| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 转基因克隆动物研究概述 | 第13-24页 |
| 1.1 体细胞核移植研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1.1 国内外核移植技术研究现状 | 第13-15页 |
| 1.1.2 体细胞核移植与细胞重编程 | 第15-16页 |
| 1.2 转基因克隆研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 国外转基因研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.2 国内转基因研究进展 | 第17页 |
| 1.3 动物转基因技术 | 第17-20页 |
| 1.3.1 原核注射法 | 第17页 |
| 1.3.2 精子载体介导法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 胚胎干细胞介导法 | 第18-19页 |
| 1.3.4 病毒载体法 | 第19-20页 |
| 1.3.5 体细胞核移植法 | 第20页 |
| 1.4 转基因的应用现状与存在的问题 | 第20-23页 |
| 1.4.1 转基因的应用现状 | 第20-22页 |
| 1.4.2 转基因动物面临的问题 | 第22-23页 |
| 1.5 前景与展望 | 第23-24页 |
| 第二章 哺乳动物胚胎体外培养体系(IVC)的研究概况 | 第24-34页 |
| 2.1 哺乳动物胚胎培养体系研究概述 | 第24页 |
| 2.2 胚胎培养类型及培养体系 | 第24-26页 |
| 2.2.1 单一培养体系 | 第24-25页 |
| 2.2.2 序贯培养体系 | 第25页 |
| 2.2.3 共培养体系 | 第25-26页 |
| 2.3 哺乳动物胚胎的发育机理及发育动力学 | 第26-28页 |
| 2.3.1 胚胎的发育机理 | 第26页 |
| 2.3.2 附植前胚胎发育动力学 | 第26-28页 |
| 2.4 培养液中的主要物质及对胚胎发育的影响 | 第28-33页 |
| 2.4.1 葡萄糖对胚胎发育的影响 | 第29-30页 |
| 2.4.2 氨基酸对胚胎发育的影响 | 第30页 |
| 2.4.3 铵 | 第30-31页 |
| 2.4.4 EDTA | 第31页 |
| 2.4.5 大分子物质 | 第31-32页 |
| 2.4.6 生长因子 | 第32-33页 |
| 2.5 前景与展望 | 第33-34页 |
| 第三章 培养液对转基因克隆牛胚胎发育的影响 | 第34-48页 |
| 3.1 试剂和材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 试剂与仪器 | 第35页 |
| 3.1.2 材料 | 第35-36页 |
| 3.2 方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 供体细胞的准备 | 第36-37页 |
| 3.2.2 转基因体细胞克隆胚胎的构建及体外培养 | 第37页 |
| 3.2.3 囊胚的细胞计数和凋亡染色 | 第37-38页 |
| 3.2.4 囊胚的冷冻与复苏 | 第38页 |
| 3.2.5 发育重要基因m RNA相对表达水平检测 | 第38页 |
| 3.2.6 胚胎移植 | 第38-39页 |
| 3.2.7 试验设计 | 第39页 |
| 3.2.8 数据统计与分析 | 第39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-45页 |
| 3.3.1 hLYZ的细胞转染 | 第39-40页 |
| 3.3.2 转基因阳性囊胚的检测 | 第40-41页 |
| 3.3.3 不同培养液对转基因克隆胚体外发育的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.4 不同培养液对转基因克隆囊胚细胞数和细胞凋亡的影响 | 第42页 |
| 3.3.5 不同培养液对转基因克隆囊胚的冷冻与复苏的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.6 不同培养液对转基因克隆囊胚发育重要基因的表达水平的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.7 不同培养液对转基因胚胎体内发育的影响 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 化学成分确定培养液对转基因克隆牛胚胎的研究 | 第48-59页 |
| 4.1 试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 4.1.1 试剂与材料 | 第48-49页 |
| 4.1.2 仪器 | 第49页 |
| 4.2 方法 | 第49-53页 |
| 4.2.1 供体细胞的准备 | 第49页 |
| 4.2.2 转基因体细胞克隆胚胎的构建及培养 | 第49-50页 |
| 4.2.3 囊胚的细胞计数和凋亡染色 | 第50页 |
| 4.2.4 囊胚的冷冻与复苏 | 第50页 |
| 4.2.5 发育重要基因m RNA相对表达水平的检测 | 第50页 |
| 4.2.6 印记基因Igf-2甲基化模式的检测 | 第50-52页 |
| 4.2.7 试验设计 | 第52页 |
| 4.2.8 数据统计与分析 | 第52-53页 |
| 4.3 结果 | 第53-57页 |
| 4.3.1 BSA、PVA和肌醇对转基因克隆胚胎发育的影响 | 第53页 |
| 4.3.2 DC-medium中EGF和ITS对转基因克隆胚胎发育的影响 | 第53页 |
| 4.3.3 DC-medium对转基因克隆囊胚细胞数和凋亡的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.4 DC-medium对转基因克隆囊胚冷冻与复苏的影响 | 第54页 |
| 4.3.5 DC-medium对转基因克隆囊胚重要基因的表达水平的影响 | 第54-55页 |
| 4.3.6 DC-medium对转基因克隆囊胚Igf-2甲基化模式的影响 | 第55-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-59页 |
| 4.5 小结 | 第59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简介 | 第70页 |
