中过表达AFP蛋白对细胞生长表型的影响 | 第53-54页 |
| 2.2.5 挽救实验 | 第54-56页 |
| 2.3 讨论 | 第56-58页 |
| 2.3.1 miR-1236对肝癌细胞的表型影响 | 第56-57页 |
| 2.3.2 挽救实验 | 第57-58页 |
| 2.4 小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
| 综述 MiRNA与肝细胞癌的诊断和预后 | 第68-77页 |
| 综述参考文献 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
